XXIV Congreso de Fitopatología (Diciembre 2015)

Junio 27, 2019

XXIV Congreso Sociedad Chilena de Fitopatología

1, 2 y 3 de Diciembre de 2015

Organizan:

Instituto de Investigaciones Agropecuarias, INIA Centro Regional de Investigación La Platina

Viña del Mar – Chile

Seminarios

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Comunicaciones Orales

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Comunicaciones Póster

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Seminarios

Inocuidad Microbiológica de los Alimentos

Microbiological Food Safety
Guillermo Figueroa
Instituto de Nutrición y Tecnología de los Alimentos (INTA) de la Universidad de Chile
E-Mail: gfiguero@inta.uchile.cl

Miles de millones de personas alrededor del mundo sufren enfermedades provocadas por el
consumo de alimentos contaminados. Resolver esto se encuentra hoy en la agenda de todos los
gobiernos. Se requiere un cambio en la orientación de la investigación científica en el área de los
alimentos. Es indispensable cubrir todo el ámbito de la cadena agroalimentaria.
El origen de la contaminación biológica, química o física puede ocurrir en cualquiera de las etapas
de la cadena productiva: elaboración, producción, distribución, almacenamiento y consumo de los
alimentos. Y de estos potenciales contaminantes los de mayor impacto en la salud pública mundial
son de origen microbiano.

La globalización creciente de los mercados, el crecimiento de la industria agroalimentaria y los
cambios en los patrones de consumo han producido un aumento sostenido de los episodios de
toxi-infección alimentaria y en las consecuencias de salud que esto conlleva, como un alta
morbilidad y mortalidad. Esto es confirmado por las estadísticas publicadas por la Organización
Mundial de la Salud, ya que miles de millones de personas alrededor del mundo sufren de
enfermedades provocadas por el consumo de alimentos contaminados. Conforme a datos de la
Administración de Alimentos y Drogas de los Estados Unidos, FDA, los patógenos que con mayor
frecuencia causan enfermedades en el ámbito alimentario son Salmonella sp, Campylobacter
jejuni, Shigella sp, Staphylococcus aureus, Escherichia coli 0157:H7 y Listeria monocytogenes. Los
cuadros infecciosos más frecuentes son las toxi-infecciones alimentarias, y en menor medida otros
como la hepatitis A y la fiebre tifoidea.

Resolver el problema de la contaminación de los alimentos se encuentra hoy en la agenda de
todos los gobiernos y preocupa a los consumidores en todo el mundo. Es clave el rol de los
consumidores organizados que exigen, cada vez con mayor vigor, los alimentos de alta calidad
nutricional y además cumplan con las normativas de inocuidad en todos sus aspectos.
La disponibilidad de alimentos sanos e inocuos no sólo es parte de una política de país para dar
protección a la población, sino también permite dar cumplimiento a los compromisos y tratados
comerciales internacionales adquiridos que tienen gran influencia sobre su situación
socioeconómica.

Por este motivo al tema inocuidad de los alimentos se le ha dado un enfoque integrado en el que
todos los participantes de la cadena productiva comparten responsabilidades específicas y con ello
se abarca todo el sistema agroalimentario.

Seminarios

Aplicación de péptidos antimicrobianos contra importantes hongos fitopatógenos que
afectan cultivos comerciales

Application of Antimicrobial peptides against important fungal pathogen affecting commercial crops
Eduardo Tapia1
; Christian Montes1
; Sebastián Godoy1
; Maite Lopetegui2
; Fabiola Altimira3
; Gloria
Arenas3
; Humberto Prieto1
1
Laboratorio de Biotecnología, Instituto de Investigaciones Agropecuarias, Centro Regional de
Investigación La Platina
2
Ingeniería en Biotecnología, Universidad Nacional Andrés Bello.
3Doctorado en Biotecnología, Universidad Técnica Federico Santa María/Pontificia Universidad
Católica de Valparaíso
E-Mail: etapia@inia.cl

Los péptidos antimicrobianos (PAM) son secuencias aminoacídicas cortas, anfipáticas y de alta
cationicidad que se encuentran en distintos organismos, desde vegetales a moluscos. El espectro
de acción de estas moléculas ha demostrado ser de gran amplitud, existiéndose a aplicaciones de
biotecnología vegetal. En este trabajo se diseñaron genes sintéticos basados en secuencias
aminoacídicas del PAM Ap-S proveniente del molusco Argopecten purpuratus. La estrategia de
diseño de genes consideró el uso de codones predichos como útiles para expresión tanto en
Echerichia coli como en Nicotiana tabacum. Los genes incluyeron señales de corte, purificación y
detección de los péptidos. En E. coli, se encontró una dependencia de la temperatura para producir
Pre-TEV/rApS, siendo 26°C el valor óptimo de cultivo con resultado productivo de 768 µg/mL. El
uso de rApS purificado contra los fitopatógenos Alternaria sp., B. cinerea y F. oxysporum, mostró
inhibición tanto del crecimiento de las hifas como de la formación de esporas en todos los hongos
evaluados. La identidad de los PAMs recombinantes obtenidos en bacterias (Pre-TEV/rApS y rApS)
fue corroborada por MALDI-TOF/TOF, confirmando la correcta lectura desde el gen diseñado. En
N. tabacum se utilizó el promotor constitutivo 35SCaMV y se logró la generación de 44 líneas
homocigotas candidatas. Extractos de proteínas totales desde estas plantas se utilizaron en
ensayos de inhibición de crecimiento en placa Petri, permitiendo la identificación y caracterización
de las mejores líneas transgénicas. Los mejores individuos generados mostraron inhibición del
crecimiento radial en B. cinerea, F. oysporum y M. laxa. Además, las mejores líneas generadas
fueron evaluadas a través Westernblot utilizando anticuerpos anti-TEV que ratificaron la presencia
del péptido en los extractos utilizados. Los resultados obtenidos proyectan el uso de PAM desde
bacteria o extractos directos de plantas para su utilización biotecnológica como biocontrolador
amigable a la naturaleza.

Seminarios

Secuenciación del genoma del fitoplasmas 16SrIII-J

Draft genome sequence of 16SrIII-J phytoplasma
Alan Zamorano; Nicola Fiore
Departamento de Sanidad Vegetal, Facultad de Ciencias Agronómicas, Universidad de Chile,
Santiago, Chile.
E-Mail: agezac@u.uchile.cl

El fitoplasma perteneciente al subgrupo ribosomal 16SrIII-J (X-disease group) se ha reportado en
Chile y Sudamérica en diversos cultivos, tanto herbáceos como leñosos. Adicionalmente en Chile,
Paratanus exitiosus y Bergallia Valdiviana, transmitieron exitosamente este fitoplasma a vinca. De
una de estas vincas infectadas con el fitoplasma 16SrIII-J y de otra sana fueron sometidas a
secuenciación masiva utilizando Illumina MiSeq. Las lecturas de la vinca positiva fueron
ensambladas de novo utilizando VELVET. De un total de 263.786 contigs obtenidos, se filtró por
profundidad, seleccionando todas aquellos contigs con una profundidad mayor que 10X. Los 1.550
contigs obtenidos fueron mapeados contra las secuencias de la vinca negativa, descartando todos
aquellos que tenían identidad con una o más lecturas. 475 contigs resultantes fueron sometidos a
un mapeo contra las lecturas obtenidas inicialmente en la vinca positiva. 137.260 lecturas fueron
nuevamente ensambladas de novo en CLC genomics workbench v7, entregando 56 contigs
(734.673 bp), cuyo contenido G+C es de 28,4%. Se determinaron marcos de lectura utilizando el
programa predictivo RAST (http://rast.nmpdr.org). Se identificó la presencia del gen IdpA,
específico del “X-disease group”, con un 85% de identidad nucleotídica con “PoiBI” phytoplasma y
con “ICP” phytoplasma, ambos pertenecientes al X-disease group. No se identificaron genes que
codifican para SAP11, SAP54, Amp and TENGU, proteínas efectoras secretados por translocasas
que han sido directamente relacionados con los mecanismos de patogenicidad en otras especies
de fitoplasmas, pero se identificaron 11 genes codificantes para proteínas hipotéticas y que
llevaban el motivo SVM, péptido señal determinante de la secreción por translocasas. Este
representa el primer trabajo de secuenciación del genoma del fitoplasmas 16SrIII-J. La información
obtenida en este trabajo permitirá mejorar los protocolos de detección por PCR, además de
establecer los efectores asociados a la patogenicidad de este patógeno.

Agradecimientos: Proyecto FONDECYT 2014 N° 1140883

Seminarios

Dilucidando el perfil viral presente en papas nativas de Chiloé: antiguos y nuevos virus

Deciphering the native potatoes virome: old and new players
Elizabeth Peña1
; Mónica Gutiérrez2
; Alejandro Montecinos3; Rodrigo Gutiérrez3
; Armelle Marais4
;
Thierry Candresse4
; Marlene Rosales1
1
Facultad de Agronomía e Ingeniería Forestal, Pontificia Universidad Católica de Chile
2
Laboratorio Regional Osorno, Servicio Agrícola y Ganadero
3
Facultad de Ciencias Biológicas, Pontificia Universidad Católica de Chile
4
Equipe de Virologie, INRA-Bordeaux.
E-Mail: erpena@uc.cl

Variedades nativas de papa (Solanum tuberosum L. ssp. tuberosum) originadas en los
Archipiélagos de Chiloé y Los Chonos en el sur del país presentan gran diversidad en términos de
forma, tamaño, color y sabor; resultando en un creciente interés por el cultivo de estas variedades.
Sin embargo, estudios que incluyan identificación y caracterización de los agentes fitopatógenos
que las afectan son limitados. Dentro de estos patógenos, destacan los virus, los cuales carecen
de genes universales para ser utilizados como una herramienta de diagnóstico, limitando así el
acceso a estudios de diversidad y composición viral en ambientes nativos. A través de una
aproximación metagenómica seguida de secuenciación masiva y ensamble comparativo a
genomas de referencia se encontró Potato mop-top virus (PMTV) infectando papas nativas
provenientes del Archipiélago de Chiloé. Previo a este estudio, PMTV tenía carácter de virus
cuarentenado, por lo que fue corroborado mediante RT-PCR y ELISA. Adicionalmente, junto a la
presencia de virus como PVY, PVA, PVS, PVX y PLRV se encontró alta homología a diversas
especies de Carlavirus que infectan plantas ornamentales, derivando más tarde al descubrimiento
de una nueva especie del género. La secuencia completa de un aislado del virus fue obtenida a
través de LD-PCR y 5’-RACE. Análisis de la secuencia genómica reveló que el nuevo virus
presenta una organización genómica característica del género, con un genoma de ARN de simple
hebra positivo de 8422 nt sin incluir la cola de Poli-A. Secuencias aminoacídicas derivadas de los
genes de la CP y RdRp mostraron porcentajes de identidad de 32.3-73.9% y 49.2-57.7%
respectivamente al compararlas con las descritas para otros Carlavirus, cumpliendo así con el
criterio de demarcación de especies. Estos resultados proveen información importante para ser
considerada en programas de monitoreo y manejo de patógenos que afectan el cultivo de papas en
el país incluyendo la producción de tubérculo semilla de papa.

Agradecimientos: Proyecto de Tesis en la Empresa PAI 7813110004. Gastos de Operación de
CONICYT, folio 21120444.

Seminarios

Evaluación de agua activada con plasma y bacillus spp., contra bacterias fitopatógenas

Evaluation of plasma activated water and bacillus spp., against bacterial pathogens
Set Perez1
; Enrico Biondi1
; Matteo Gherardi3
; Romolo Laurita3
; Augusto Stancampiano3
; Carla
Lucchese1
; Edith Ladurner4
; Vittorio Colombo2,3; Assunta Bertaccini1
1Department of Agricultural Sciences (DipSA), Alma Mater Studiorum – University of Bologna
2
Industrial Research Centre for Advanced Mechanics and Materials (CIRI-MAM ), Alma Mater
Studiorum – University of Bologna
3 Department of Industrial Engineering (DIN), Alma Mater Studiorum – University of Bologna
4 CBC (Europe) S.r.l., Cesena, Italy
E-Mail: set.perezfuentealba2@unibo.it

El control de enfermedades bacterianas, actualmente es limitada a productos a base de cobre,
antibióticos, inductores de resistencia y agentes biocontroladores; no obstante, la profilaxis aún
permanece como importante medida de control. En este estudio, fue evaluada la eficacia in vitro
(método por difusión y dilución) del agua activada con plasma (PAW) contra dos bacterias
fitopatógenas, Xanthomonas vesicatoria (Xv) y Pseudomonas syringae pv. actinidiae (Psa). Para el
propósito de obtener PAW, fue usada agua desionizada estéril y como electrodos de la fuente del
plasma, papel aluminio cubierto por 1 mm de poliestireno como dieléctrico. El tratamiento consistió
en diez minutos con voltaje de 19 kV y frecuencia de repetición de impulsos 1.000 Hz; esto ha
inducido en PAW, presencia de nitratos, nitritos, peróxidos, y reducción del pH (ca. 3). El efecto de
PAW, también fue evaluado in vivo sobre plantas de tomates inoculadas experimentalmente con
Xv en condiciones de invernadero.

Por otra parte, fueron realizadas pruebas de inhibición in vitro (método por difusión) usando
Bacillus spp. cepas D747 y QST 713, confrontadas con Psa; esta habilidad, fue también evaluada
en plantas de kiwi, inoculadas experimentalmente con Psa en condiciones controladas. Los
resultados demostraron que PAW in vitro, aplicado 30 min posterior al tratamiento con plasma, no
mostró eficacia directa contra Xv o Psa. Interesantemente, la severidad de la enfermedad
provocada por Xv, fue significativamente menor en el tratamiento radical con PAW, evidenciando
protección relativa de ca. 35%; no fue observado efecto fitotóxico. En experimentos in vitro, las dos
cepas de Bacillus han inducido producción de compuestos antimicrobicos, inhibiendo el
crecimiento de Psa. Asimismo, ambos tratamientos estuvieron en grado de reducir
significativamente la severidad de la enfermedad causada por Psa.

Estos interesantes resultados preliminares, son considerados promisorios especialmente en la
agricultura sostenible, orientados a reducir el uso de metales pesados o antibióticos en el manejo
de las enfermedades provocadas por bacterias fitopatógenas.

Comunicaciones Orales

Actualización sobre la situación del Control Oficial de Plum Pox Virus raza D en Chile,
Servicio Agrícola y Ganadero

Update status of the Official Control for Plum Pox Virus D strain in Chile, Servicio Agrícola y
Ganadero
María Eugenia Murillo; Sandra Bustos; Carolina San Martín
Servicio Agrícola Ganadero (SAG), Subdepto. Sanidad Vegetal, Sección Vigilancia Fitosanitaria
Agrícola
E-Mail: mariaeugenia.murillo@sag.gob.cl

El Plum Pox Virus raza D en Chile, se encuentra reglamentado desde el año 1994 mediante
Resolución N° 794 y sus modificaciones, en las especies ciruelo (Prunus salicina, P. domestica),
damasco (P. armeniaca), duraznero (P. persica), nectarino (P. persica var. nucipersica) y todas las
especies referidas, que no incluyan almendros (P. dulcis), como también nemaguard y similares (P.
persica x P. davidiana).

Se evaluaron los resultados de muestreo de plantas madres desde el año 1995 a la fecha, período
en que se analizó un total de 363.784 plantas declaradas como plantas madres. De acuerdo a los
resultados de laboratorio, mediante las técnicas ELISA y PCR, 362.805 fueron negativas a PPV y
sólo 979 positivas al virus, las cuales han sido destruidas en su totalidad, lo que corresponde a un
total de 0,26% del total de plantas analizadas. Cabe señalar que el porcentaje de incidencia del
virus en el año 1995 correspondió a un 1,63%, en tanto que en el año 2015, el porcentaje de
incidencia fue de un 0,41 %, lo que demuestra una disminución del número de plantas madres
positivas a PPV, logrando cumplir el objetivo del control oficial que es la contención del virus en las
zonas donde se ha detectado los focos en las regiones Metropolitana, O´Higgins y Valparaíso.

También cabe señalar, que la plaga se encuentra reglamentada a nivel de viveros de carozos
mediante la Resolución N°981 de 2011 y que en forma permanente se realizan labores de
fiscalización en los viveros como a los depósitos de plantas con el objetivo de determinar origen de
material de propagación.

Se destaca también que el estatus de PPV, como plaga cuarentenaria bajo control oficial,
constituye una declaración adicional para muchos países donde se comercializa material de
propagación y fruta de carozos, influyendo en la apertura o mantención de mercados.

Comunicaciones Orales

Virus y viroides presentes en manzano (Malus domestica Bork) en Chile

Viruses and viroids infecting apple tree (Malus domestica Bork) in Chile
Paloma Méndez; Nicolás Quiroga; Ana María Pino; Alan Zamorano; Nicola Fiore
Departamento de Sanidad Vegetal, Facultad de Ciencias Agronómicas, Universidad de Chile,
Santiago, Chile
E-Mail: paloma.mendezr@gmail.com

Chile se ubica en el segundo lugar a nivel mundial en la exportación de manzanas. Debido a esto,
el conocimiento del estado sanitario, particularmente de aquellas enfermedades que afectan la
calidad de la fruta, es de alta importancia. Dentro de ellas destacan las enfermedades causadas
por virus y viroides, las cuales están ampliamente distribuídas a nivel mundial. En Chile se realizó
una prospección en el año 2002, logrando detectar Tomato ringspot virus (ToRSV), Apple mosaic
virus (ApMV) y Apple chlorotic leaf spot virus (ACLSV). Actualmente, en otras regiones productoras
en el mundo, se han reportado otros virus que infectan al manzano como Apple green crinkle virus
(AGCV), Apple stem grooving virus (ASGV), Tulare apple mosaic virus (TAMV), Cherry rasp leaf
virus (CRLV), además de los viroides Apple scar skin viroid (ASSVd), Apple fruit crinkle viroid
(AFCVd), Apple dimple fruit viroid (ADFVd) y Pear blister canker viroid (PBCVd), de los cuales no
existe información en el país. Durante el año 2014 se recolectaron 100 muestras en las principales
regiones productoras del país: Metropolitana, O’Higgins y Maule. Se realizaron análisis por RTPCR
con partidores disponibles en literatura. Se encontró una alta prevalencia de ApMV, ASGV y
ASPV alcanzando un 41%, 47%, y 34%, respectivamente. ACLSV y PBCVd se encontraron
respectivamente en un 15% y 3% de las muestras analizadas. Se alcanzó un 32% de infecciones
dobles y un 12% de infecciones triples. Dos muestras estaban infectadas con cuatro patógenos. No
se encontraron muestras positivas a ToRSV, en contraste con estudios previos. Para nuestro
conocimiento, este es el primer reporte de ASGV y ASPV en Chile y el primer reporte de PBCVd en
Sudamérica. Estos resultados proveen importante información para desarrollar protocolos más
estrictos de control del material de propagación.

Agradecimientos: Proyecto FONDECYT 2014 N° 1140883.

Comunicaciones Orales

Caracterización de Apple mosaic virus, ApMV; Apple chlorotic leaf spot virus, ACLSV y
Tomato ringspot virus, ToRSV en huertos de manzano de la Región del Maule

Characterization of Apple mosaic virus, ApMV, Apple chlorotic leaf spot virus, ACLSV and Tomato
ringspot virus, ToRSV in apple orchards in the Maule Region
Fernanda Núñez1
; Claudio Sandoval1
; Valentina Mujica2
; Mauricio Lolas1
1
Laboratoro de Fitopatología, Facultad de Ciencias Agrarias, Universidad de Talca, Talca, Chile
2
INIA, Las Brujas, Uruguay
E-Mail: fnunez@utalca.cl

El manzano es uno de los principales frutales a nivel mundial y en Chile ocupa el segundo lugar en
cuanto a superficie plantada, siendo la Región del Maule la que concentra la mayor superficie.
Dentro de los factores productivos que afectan la calidad de la fruta están los diferentes patógenos
que atacan este cultivo, constituyendo los virus dentro de éstos, un factor de importancia. Las
virosis afectan tanto la calidad de las plantas en vivero, como también su crecimiento, producción,
calidad de fruta y la vida de postcosecha. En la actualidad se desconoce la importancia de Apple
mosaic virus (ApMV), Apple chlorotic leaf spot virus (ACLSV) y Tomato ringspot virus (ToRSV) en
huertos comerciales de manzano. Con este propósito se realizó una prospección y caracterización
de ApMV, ACLSV y ToRSV en huertos comerciales de manzano de la Región del Maule. Las
muestras colectadas (151) se analizaron a través de DAS-ELISA y RT-PCR. Con la técnica DASELISA
1,3% resultó positivo a ApMV, un 2,0% para ACLSV y negativos para ToRSV. Por otra
parte, con la técnica Molecular RT-PCR un 6,0% resultó positivo para ApMV, un 40,4% para
ACLSV y un 7,2% para ToRSV. Las secuencias y el análisis filogenético de aislados de ApMV y
ACLSV, indican que proteína de la cápside del ApMV encontradas en la Región del Maule, éstas
se distancian de las secuencias depositadas en el GenBank. Situación similar se obtiene con el
árbol filogenético de ACLSV, donde las secuencias de los aislados también se distancian de los
depósitos en GenBank. Ésto podría indicar que las secuencias de los aislados presentes en la
Región del Maule muestras diferencias en cuanto a distancia evolutiva.

Comunicaciones Orales

Detección y caracterización molecular de fitoplasmas asociados al peral en Chile

Detection and molecular characterization of phytoplasmas associated to pear trees (Pyrus
communis L.) in Chile
Rosany Facundo; Nicolás Quiroga; Paloma Méndez; Alan Zamorano; Nicola Fiore
Departamento de Sanidad Vegetal, Facultad de Ciencias Agronómicas, Universidad de Chile,
Santiago, Chile
E-Mail: roxyannaa@gmail.com

Las enfermedades causadas por fitoplasmas generan grandes pérdidas económicas en cultivos en
el mundo. En el peral se ha reportado una severa enfermedad, el decaimiento del peral, asociada a
estos patógenos. En Chile, a pesar de la importancia económica que ha ido adquiriendo este
cultivo, no se han realizado estudios sobre la presencia de estos patógenos. Se colectaron
muestras con síntomas asociados a enfermedades causadas por fitoplasmas, en las principales
zonas productoras de peral en Chile. Se realizó la detección y caracterización del patógeno
mediante reacción en cadena de la polimerasa anidada (PCR-anidada) orientada a los genes tuf y
16Sr RNA. Los amplicones obtenidos fueron clonados y cinco colonias fueron sometidas a
secuenciación de ADN. Con las secuencias se realizó un análisis bioinformático usando
alineamientos, filogenia y RFLP in silico. De las muestras colectadas, hasta el momento se ha
detectado la presencia de fitoplasmas en dos muestras procedentes de la región del Maule: un
peral variedad D’Anjou que presentaba bajo vigor, necrosis en el floema y enrojecimiento de hojas
y un peral variedad Abate Fetel que presentaba necrosis en floema, enrojecimiento de hojas y
defoliación temprana. En ambas muestras se ha detectado la presencia del fitoplasma 16SrIII-J,
ampliamente distribuido en Chile y asociado a cultivos herbáceos y leñosos. En el huerto de la
variedad D’Anjou se había detectado y caracterizado el mismo fitoplasma también en Galega
officinalis L., una maleza habitualmente presente en la zona central de Chile. Este trabajo
representa la primera detección de fitoplasmas en pomáceas en Chile.

Agradecimientos: Proyecto FONDECYT 2014 N° 1140883.

Comunicaciones Orales

Detección y caracterización molecular de fitoplasmas asociados a frutales de carozo en
Chile

Detection and molecular characterization of phytoplasmas infecting stone-fruit trees in Chile
Claudia Rebolledo; Nicolás Quiroga; Rosany Facundo; Alan Zamorano; Nicola Fiore
Departamento de Sanidad Vegetal, Facultad de Ciencias Agronómicas, Universidad de Chile,
Santiago, Chile.
E-Mail: claurebo@gmail.com

En Chile el mayor volumen de frutos y principal retorno económico de las exportaciones agrícolas
corresponde a los generados por los frutales de carozo. Entre las enfermedades que afectan a
estas especies vegetales a nivel mundial, los fitoplasmas han tomado relevancia, principalmente
debido a la disminución tanto de la producción como de la calidad de los frutos. El control de las
fitoplasmosis es prevalentemente de tipo preventivo, por lo tanto es necesario contar con
herramientas de detección rápidas y sensibles. Actualmente en Chile se dispone de informaciones
acerca de la presencia del fitoplasma 16SrIII-J en cerezo y de ‘Candidatus Phytoplasma solani’
(16SrXII-A) en durazno. Estas han sido dos detecciones puntuales y, no disponiendo de datos
prospectivos, se procedió a realizar un muestreo en las principales regiones productoras de
frutales de carozo. Se colectaron muestras con síntomas que, de acuerdo a la literatura, podrían
estar asociados a la presencia de fitoplasmas. Para la detección y caracterización de los
fitoplasmas se amplificaron, a través de PCR anidada (“nested PCR”), dos regiones del genoma
correspondientes a los genes tuf y 16S rRNA. Cada producto de amplificación fue clonado y cinco
colonias fueron secuenciadas para discriminar posibles infecciones múltiples. La caracterización
molecular se completó con un análisis bioinformático que incluye alineamientos, filogenia y RFLP
virtual (in silico). Una muestra de durazno de la región de Valparaíso que presentaba decaimiento
severo, hojas encarrujadas y amarillas y una muestra de cerezo colectada en la región del Maule
que presentaba necrosis de floema, brazos muertos y decaimiento generalizado, fueron detectadas
positivas a fitoplasma por ambos genes. El análisis bioinformático permitió determinar que ambos
aislados pertenecen al subgrupo ribosomal 16SrIII-J (perteneciente al “X-disease group”). Este
fitoplasma se encuentra ampliamente distribuido en Chile, tanto en cultivos herbáceos como
leñosos, incluyendo el cerezo. Esta corresponde a la primera detección del fitoplasmas 16SrIII-J en
duraznero en Chile.

Agradecimientos: Proyecto FONDECYT 2014 N° 1140883.

Comunicaciones Orales

Detección y caracterización de los viroides que afectan a la vid en Chile

Detection and characterization of Chilean isolates of grapevine viroids
Nicola Fiore; Ximena González; Nicolás Quiroga; Alan Zamorano
Universidad de Chile, Facultad de Ciencias Agronómicas, Departamento de Sanidad Vegetal;
Santiago, Chile.
E-Mail: nfiore@uchile.cl

Los viroides más frecuentes en vid a nivel mundial son: Hop stunt viroid (HSVd), Australian
grapevine viroid (AGVd), Citrus exocortis viroid (CEVd), Grapevine yellow speckle viroid 1 y 2
(GYSVd-1, 2). Con el fin de detectar y caracterizar los viroides de la vid presentes en Chile, se
colectaron 110 muestras desde Atacama hasta el Maule. El RNA se extrajo utilizando el método de
captura con sílice. La detección se realizó con RT-PCR utilizando primer específicos para cada
viroide. Los productos de amplificación se purificaron y clonaron. Los análisis bioinformáticos se
han realizado utilizando MEGA6.0. HSVd ha sido detectado en 91,0% de las muestras analizadas,
GYSVd-1 en 20,0%, GYSVd-2 en 10,9%, AGVd en 9,1% y CEVd en ninguna. HSVd es un viroide
polífago que parece haber coevolucionado con la vid, por lo tanto es común encontrar altos
porcentajes de infección). El análisis filogenético indica que los aislados chilenos se distribuyen en
los grupos P-H/Cit3 y Hop, ambos constituidos por aislados de HSVd que infectan a la vid. Se
observa una alta asociación entre la variedad Syrah y GYSVd-1, que ha sido detectado en 10
muestras sobre 15, todas desde plantas con “Syrah Decline”. Los aislados chilenos de GYSVd-1
pertenecen a las variantes 1 (asintomática) y 3 (sintomática). Siete de los nueve aislados de
GYSVd-1 secuenciados corresponden a la variante 3, pero solo uno de ellos manifestó el síntomas
del “bandeado de nervaduras” de hojas en una planta infectada también con Grapevine fanleaf
virus. GYSVd-2 y AGVd resultaron más frecuentes en uva de mesa. Todos los aislados chilenos de
GYSVd-2 se agrupan entre sí y con aislados chinos y australianos. El análisis filogenético realizado
para GYSVd-1, GYSVd-2 y AGVd, en contraste con lo afirmado en anteriores trabajos, no indica
asociación entre el origen geográfico y la agrupación de las diferentes variantes. Esta es la primera
detección y caracterización de viroides de la vid en Sudamérica.

Agradecimientos: CONICYT proyecto Nº 21090139, Ministerio de Educación, Gobierno de Chile.

Comunicaciones Orales

Nuevo virus afecta el cultivo de la lechuga (Lactuca sativa L.) en las regiones de Coquimbo y
Metropolitana

A new virus disease affecting lettuce (Lactuca sativa L.) crops in the two regions of Chile
Mónica Madariaga; Paulina Sepúlveda; Isabel Ramírez; Roxana Mora; Luís Felipe Muñoz
Instituto de Investigaciones Agropecuarias. Centro Regional de Investigación La Platina
E-Mail: mmadariaga@inia.cl

La lechuga es una hortaliza de alto consumo cuyo cultivo se focaliza en las Regiones
Metropolitana, Coquimbo y Valparaíso. En cultivos de verano e invierno en las temporadas 2013 al
2015 en el sector Pan de Azúcar de la Región de Coquimbo, se observaron en plantas de lechuga
del tipo costina, escarola y milanesa, síntomas de manchas necróticas en el borde y centro de la
hoja que llevaban finalmente a la muerte de planta. Impatiens necrotic spot virus (INSV) fue
identificado como el agente causal de esta sintomatología mediante la aplicación de técnicas de
detección serológicas y moleculares. Considerando, la implicancia económica que tiene INSV en el
cultivo de esta hortaliza, se planteó como objetivo para este trabajo determinar la presencia del
virus en otras regiones productoras de lechuga. Se visitaron cultivos en diversas comunas de la
Región Metropolitana y Valparaíso. Sólo se observó sintomatología similar a la descrita
anteriormente en la comuna de Melipilla en lechugas tipo milanesa provenientes de plantaciones
de invierno. El porcentaje del cultivo afectado con esta sintomatología fue de alrededor del 50% en
promedio. Se tomaron muestras con síntomas y se realizó un RT-PCR con partidores específicos
para INSV (5´-GATCTGTCCTGGGATTGTTC-3’/5′-GTCTCCTTCTGGTTCTATAATCAT-3′). Los
resultados mostraron una banda esperada de 459 pb. El producto de PCR obtenido fue clonado,
purificado y posteriormente secuenciado en Macrogen. La secuencia obtenida fue comparada con
aquellas disponibles en la base de dato NCBI, obteniéndose una identidad de 99% con la región M
del genoma de INSV. La identidad del virus fue corroborada mediante la prueba serológica ELISA
con anticuerpos comerciales (Bioreba) específicos para INSV.

Comunicaciones Orales

Caracterización molecular de un fitoplasma asociado a filodia y escoba de brujas de frutilla
(Fragaria x ananasa)

Molecular characterization of a phytoplasma associated to phyllody and witches’broom in
strawberry (Fragaria x ananasa)
Nicolás Quiroga1
; Marcelo Cabrera2
; Mariella Valdera2
; Eugenio Rodríguez3
; Rosa Coronado3
; Alan
Zamorano1
; Nicola Fiore1
1Departamento de Sanidad Vegetal, Facultad de Ciencias Agronómicas, Universidad de Chile,
Santiago, Chile
2
Servicio Agrícola y Ganadero, Laboratorios y Estaciones Cuarentenarias de Lo Aguirre, Santiago,
Chile
3
Servicio Agrícola y Ganadero, Oficina San Antonio, San Antonio, Chile
E-Mail: nicolasquirogabarrera@gmail.com

Para el cultivo de la frutilla en Chile actualmente se ocupan 1.272 ha, siendo el consumo local y la
exportación en congelado el principal destino de la producción. El volumen exportado alcanza las
15.333 toneladas y se estima que se mantendrá, ya que el consumo de frutillas en los principales
países importadores (Japón, Estados unidos, China y Canadá) está creciendo. Actualmente en
Chile no se dispone de informaciones acerca de la presencia de fitoplasmas en frutilla. Durante el
verano del 2015 en la comuna de Santo Domingo, región de Valparaíso, se colectaron plantas de
frutillas de la variedad Camarosa (Fragaria x Ananassa Duch.) con síntomas de filodia y
proliferación de brotes. Para la detección y caracterización de los fitoplasmas se amplificaron, a
través de PCR anidada (“nested PCR”), dos regiones del genoma correspondientes a los genes tuf
y 16Sr RNA. Cada producto de amplificación fue clonado utilizando el vector pGEM-T. Cinco
colonias fueron secuenciadas para discriminar posibles infecciones múltiples. La caracterización
molecular se completó con un análisis bioinformático que incluye alineamientos, filogenia y RFLP
virtual (in silico). Tres muestras fueron detectadas positivas a fitoplasma por ambos genes. El
análisis bioinformático permitió determinar que estos aislados pertenecen al subgrupo ribosomal
16SrXIII-F, con un 99,8% de identidad nucleotídica con un aislado reportado en Argentina
causando enrojecimiento de hojas de la frutilla (Accession number KJ921643). Esta es la primera
indicación de un fitoplasma perteneciente al grupo ribosomal 16SrXIII afectando cultivos en Chile,
así como también el primer fitoplasma reportado en el cultivo de frutilla en el país.

Agradecimientos: Proyecto FONDECYT 2014 N° 1140883.

Comunicaciones Orales

Prevalencia de dos Begomovirus, TYVSV y ToLDeV, en cultivo de Tomate en la Región de
Arica y Parinacota

Prevalence of two Begomovirus TYVSV and ToLDeV in Tomato crops in Arica and Parinacota
Region
Claudia Rojas1
; Jesús Navas2
; Katherine Plaza1
; Paulina Sepúlveda3
; Marlene Rosales1
1
Pontificia Universidad Católica de Chile
2
Instituto de Hortofruticultura Subtropical y Mediterránea La Mayora, España
3
Instituto de Investigaciones Agropecuarias, Centro Regional de Investigación La Platina
E-Mail: carojas12@uc.cl

El valle de Azapa es el principal abastecedor de tomate de consumo fresco para la zona central de
Chile durante los meses invernales. El año 2007 las plantaciones de tomate se vieron afectadas
por enfermedades de origen viral ocasionando pérdidas entre un 30 a 70% de rendimiento.
Análisis mediante PCR durante el período 2009-2010 arrojó que los principales virus presentes
correspondieron a PepMV, Potivirus y Begomovirus presentando una prevalencia de 26,9%, 26,9 y
57% respectivamente. Este trabajo tiene como objetivo determinar la prevalencia de los
begomovirus Tomato yellow vein streak virus (TYVSV) y Tomato leaf deformation virus (ToLDeV)
en cultivos de tomate, malezas y plantas nativas presentes en los valles de la región de Arica y
Parinacota. Para ello se colectaron 641 muestras de tejido vegetal de distintas plantaciones de
tomate en la región, las cuales fueron analizadas mediante hibridación molecular. Del total de
muestras analizadas, el 37% resultaron positivas a TYVSV mientras que un 11% fueron positivas
para ToLDeV. Además el 8,3% presentó infección mixta con ambos begomovirus. Este trabajo da
cuenta de un segundo begomovirus (ToLDeV) afectando los cultivos de tomate en la región de
Arica y Parinacota, presentando una menor prevalencia que el begomovirus previamente descrito
(TYVSV).

Agradecimientos: Proyecto Tesis de Doctorado en la Industria Folio N° 7813110003.
“Caracterización de agentes virales afectando cultivos de tomate en la región de Arica y
Parinacota”.

Comunicaciones Orales

Prevalencia de virus en lilium entre Regiones de Valparaíso a Los Lagos en Chile

Prevalence of lily viruses from the Region of Valparaíso to Los Lagos in Chile
Estefanía Farías; Marcela Paz Muñoz; Natalia Vega; Marlene Rosales
Facultad de Agronomía e Ingeniería Forestal, Pontificia Universidad Católica de Chile, Santiago,
Chile
E-Mail: egfarias@uc.cl

La producción de lilium (Lilium sp.) representa una actividad comercial importante para Chile, país
que se posicionó en el 2013 como cuarto exportador mundial de bulbos de flor. El objetivo de este
trabajo fue actualizar la información sobre la situación fitosanitaria de este cultivo a nivel nacional y
a nivel de mercado. Durante el año 2014 se colectaron bulbos de lilium de las comunas de
Limache, Hijuelas y Nogales (Región de Valparaíso), San Vicente y Doñihue (Región del Libertador
Bernardo O’Higgins), San Rafael (Región del Maule), Los Ángeles (Región de Bío-Bío), Rio Bueno
(Región de Los Ríos) y Osorno, Purranque y Puyehue (Región de Los Lagos) en Chile. Los bulbos
fueron seleccionados de forma no dirigida desde el campo, para el caso de las flores de corte, o
desde las líneas de procesamiento cuando se trataba de bulbos de exportación; de esta forma se
dispuso de material destinado para ambos mercados. Durante el año 2015 se determinó mediante
la técnica RT-PCR la prevalencia de cinco virus: Alfalfa Mosaic Virus (AMV), Lily Symptomless
Virus (LSV), Lily Mottle Virus (LMoV), Lily Virus X (LVX) y Tobacco Rattle Virus (TRV), en un total
de 502 muestras. Del total de muestras analizadas, 325 fueron positivas a uno o más de los virus
mencionados, lo que corresponde a un 64,7% de muestras positivas. LMoV, LSV y LVX fueron los
virus más prevalentes, presentándose en un 27,5; 22,5 y 17,5% de los casos, respectivamente. En
cuanto al análisis por mercado, un 72,6% de las muestras resultó positiva para uno o más virus en
el mercado de flores y un 58,9% en el mercado de bulbos de exportación. Los resultados indican
que LMoV es el virus de mayor prevalencia en el territorio nacional y que el mercado de flores de
corte presenta un mayor número de muestras positivas con respecto al mercado de bulbos de
exportación.

Agradecimientos: Proyecto FONDEF IDeA CA13I10208.

Comunicaciones Orales

Detección molecular y serológica de Lily symptomless virus en bulbos de lilium

Molecular and serological detection of Lily symptomless virus from lily bulbs
Araceli Vidal; Estefanía Farías, Marcela Paz Muñoz; Marlene Rosales
Laboratorio de Fitopatología Molecular. Facultad de Agronomía e Ingeniería Forestal. Pontificia
Universidad Católica de Chile
E-Mail: araceli.vidal.a@gmail.com

El lilium es una planta bulbosa muy relevante debido a su venta como planta de maceta, flor de
corte y exportación de bulbos. A nivel internacional, Chile ocupa el cuarto lugar entre los mayores
exportadores de bulbos de flores y es el primero en Sudamérica. Para la exportación de bulbos
debe certificarse que éstos se encuentran libres de patógenos, y en el caso de los virus, éstos a
menudo son difíciles de identificar. Actualmente, la técnica de referencia para la certificación de
virus en bulbos de lilium en Chile es la prueba de ELISA. Aunque existen antecedentes que indican
que la detección por medio de la transcripción reversa acoplado al PCR (RT- PCR) es más
sensible para la detección de virus vegetales respecto del ELISA, la reacción de PCR puede ser
inhibida debido a la presencia de polisacáridos o fenoles presentes en el RNA extraído desde el
bulbo de lilium. Por esta razón, el objetivo de este trabajo fue evaluar la detección de Lily
symptomless virus (LSV) por RT-PCR, dado que LSV es el virus más prevalente a nivel mundial en
este cultivo ornamental. Para esto, se utilizó un kit comercial para realizar la extracción de ácidos
ribonucleicos (ARN) desde escamas internas y externas de bulbo, material que fue posteriormente
utilizando con éxito en la detección del virus mediante RT-PCR. Los resultados muestran que la
eficiencia de la extracción de RNA es mayor en escamas internas del bulbo. No obstante, se logró
detectar LSV mediante RT-PCR en ambos tipos de escamas, mostrando una distribución irregular
del virus en estos tejidos. Adicionalmente se comparó los resultados de la detección de LSV en
escamas de bulbos de lilium mediante las técnicas de RT-PCR y ELISA.

Agradecimientos: Proyecto Fondef IDeA CA13I10208.

Comunicaciones Orales

Obtención de bulbillos de lilium libres de virus LSV y LMoV, mediante cultivo de meristemas
y termoterapia en el cultivar “Manissa”

Production of lily virus-free bulblets using meristem culture and thermoterapy in cv. “Manissa”
Carolina Fernández; Ann Scott; Marlene Rosales; Marlene Gebauer
Facultad de Agronomía e Ingeniería Forestal, Pontificia Universidad Católica de Chile, Santiago,
Chile
E-Mail: crfernan@uc.cl

Chile es el mayor exportador de Sudamérica de bulbos de flores en contra-estación para el
hemisferio norte, siendo el cuarto exportador a nivel mundial. Lilium es la principal especie
exportada como bulbo de flor en reposo vegetativo, representando el 85% del total de las
exportaciones. La calidad de los bulbos con los que se trabaja, es de gran importancia debido a
que el mercado tiene estándares internacionales de calidad, que busca productos libre de plagas
y/o enfermedades como las causadas por virus.

Cultivares comerciales de lilium han mostrado síntomas de infección por virus luego de años de
reproducción asexual y cultivo en el campo, disminuyendo su productividad y calidad. La utilización
de técnicas de saneamiento como cultivo de meristemas, termoterapia, quimioterapia o una
combinación de ellas, ha mostrado buenos resultados en la obtención de material limpio para
propagar.

Con el fin de obtener plantas madres de calidad y que estén libres de enfermedades virales se
estableció un sistema de saneamiento vegetal utilizando bulbos infectados del cultivar “Manissa”
(OT), producidos ampliamente en nuestro país. Se realizaron diferentes ensayos utilizando
microbulbilllos establecidos in vitro para aislar los meristemas. Se evaluó la sobrevivencia y
limpieza de los meristemas en relación al tamaño. Se logró sanear plántulas infectadas con Lily
Symptomless Virus (LSV), Lily Mottle Virus (LMoV) o con ambos. También se está evaluando la
termoterapia como técnica de saneamiento, mediante parámetros como temperatura, tamaño del
explante y tiempo crítico para la sobrevivencia de microbulbillos, de esta forma se podrá facilitar la
eliminación de diferentes virus encontrados en la prospección realizada en Chile.

Agradecimientos: Proyecto Fondef IDEA CA13I10208.

Comunicaciones Orales

Detección de PVY y PLRV en Myzus persicae para determinar la infectividad en la dinámica
de poblaciones de áfidos vectores

PVY and PLRV detection in Myzus persicae to determine infectivity in the aphid population dynamic
Camila Sandoval1
; Ivette Acuña1
; Rodrigo Bravo1
; Sandra Mancilla1;
Ernesto Cisternas1
; Marcelo
Villagra1
; Marlene Rosales2
1
Instituto de Investigaciones Agropecuarias, INIA-Remehue
2
Pontifica Universidad Católica de Chile, Facultad de Agronomía e Ingeniería Forestal,
Departamento de Ciencias Vegetales.
E-Mail: camila.sandoval@inia.cl

En las últimas temporadas, se ha observado un aumento de las enfermedades virales que afectan
al cultivo de papa en la zona sur de Chile, ocasionando pérdidas importantes en el rendimiento y
calidad del producto final, además de un aumento en el rechazo de semilleros para certificación.
Dentro de los virus de importancia se encuentra el virus del enrollamiento de la hoja (PLRV) y virus
del mosaico severo (PVY), los cuales son diseminados mediante áfidos vectores de manera
persistente y no persistente, respectivamente. Para poder controlar las poblaciones de insectos, es
fundamental efectuar un monitoreo del vuelo de áfidos y conocer el período infectivo de estos. De
esta manera, el objetivo de este trabajo fue implementar una técnica de detección de PLRV y PVY
basada en RT-PCR utilizando como vector a Myzus persicae. Se realizó un ensayo de sensibilidad
de detección, donde se depositaron M. persicae (libres de virus) sobre hojas infectadas con PVY y
PLRV. Posteriormente se extrajo ARN total desde 1, 2, 4 y 6 áfidos siendo evaluadas mediante RTPCR
utilizando partidores específicos para cada virus junto a un control interno. Como resultado,
se obtuvo la detección de ambos virus a partir de 1 individuo. Esta metodología será usada para
obtener información de la interacción virus –vector y el momento en que los vectores comienzan a
ser infectivos en las curvas de vuelo, ayudando al desarrollo e implementación del Sistema de
Alerta de vuelo de áfidos (http://manualinia.papachile.cl), que determina los momentos críticos para
la presencia de áfidos vectores de virus, actualmente basado en información de capturas en
trampas y datos meteorológicos.

Agradecimientos: Proyecto financiado por la Fundación para la Innovación Agraria FIA a través
del proyecto Consorcio Papa Chile S.A. FIC-CS-C-2005-1-A-006.

Comunicaciones Orales

Caracterización biológica y molecular de aislados chilenos del Virus S de la papa (PVS)
provenientes de las regiones de Los Ríos y Los Lagos

Biological and molecular characterization of chilean isolates of Potato virus S (PVS) from Los Rios
and Los Lagos regions
Ester Vargas1
; Mónica Gutiérrez2
; Ivette Acuña3
; Marlene Rosales1
1
Pontificia Universidad Católica de Chile, Facultad de Agronomía e Ingeniería Forestal,
Departamento de Ciencias Vegetales
2
Servicio Agrícola y Ganadero (SAG), Laboratorio Regional Osorno
3
Instituto de Investigaciones Agropecuarias (INIA), Centro Regional de Investigación Remehue
E-Mail: ester.vargas.gonzalez@gmail.com

PVS pertenece al género Carlavirus y posee como material genético un RNA de hebra simple. En
base a la reacción local o sistémica sobre plantas indicadoras de Chenopodium quinoa, se han
descrito dos razas de este virus: la Ordinaria (PVSO
) y la Andina (PVSA
). PVSA
induce síntomas más
severos y es más eficientemente transmitido por los áfidos que las cepas de PVSO
. Prospecciones
realizadas en el sur de Chile revelan una prevalencia de un 66% para este virus en cultivos de papa
destinados a consumo y producción de tubérculo semilla. El objetivo de este estudio fue
caracterizar genética y biológicamente las razas de PVS provenientes de las regiones de Los Ríos y
Los Lagos. Para ello, se muestrearon plantas de papa con y sin síntomas de virosis y en ellas se
analizó la presencia de PVS mediante un test de ELISA (Bioreba). Luego, para un total de 28
aislados se amplificaron y secuenciaron los genes que codifican para la proteína de cubierta (CP) y
la proteína de 11 kDa (11K). Las secuencias obtenidas fueron analizadas mediante programas
computacionales (Geneiuos, Clustal Omega y DnaSP) y comparadas con otras secuencias de PVS
del GenBank. Los resultados revelaron que dos de los aislados chilenos estudiados agruparon con
PVSA
, mientras el resto se clasificó como PVSO
. Los valores de diversidad nucleotídica (π) y
porcentaje de identidad de secuencia para cada raza sugieren que las mayores variaciones se
encuentran en el grupo PVSA
. Los dos aislados PVSA
tienen su origen en el Archipiélago de Chiloé,
pudiendo existir una relación genotipo-geográfica para este virus. Se destinó un aislado de cada
raza para realizar una caracterización biológica, a través de la inoculación mecánica de plantas
indicadoras de C. quinoa y N. tabacum. Ambos aislados desarrollaron infección sistémica, resultado
esperado para la raza andina, PVSA
, pero no así para la raza ordinaria, PVSO
, sugiriendo la
posibilidad de una nueva variante citada en trabajos anteriores, la raza PVSO-CS (CS: Chenopodium
sistémico).

Agradecimientos: Proyecto FIA PYT-2011-0065 “Desarrollo de una estrategia de alerta sanitaria
virus-vector para el cultivo de la papa en la zona sur”. 2011.

Comunicaciones Orales

Detección rápida de Olpidium spp. en muestras de suelos y raíces

Rapid detection of Olpidium spp. in soil and root samples
Wendy Wong1
; Marlene Rosales2
1Universidad Iberoamericana de Ciencias y Tecnología, Facultad de Recursos Naturales y Ciencias
Silvoagropecuarias
2
Pontificia Universidad Católica de Chile, Facultad de Agronomía e Ingeniería Forestal.
E-Mail: wendy.wong@uibero.cl

El género Olpidium incluye especies que son transmisoras de virus de plantas. Estos hongos son
habitantes naturales del suelo con capacidad para sobrevivir en éste por más de 15 años debido
a las esporas de resistencia que poseen. Además, son considerados como parásitos obligados,
por lo que su detección en suelo, tradicionalmente, se realiza usando plantas trampa, cuyas
raíces son observadas al microscopio buscando las esporas de resistencia. En Chile se ha
reportado la presencia de O. virulentus, transmitiendo los virus asociados a la enfermedad de la
Vena ancha de las lechugas (MiLBVV) y LBVaV y O. bornovanus, transmitiendo el Virus de las
manchas necróticas del melón (MNSV). Debido a la dificultad y al tiempo que demora la
detección del hongo mediante el análisis morfológico, los objetivos de este trabajo fueron
implementar la técnica PCR para la detección e identificación en suelos y raíces de estas dos
especies de hongos. Se obtuvieron 23 muestras de suelo en predios agrícolas, que fueron
procesadas tanto por análisis morfológico como por PCR, para este último se utilizaron partidores
específicos basados en las secuencias del rDNAr-ITS. Mediante el análisis morfológico solo dos
muestras resultaron positivas a O. bornovanus y cuatro a O. virulentus. Por el contrario el análisis
molecular detectó 10 muestras positivas a O. bornovanus y 13 muestras positivas a O. virulentus.
Mientras que las esporas de resistencia pudieron ser observadas a los 21 días de la siembra de
las semillas, el análisis molecular fue efectivo ya a los 10 días. Por lo que el análisis por PCR
permitió acelerar la identificación del hongo comparada con la identificación morfológica.
Además, se debe destacar que este trabajo da cuenta por primera vez de la detección de
Olpidium spp. Directamente de suelo.

Comunicaciones Orales

Ralstonia solanacearum Bv.2 agente causal de marchitez bacteriana de la papa en Araucanía
(2013-2015)

Ralstonia solanacearum Bv.2 causal agent of bacterial wilt of potato in the Araucania Region (2013-
2015)
Claudio Lillo1
; Silvia Moreira1
; María Calfio1
; Mónica Salazar1
; Ernesto Vega2
; Carolina Ureta2
; Isaul
Saavedra3
; Pablo Sepúlveda3
; Carmen Gloria Velasquez3
; Mauricio Seguel4
1
Laboratorio Fitopatología,
2
Laboratorio de Bacteriología Agrícola Lo Aguirre, 3
Protección Agrícola y
Forestal,
4Recursos Naturales Renovables Servicio Agrícola y Ganadero, Región de La Araucanía
E-Mail: claudio.lillo@sag.gob.cl

La marchitez bacteriana de la papa causada por Ralstonia solanacearum, es una de las principales
enfermedades bacterianas en el mundo, estatus de cuarentenaria presente en Chile para el biovar
2. El año 2013 en actividades de vigilancia fitosanitaria se diagnosticó su presencia observándose
en terreno plantas marchitas y tubérculos presentando pequeñas fisuras y necrosis asociada a
yemas y estolón, al corte, los tubérculos presentan color pardo en anillo vascular, necrosis y
exudados bacterianos característicos. En la Región de la Araucanía se destinan 14.459 ha para
cultivar papas y se ha cuantificado una pérdida de rendimiento por la enfermedad de 72%. El
objetivo del presente trabajo fue realizar un diagnóstico de incidencia de Ralstonia solanacearum
Bv.2 (R.s.) para la Región de La Araucanía, en un total de 3.982 muestras analizadas, utilizando la
prueba DAS-ELISA y su confirmación por la técnica de PCR entre los años 2013 y 2015. Los
resultados para el período analizado señalaron una incidencia de 6%; 2,5% y 2,2%; para los años
2013, 2014 y 2015 respectivamente. Al mes de Agosto 2015, la Región contempla 78 focos de
marchitez bacteriana en cuarentena por tres años, la superficie afectada es de 574,4 ha
equivalente a 3,97% de la superficie regional con papa. El año 2016 se iniciará el análisis por PCR
en muestras compuestas de suelo para el levantamiento de cuarentena, personal SAG trabaja
activamente en la detección oportuna, informar y sensibilizar a los agricultores de esta grave
amenaza para contener y erradicar la enfermedad de la Región de La Araucanía.

Comunicaciones Orales

Primer reporte de Sphaerulina musiva (Peck) Quaedvlieg, Verkley & Crous causando
manchas foliares en álamo en Chile

First report of Sphaerulina musiva (Peck) Quaedvlieg, Verkley & Crous causing leaf spot on poplar
trees in Chile
Alex Opazo1
; Mario Zapata2
1División Protección Agrícola y Forestal, Servicio Agrícola y Ganadero
2
Laboratorio Regional Chillán, Servicio Agrícola y Ganadero
E-Mail: alex.opazo@sag.gob.cl

En prospecciones forestales de álamo (Populus sp.), realizadas a fines del 2014 por parte del
Servicio Agrícola y Ganadero (SAG) en la comuna de San Carlos (Región del Biobío), se
observaron manchas foliares, desde las cuales se colectaron conidios filiformes con 1 a 4 septos,
características del género Septoria. A partir de conidios germinados individualmente, se
establecieron cultivos puros para la caracterización morfológica y molecular de los aislados. Para
los estudios moleculares se requirió la secuenciación de la región ITS del rDNA, y parte de los
genes TEF (factor de elongación), ß-Tubulina 2 y la subunidad mayor del ribosoma (LSU-rDNA).
Las secuencias obtenidas fueron alineadas junto a otros aislados CBS de referencia de Septoria
musiva, S. populi y S. populicola disponibles en Genbank. El análisis de las relaciones filogenéticas
fue inferido con criterios de máxima parsimonia (MP) con búsqueda heurística y TBR (treebisectionreconnection),
con los 4 loci concatenados. Finalmente, se realizó un test de delimitación
de especies usando el modelo Poisson Tree Processes, donde al árbol MP se le adicionaron
valores de soporte bayesianos (BS) para prueba de hipótesis.

El análisis filogenético combinado mostró un claro agrupamiento del aislado en estudio con S.
musiva. El test de delimitación de especies confirmó la inclusión del aislado en estudio dentro del
clado de S. musiva. Nuevas identificaciones de S. musiva, basados en su morfología, han sido
verificados usando PCR con partidores específicos, y controles positivos derivados de la primera
identificación.

Sphaerulina musiva (=Mycosphaerella populorum; anamorfo: Septoria musiva) provoca cancros y
necrosis foliar en especies del género Populus, limitando el cultivo de híbridos o variedades más
susceptibles. Es originaria del hemisferio norte (Canadá, Estados Unidos) y se ha introducido en
México, Brasil y Argentina. De acuerdo a nuestro conocimiento, este corresponde al primer reporte
de Sphaerulina musiva en Chile, siendo detectada, en plantaciones, cortinas cortaviento y árboles
aislados de Populus spp. en las Regiones del Biobío y Maule.

Comunicaciones Orales

Patogenicidad, agresividad y diversidad genética de especies de Gaeumannomyces
graminis y Phaeosphaeria afectando trigo en Chile

Pathogenicity, aggressiveness and genetic diversity of Gaeumannomyces graminis and
Phaeosphaeria species affecting wheat crops in Southern Chile
Ernesto Moya-Elizondo1
; Nolberto Arismendi1
; Braulio Ruiz1
; María Paz Castro2
; Herman
Doussoulin2
; Ricardo Madariaga3
1Departamento de Producción Vegetal, Universidad de Concepción, Chillan, Chile
2
Instituto de Producción y Sanidad Vegetal, Universidad Austral de Chile, Valdivia, Chile
3
Instituto de Investigaciones Agropecuarias, Centro Regional de Investigación Quilamapu, Chillán
E-Mail: emoya@udec.cl

Diferentes hongos colonizan raíces y corona de trigo causando pérdidas en su producción.
Especies del complejo Gaeumannomyces graminis causan severas pérdidas en este cultivo; sin
embargo, existen pocos antecedentes en Chile sobre su variabilidad genética, patogenicidad y
agresividad. Phaeosphaeria pontiformis es comúnmente aislado desde tallos de trigo, pero no
existe claridad sobre su patogenicidad y agresividad en este cultivo. Esta investigación evaluó la
existencia de diferentes grupos genéticos en aislados chilenos de G. graminis var. tritici (Ggt), la
especificidad de los partidores asociados a esta determinación, y la patogenicidad y agresividad de
diferentes aislados de Ggt, G. graminis var. avenae (Gga) and P. pontiformis. La identidad de
cuarenta aislados de estos hongos obtenidos entre la Región del Biobío y Los Lagos fue
confirmada mediante caracterización molecular de genes ribosomales y regiones ITS, mientras que
grupos genéticos de Ggt fueron determinados usando partidores específicos. Discrepancia entre
grupos genéticos fue determinada mediantes análisis de bandas polimórficas obtenidas con RAPDPCR.
Patogenicidad y severidad de 29 aislados fueron evaluadas en plántulas de trigo cv. PanteraINIA
establecidas en macetas con sustrato estéril inoculado con los aislados. Doce aislados de Ggt
pertenecieron al grupo genético (G) 2, mientras uno fue clasificado como G1. Cuatro aislados de
Ggt no amplificaron para los dos grupos genéticos descritos, y patrones RAPD mostraron que
pertenecían a un nuevo grupo genético (G3) y causaron un daño en raíces que varió en severidad
entre un 50 y 90%. Siete aislados de P. pontiformis fueron amplificados con partidores asociados al
Grupo G1 de Ggt y presentaron niveles variable de severidad (5 a 65%). Seis aislados de Gga
fueron patógenos débiles en trigo pero fueron altamente agresivos en avena. Resultados sugieren
evaluar como este conjunto de hongos interactúan y causan pérdidas en sementeras del sur de
Chile.

Agradecimientos: Trabajo financiado por Proyecto Fondecyt de Iniciación N°11110105.

Comunicaciones Orales

Susceptibilidad/tolerancia de variedades e híbridos comerciales de raps canola, al pié negro
o “foma” (Leptosphaeria maculans), en el sur de Chile

Susceptibility/tolerance of canola rapeseed varieties and hybrids, to blackleg (Leptosphaeria
maculans) in Southern Chile
Orlando Andrade; Cesar Morales
Escuela de Agronomía, Universidad Católica de Temuco; Est. Exp. Agro del Sur, Perquenco, Chile
E-Mail: oandrade54@gmail.com

La superficie de raps canola en Chile ha experimentado un notable aumento, debido
principalmente a la demanda de la industria del salmón y del aceite para consumo humano. La
enfermedad de mayor impacto y prevalencia en el sur del país es el pié negro, causado por el
hongo hemibiotrofo ascomicete Leptosphaeria maculans. A pesar del significativo impacto de esta
enfermedad sobre la producción de raps, son escasas las referencias y menos la información
científica, relativas al comportamiento de las variedades e híbridos comercializados en el país,
frente a esta patología. Las temporadas 2011-2012 y 2014-2015, se realizaron trabajos
experimentales de campo, tendientes a determinar el grado de susceptibilidad/tolerancia de 4 y 6
variedades e híbridos, respectivamente, al pié negro. Se establecieron parcelas experimentales de
10 m2
c/u, inoculadas, con 3 o 4 repeticiones, con y sin protección de fungicidas. Se registraron
notas de infección foliar en escala de 0 a 100%, en base a una muestra de 20 plantas por parcela y
posteriormente, a la cosecha, notas de infección de cuello en escala de 0 a 6, sobre un total de 100
cañas por parcela. La información obtenida permitió clasificar las diferentes variedades evaluadas,
dentro de un rango de susceptibilidad/tolerancia al pié negro, información que fue consistente en
aquellas variedades incluidas en ambas temporadas. Los híbridos Exagone, Expower y Artoga
presentaron los mejores niveles de tolerancia al pié negro, mientras que Rohan, Nelson y Expertise
se comportaron como muy susceptibles a la enfermedad. Por su parte el híbrido Sheriff se
comportó como moderadamente susceptible. Conjuntamente con esta información, se observó que
ante un mismo y probadamente eficaz tratamiento fungicida, la respuesta de las variedades e
híbridos más susceptibles aparece disminuida. Este aparece como el primer estudio en el país,
sobre la susceptibilidad de variedades e híbridos comerciales de raps canola al pié negro en Chile.

Comunicaciones Orales

Falsos positivos en detección molecular de Candidatus Liberibacter en Citrus asociados a
bacterias endófitas

False positives in molecular detection of Candidatus Liberibacter in Citrus associated to endophytic
bacteria
Rocío Camps; Ximena Besoain
Escuela de Agronomía, Facultad de Ciencias Agronómicas y de los Alimentos, Pontificia
Universidad Católica de Valparaíso, Quillota Chile
E-Mail: ximena.besoain@pucv.cl

En casi todo el mundo la citricultura está siendo amenazada por la rápida expansión de la
enfermedad Huanglongbing (HLB), causada por 3 especies de proteobacterias del género
Candidatus Liberibacter spp. Se considera esta enfermedad como una de las más destructivas de
los cítricos en el mundo, por la severidad de los síntomas, la rapidez con la que se dispersa y
porque aún no tiene tratamiento curativo. La detección temprana puede ser difícil ya que los
síntomas pueden tardar más de un año en hacerse evidentes y por qué los síntomas en hojas
pueden parecerse a otras enfermedades o déficit nutricional. El desarrollo de la bacteria es
sensible a las temperaturas, lo cual es determinante en la concentración que se encuentre, el
periodo de latencia y la manifestación de síntomas. En Chile aún no ha sido descrita esta
enfermedad pero es necesario contar con técnicas de alta confiabilidad para la detección
temprana. Con el objetivo de verificar y validar la ausencia de HLB en plantas del banco
germoplasma de Cítricos se sometieron distintas variedades a dos temperaturas óptimas para el
desarrollo de la enfermedad durante seis meses. Luego fueron evaluadas con un Kit comercial
para la detección de Candidatus Liberibacter spp. por qPCR (Plant Print, Diagnostic). Las plantas
no presentaron síntomas asociados a la enfermedad, pero dos plantas si arrojaron resultados
positivos según qPCR. Se inocularon plantas nuevas a través de parches desde plantas positivas y
se incubaron por 10 meses. Todas las plantas injertadas fueron verificadas con la misma
metodología previa a la inoculación. Luego de la incubación se obtuvieron resultados positivos de
las inoculadas. Para descartar falsos positivos se aislaron 15 bacterias endófitas asociadas a las
plantas positivas. Las bacterias fueron evaluadas con la misma metodología de qPCR arrojando
dos de ellas amplificación. Las bacterias aún se encuentran en proceso de identificación
descartándose que correspondan al género Candidatus Liberibacter ya que éste no ha sido posible
su aislamiento in vitro.

Agradecimiento: Financiado por Vicerrectoría de Investigación y Estudios Avanzados VIREAPUCV
Proyecto DI 037.450/2013.

Comunicaciones Orales

Determinación de Botrytis cinerea en aislados monospóricos provenientes de parronales de
la zona central de Chile

Determination of Botrytis cinerea in monosporic isolates obtained from grapevines of central Chile
Rocío Camps; Mauricio Pastén; Ximena Besoain
Escuela de Agronomía, Facultad de Ciencias Agronómicas y de los Alimentos, Pontificia
Universidad Católica de Valparaíso, Quillota, Chile
E-Mail: rocio.camps@pucv.cl

El género Botrytis posee importantes patógenos que atacan a innumerables cultivos, causantes de
enfermedades destructivas y de importancia para nuestro país. Estudios recientes han descubierto
que una nueva especie determinada como Botrytis pseudocinerea se encuentra asociada a
pudrición gris en vid, y que su detección mediante caracteres morfológicos (tamaño de esporas,
tasa de germinación o crecimiento del micelio) no permite su diferenciación entre aislados de
Botrytis cinerea. Incluso ambas especies pueden encontrarse en sincronía generando una misma
patología. Hay escasos estudios de esta nueva especie y de a poco algunos países la han
determinado asociada a otros cultivos. Para poder identificar estos dos organismos se han
estudiado métodos moleculares que amplifican genes que codifican proteínas nucleares (RPB2,
G3PDH, y HSP60) que nos permitirían diferenciar entre ambas especies. Por lo tanto, este trabajo
tuvo como objetivo verificar mediante técnicas moleculares que especie(s) de Botrytis estaban
asociadas a bayas de racimos de uva de mesa cv. Thompson Seedless provenientes de diferentes
localidades de la zona central de Chile. Se seleccionaron 10 aislados del género Botrytis
colectados desde bayas de uva de mesa cv. Thompson Seedless con síntomas de pudrición gris al
momento de la cosecha (mes de febrero 2015). A partir de cultivos monospóricos se extrajo el DNA
de los aislados y se amplificaron por PCR los genes ITS, RPB2, G3PDH y HSP60. Los productos
fueron secuenciados y verificados mediante la base de dato Blast-NCBI. Todos los aislados
evaluados fueron determinados como Botrytis cinerea con un valor de identidad sobre un 97%.
Este trabajo permitió corroborar la identificación de esta especie en racimos de uva de mesa cv.
Thomson Seedless al momento de la cosecha.

Comunicaciones Orales

Uso de técnica convencional y qPCR como predictores de incidencia de Botrytis cinerea en
uva de mesa cv. Thompson Seedless en cosecha y poscosecha

Conventional technic and qPCR as Botrytis cinerea incidence predictors at harvest and postharvest
in Thompson Seedless table grapes
Mauricio Pastén1
; Marcela Esterio2
; Rocío Camps1
; Virginia Garretón3
; Ximena Besoain
1
1
Escuela de Agronomía, Pontificia Universidad Católica de Valparaíso
2
Laboratorio de Fitopatología Frutal y Molecular, Depto. de Sanidad Vegetal, Facultad de Ciencias
Agronómicas, Universidad de Chile
3
Escuela de Biotecnología, Universidad Santo Tomás
E-Mail: ximena.besoain@pucv.cl

La pudrición gris causada por Botrytis cinerea Pers. (Bc), ocasiona importantes pérdidas
económicas en uva de mesa en Chile y a nivel mundial, presentándose distintos niveles de presión
de esta enfermedad. Sin duda, un aspecto importante para el sector exportador es contar con la
información que permita predecir en forma oportuna la incidencia de esta enfermedad en
poscosecha. El objetivo del presente estudio fue evaluar en predios de uva de mesa cv. Thompson
Seedless localizados en la zona central de Chile, la incidencia de Bc en precosecha determinada
mediante el método convencional (cámara húmeda) y qPCR y, su correlación con la incidencia de
pudrición gris en cosecha y postcosecha en racimos de uva. Con este propósito se cosecharon
completamente al azar 40 racimos en precosecha y cosecha, en 10 predios y se evaluó la
incidencia causada por Bc mediante cámara húmeda y la estimación de presencia de Bc mediante
qPCR empleando iniciadores convencionales, sobre muestras compuestas de 10 bayas por racimo
(previa confirmación de calibración de la curva de DNA de Bc igual a R2
=0,99). Posteriormente se
procedió a realizar una regresión lineal entre los niveles de incidencia de Bc detectados en
precosecha, cosecha y poscosecha luego de 60 días de almacenamiento refrigerado con la técnica
convencional y los estimados mediante qPCR. El R2 obtenido con los niveles de incidencia de Bc
detectados con la técnica convencional en precosecha v/s cosecha y v/s poscosecha fueron 0,88 y
0,8, respectivamente; mientras que la incidencia estimada mediante qPCR, en los mismos
periodos, de 0,868 y 0,70. Los resultados obtenidos permiten señalar que ambos métodos son
comparables y podrían ser utilizados como predictores de la incidencia de pudriciones por Botrytis
cinerea en cosecha y poscosecha.

Comunicaciones Orales

Diplodia seriata causando pudriciones de manzana cvs. Fuji y Pink lady de pre-cosecha en
la Región del Maule

Diplodia seriata associated with pre-harvest decay on apple cvs. Fuji and Pink lady in the Maule
Region
Marcela Caceres; Teresa Daza; Katherine Breves; Mauricio Lolas; Gonzalo Díaz
Laboratorio de Patología Frutal, Facultad de Ciencias Agrarias, Universidad de Talca, Talca, Chile
E-Mail: mcaceres@utalca.cl

Chile es considerado el cuarto exportador de manzanas en el mundo, siendo la Región del Maule
la más importante en superficie y exportación. Entre los principales factores que afectan la calidad
de los frutos de manzano en pre-cosecha y postcosecha están las enfermedades, entre las que se
destacan: ‘ojo de buey’ (Neofabraea alba), ‘moho gris’ (Botrytis cinerea) y ‘moho azul’ (Penicillium
expansum). Las Botryophaereaceas causan enfermedades en un amplio rango de plantas,
incluyendo pudriciones de frutos como la manzana. Durante la última temporada se observó una
inusual pudrición en época de pre-cosecha asociado a eventos de lluvia en la Región del Maule.
Con el propósito de identificar el agente causal de esta enfermedad se colectaron manzanas cv.
Fuji y cv. Pink lady (n=250 frutos) con síntomas de pudrición blanda, acuosa que externamente se
observaba de color negro. Las manzanas con los síntomas descritos anteriormente, fueron
desinfectadas superficialmente y trozos desde la zona de avance de la pudrición interna fueron
colocados en placas Petri con APD + IGEPAL por 7 días a 20°C. Los aislados obtenidos fueron
identificados como Diplodia seriata mediante características morfológicas y moleculares, utilizando
ITS y β-tubulina. Seis aislados se caracterizaron mediante análisis filogenético, sensibilidad a
fungicidas y patogenicidad. Los resultados obtenidos indican que los aislados de D. seriata fueron
sensibles a fungicidas y patogénicos. De acuerdo a nuestros antecedentes este problema tuvo una
prevalencia entre 2% a 15% en la Región del Maule.

Comunicaciones Orales

Estatus actual de la muerte regresiva de brazos en Kiwi cv. Hayward in Chile

Current status of kiwifruit arm dieback in cv. Hayward in Chile
Gonzalo Díaz1
; Mauricio Lolas1
; Bernardo Latorre2
; Juan Zoffoli2
1
Laboratorio de Patología Frutal, Facultad de Ciencias Agrarias, Universidad de Talca, Talca, Chile
2
Facultad de Agronomía e Ingeniería Forestal, Pontificia Universidad Católica de Chile, Santiago,
Chile
E-Mail: g.diaz@utalca.cl

El kiwi (Actinidia deliciosa) es uno de los frutales más importantes en Chile. La industria Chilena del
kiwi comprende sobre 9.000 ha de superficie, representando un impacto económico importante
para Chile. La muerte regresiva de brazos se ha convertido en un problema importante para los
productores de kiwis chilenos en los últimos 10 años. Sin embargo, un estudio sistemático de la
importancia de la muerte regresiva de brazos y la identificación de los principales agentes
causales, aún no han sido completados. Por lo tanto, un estudio en huertos productivos fue
conducido a través de diferentes zonas importantes para determinar la prevalencia y la identidad
de los principales patógenos asociados con la muerte regresiva de kiwi en Chile. Un total de 170
muestras de brazos obtenidos durante una prospección durante el 2013 y 2014, fueron colocadas
en placas con APD más antibiótico e Igepal. Cultivos fueron identificados por morfología y
molecularmente usando los genes de la región ITS, porción del gen de beta tubulina y fator de
elongación 1-alfa. Los resultados permitieron determinar una prevalencia entre un 5 y 75% de
muerte regresiva de brazos en huertos de kiwis de 8 a 25 años de edad. Basados en la morfología
y análisis filogenéticos, se identificó a varias especies de las familias Botryosphaeriaceae,
Diaporthaceae como bien especies de los géneros Cadophora y Phaeacremonium. Este estudio
revela que la muerte regresiva de brazos en Chile está asociado a un complejo fungoso. Especies
de Diaporthe, Neofusicoccum, Cadophora y Phaeacremonium son aparentemente los más
frecuentes patógenos fungosos asociados a muerte regresiva de brazos en Chile.

Comunicaciones Orales

Caracterización molecular de aislamientos de hongos del genero Fusarium asociados a
Aguacate, en el Valle del Cauca-Colombia

Molecular characterization of Fusarium isolates associated with Avocado plants in Valle del CaucaColombia
Edwin Henao; Eyder Gómez; Carlos Hernández; Claudia Salazar; Martha Velasco
Universidad Nacional de Colombia, sede Palmira. Grupo de Investigación Protección Vegetal para
el Mejoramiento de la Productividad
E-Mail: edhenaoh@unal.edu.co

En la actualidad, el fruto del aguacate se produce en la mayoría de los países de clima cálido y
templado. Su producción en el ámbito mundial y, específicamente, en Colombia ha mostrado
grandes avances; sin embargo, las enfermedades fitosanitarias continúan siendo los principales
problemas en la producción de los mismos. Entre éstas se encuentran los agentes patógenos que
dificultan el establecimiento y desarrollo del cultivo, tal como algunas especies del género
Fusarium, consideradas de importancia económica por las pérdidas que generan a numerosos
cultivos, entre los que se encuentra el aguacate. Por lo tanto, con el objetivo de caracterizar las
poblaciones de Fusarium presentes en el aguacate, se realizó el aislamiento de diferentes órganos
afectados y provenientes de localidades ubicadas en seis municipios del Valle del CaucaColombia.
Luego, se seleccionaron y purificaron los aislamientos pertenecientes al género de
interés para realizar la extracción de ADN y amplificación de la región TEF-1 alpha.
Posteriormente, los productos de PCR fueron secuenciados y comparados con las base de datos
del NCBI (National Center for Biotecnology Information) y del Fusarium ID. Los resultados
obtenidos mediante la secuenciación arrojaron que los aislamientos pertenecen a: Fusarium solani,
Fusarium incarnatum, Fusarium oxysporum, Fusarium fujikuroi y Fusarium austroamericanum,
siendo las tres primeras especies, las de mayor ocurrencia en las muestras evaluadas. Finalmente,
para el análisis de las relaciones filogenéticas realizado mediante el programa MEGA 6, se usó el
coeficiente de similitud del vecino más cercano, lo que permitió observar una gran variabilidad
entre los aislamientos evaluados.

Agradecimientos: A la Facultad de Ciencias Agropecuarias de la Universidad Nacional de
Colombia, sede Palmira, por la financiación de este proyecto, como también a la profesora Luisa
Efigenia Hoyos por su colaboración.

Comunicaciones Orales

Detección temprana no destructiva de Chondroestereum purpureum, agente causal del
Plateado en manzano

Early and non-destructive detection of Chondrostereum purpureum, causal agent of apple silverleaf
disease
Javier Chilian; Daina Grinbergs; Andrés France
Instituto de Investigaciones Agropecuarias INIA, Centro Regional de Investigación Quilamapu,
Chillán, Chile
E-Mail: dgrinbergs@inia.cl

El Plateado de los frutales, causado por el hongo Basidiomycete Chondrostereum purpureum, es
una enfermedad ampliamente diseminada en Chile. En manzano afecta principalmente a las
variedades más plantadas y exportadas como Royal Gala y Fuji Raku Raku, disminuyendo la vida
útil de huertos y viveros, provocando pérdidas de rendimiento mayores al 35% y reduciendo la
calidad de la fruta. Los síntomas foliares corresponden al color plateado de las hojas y son
causados por una enzima tipo endopoligalacturonasa (endoPG), sin embargo, estos no son
perceptibles hasta el tercer año post infección. Además, esta enfermedad no tiene un control
curativo eficiente, por lo que es muy relevante contar con un diagnóstico temprano. El objetivo de
este trabajo fue desarrollar un método de diagnóstico precoz y no invasivo de la enfermedad,
utilizando la técnica inmunológica ELISA para detectar la endoPG en las hojas. Para realizar lo
anterior se sintetizó el anticuerpo monoclonal endoPG y se desarrolló el protocolo DAS ELISA. Se
analizaron plantas enfermas de un huerto comercial de siete años presentando distinto nivel de
síntomas: leve, moderado y severo. Se utilizó como control positivo la toxina purificada y como
control negativo hojas de plantas sanas. Además, se analizaron plantas enfermas de tres años sin
síntomas foliares. La presencia del patógeno en plantas enfermas fue confirmada a través del
aislamiento de tejido necrótico del tallo en agar papa dextrosa al 25% de concentración y PCR. En
cada una de las pruebas la técnica pudo detectar a la endoPG, en una concentración de 9 µg/g
peso fresco en las plantas enfermas sin síntomas, a 22,5 µg/g en plantas con síntomas severos. La
sensibilidad y eficacia de este método hacen que en el futuro se pueda utilizar como base para
desarrollar un kit de diagnóstico comercial, lo que permitiría disminuir la diseminación del patógeno.

Comunicaciones Orales

Identificación discriminativa de la variante filogenética de Pseudomonas syringae pv.
actinidiae biovar 3 presente en Chile

Discriminative identification of the Chilean Pseudomonas syringae pv. actinidiae biovar 3
phylogenetic variant
Isabel Pérez; Lorena Pizarro; Marcela Esterio; Jaime Auger
Laboratorio de Fitopatología Frutal y Molecular, Departamento de Sanidad Vegetal, Facultad de
Ciencias Agronómicas, Universidad de Chile Santiago, Chile
E-Mail: jauger@uchile.cl

Los cultivos de kiwi en Nueva Zelanda, Italia y Chile son afectados por la bacteria Pseudomonas
syringae pv. actinidiae (Psa), agente causal del cancro bacteriano. La Psa presente en cada uno
de estos países corresponden a tres grupos filogenéticos distintos del biovar 3 caracterizado por
ser el de mayor patogenicidad, por tener una región de alta variabilidad en un elemento conjugativo
e integrativo (ICE) vinculado a la virulencia de la bacteria y a potenciales diferencias de virulencia
entre las tres variantes de Psa: Nueva Zelanda (Nz), Italia (It) y Chile (Cl). Para el desarrollo de una
estrategia de identificación discriminativa de estas tres variedades de Psa se seleccionaron tres
regiones del ICE y diseñaron un conjunto de tres pares de partidores específicos que amplifican
fragmentos de 820, 800 y 640 pares de bases. Utilizando las secuencias de estas regiones de
cepas Nz, It y Cl de Psa, previamente descritas, se generaron arboles filogenéticos, los cuales
separaron en grupos distintos, a las tres variantes de Psa, demostrando la eficacia de esta
estrategia. Mediante este metodología se determinó que 21 aislados de Psa colectados de huertos
Psa (+) de las regiones VI y VII corresponden a la variante Cl. Estos resultados nos permiten
concluir que las cepas de Psa biovar 3 analizadas pertenecen únicamente a Psa del tipo Cl, no
habiendo registro de la presencia de las variantes Nz ni It. Esta estrategia permitirá la generación
de una herramienta molecular para la detección de la bacteria y en conjunto, la identificación de la
variante de Psa. Siendo el cancro bacteriano del kiwi una enfermedad cuarentenaria de control
obligatorio, esta herramienta de diagnóstico permitirá pesquisar la posible introducción de alguna
de las otras variantes de Psa al país mediante germoplasma de kiwi proveniente de Nueva Zelanda
o Italia.

Agradecimientos: Este estudio se desarrolló en el marco del Proyecto “Prevención de la
Bacteriosis del kiwi en O´Higgins”, código IDI 30135568-0, financiado a través del Fondo de
Innovación para la Competitividad (FIC) del Gobierno Regional de O’Higgins y al Dr. Matt
Templeton y Dr. Mark Andersen de Plant and Food Research, Auckland, New Zealand, por proveer
a la investigación de muestras de ácido nucleico de Psa.

Comunicaciones Orales

Cancro bacteriano del kiwi causado por Pseudomonas syringae pv. actinidiae: origen de la
epifítia en Chile

Kiwifruit bacterial canker (Pseudomonas syringae pv. actinidiae): outbreak origin in Chile
Jaime Auger; Isabel Pérez; Lorena Pizarro; Marcela Esterio
Laboratorio de Fitopatología Frutal y Molecular, Departamento de Sanidad Vegetal, Facultad de
Ciencias Agronómicas, Universidad de Chile, Santiago, Chile
E-Mail: jauger@uchile.cl

El cancro bacteriano del kiwi causado por Pseudomonas syringae pv. actinidiae (Psa) es la
principal patología que afecta al cultivo. Las recientes epifítias reportadas en los tres principales
países productores de kiwi en el mundo (Italia, 2008; Nueva Zelanda, 2010 y Chile, 2011), ha
afectado y encarecido su producción. De acuerdo a las características fenotípicas, patogénicas y
genómicas de la bacteria, ésta se clasifica en tres diferentes biovares: 1, 2 y 3. A partir de huertos
Psa (+) de las regiones de O’Higgins y Maule, se recuperó e identificó a 21 aislados. El patrón
genético característico de todos los aislados fue determinado mediante la presencia de los genes
hrpk1, omp 1K, rpoD y avrD y la ausencia de los genes hopA1, cfl, syrC y syrD. A través del
análisis filogenético utilizando la información generada a partir de los genes constitutivos cts y gyrB
y de los genes previamente mencionados, se determinó que la totalidad de los aislados analizados
correspondieron a Psa biovar 3, mismo biovar que incluye a cepas causantes de las epifítias en
China (1994), Italia (2008) y Nueva Zelanda (2010) a la fecha. Mediante la amplificación y análisis
de regiones con alta variabilidad de elementos conjugativos e integrativos, se diferenció
filogenéticamente a la cepa chilena biovar 3, de aquellas presentes en Italia y Nueva Zelanda.
Además, de acuerdo a estudios filogenéticos, realizados en Francia, utilizando marcadores
polimórficos del genoma de cepas de Psa de diverso origen geográfico, se estableció que a pesar
de que los aislados de Nueva Zelanda y de Chile poseen diferencias filogenéticas entre ellos,
ambos tienen similitud con cepas de origen Chino. Todos estos antecedentes permiten concluir
que la epifítia chilena de Psa biovar 3 no tendría su origen en Nueva Zelanda o Italia, sino
posiblemente en China.

Agradecimientos: Este estudio se desarrolló en el marco del Proyecto “Prevención de la
Bacteriosis del kiwi en O´Higgins”, código IDI 30135568-0, financiado a través del Fondo de
Innovación para la Competitividad (FIC) del Gobierno Regional de O’Higgins.

Comunicaciones Orales

Análisis multilocus de aislados de Pseudomonas syringae pv. actinidiae que presentan
diferentes grados de patogenicidad

Multilocus analysis of isolates of Pseudomonas syringae pv actinidiae showing different degrees of
pathogenicity
Alan Zamorano1
; Ernesto Vega2
; Stefano Ardizzi3
; Enrico Biondi3
; Assunta Bertaccini3
; Nicola Fiore1
1Departamento de Sanidad Vegetal, Facultad de Ciencias Agronómicas, Universidad de Chile,
Santiago, Chile
2
Servicio Agrícola y Ganadero, Laboratorios y Estaciones Cuarentenarias de Lo Aguirre, Santiago,
Chile
3 DipSA, Plant Pathology, Alma Mater Studiorum, University of Bologna, Italy
E-Mail: agezac@u.uchile.cl

Pseudomonas syringae pv. actinidiae (Psa) es el agente causal de la enfermedad llamada “Cancro
bacteriano del kiwi”, de amplia distribución en el país y que causa grandes pérdidas a nivel
mundial. Hasta el momento, los análisis moleculares han permitido la definición de tres grupos
filogenéticos de esta bacteria, asociados tanto a distribución geográfica como a patogenicidad. Dos
aislados chilenos fueron completamente secuenciados en el año 2013, formando un grupo
monofilético con aislados de Italia y Nueva Zelanda. Particularmente entre los aislados italianos, se
obtuvieron durante el año 2014, dos aislados con bajos niveles de patogenicidad, confirmados
como Psa a través de análisis bioqúimicos y de PCR específico. A pesar de la importancia de la
enfermedad, en nuestro país no se han realizado estudios de caracterización molecular en un
mayor número de aislados. Durante fines de otoño del año 2013, se obtuvieron aislados de Psa del
llanto del kiwi. Los aislados fueron confirmados por PCR específico y por pruebas bioqúimicas.
Posteriormente se amplificaron por PCR, clonaron y secuenciaron siete genes conservados (acn,
cts, gap, gyrB, pfk, pgi y rpoD) para concatenar sus secuencias y establecer relaciones
filogenéticas, según lo descrito en la literatura. Paralelamente en Italia, se realizó el mismo análisis
multilocus con los aislados de baja patogenicidad para ser incluidos en el estudio filogenético. En
concordancia con lo observado en los estudios anteriores, todos los aislados chilenos se asociaron
al grupo filogenético 3 de Psa, y no mostraron diferencias genéticas importantes. Los aislados de
baja patogenicidad de Italia, presentaron una asociación con los aislados del grupo 3 de Psa,
exhibiendo una leve divergencia genética, que no implica una separación del cluster principal. Este
trabajo permite confirmar el análisis multilocus como una herramienta útil para la clasificación
molecular de Psa, lo cual podría ser mejorado incluyendo las secuenciación de genes asociados a
mecanismos de patogenicidad bacteriana.

Comunicaciones Orales

Efectividad de Fluazinam en el control de Neofusicoccum australe en arándanos

Fluazinam effectiveness in the control of Neofusicoccum australe on blueberries
Javiera Molina1
; Valeria Arriagada1
; Luz M. Pérez1
; Raúl Arriaga2
; Mel Grove2
; Jaime Montealegre1
1
Laboratorio de Fitopatología y Control Biológico de Enfermedades (LFCBE), Departamento de
Sanidad Vegetal, Facultad de Ciencias Agronómicas, Universidad de Chile
2
ISK Biosciences Corporation, USA
E-Mail: javiera.molina.b@gmail.com

El cultivo del arándano es afectado por diversos patógenos dentro de los cuales se encuentran
especies de hongos del género Botryosphaereacea como Neofusicoccum australe. Se evaluó la
efectividad in vitro e in vivo de fluazinam (Shirlan 500 SC). Para ello se determinó la EC50 de
fluazinam para N. australe exponiendo discos de micelio del patógeno a distintas concentraciones
de fluazinam en medio de cultivo APD. Se calculó la EC50 mediante probit obteniéndose un valor
de 0,0073 ppm i.a. Para los ensayos in vivo se realizó una misma metodología en dos lugares
distintos, uno en las dependencias del LFCBE, bajo condiciones controladas y uno en campo. Se
aplicó fluazinam y en mezcla con azoxystrobin (Quadris) en ramillas de arándanos cv. Brigitta. Las
ramillas en receso invernal, fueron seleccionadas según grosor (3-5 mm), posteriormente se les
realizó un corte en la parte apical para luego aplicar los tratamientos (T0: testigo, TA: testigo sin
patógeno, T1: fluazinam 730 g.i.a.ha-1
, T2: fluazinam + azoxystrobin (438 + 109 g.i.a.ha-1
), T3:
fluazinam + azoxystrobin (584 + 219 g.i.a.ha-1
), T4: tiofanato de metilo (2800 g.i.a.ha-1
) vía
aspersión. Luego fueron inoculadas con discos de micelio del patógeno en tres diferentes tiempos:
24 horas, 10 y 14 días de aplicados los tratamientos. Se evaluó el tamaño de la lesión (30 días,
ensayo en laboratorio y 60 días, ensayo en campo), se realizó un ANOVA y test de Fisher (LSD).
Fluazinam ejerce un buen control de N. australe, inhibiendo el desarrollo de las lesiones sobre un
60% en todos los tiempos de inoculación. La mezcla de fluazinam + azoxystrobin (dosis alta) ejerce
el mejor control, sobre un 70%. Los fungicidas evaluados mantienen un buen efecto residual por al
menos 14 días logrando inhibir el desarrollo de las lesiones por sobre un 50%.

Comunicaciones Orales

Ocurrencia de aislados de Venturia inaequalis resistente a trifloxyestrobin en la Región del
Maule

Occurrence of Venturia inaequalis isolates resistant to trifloxyestrobin in the Maule Region
Raúl Méndez1
; Mauricio Lolas1
; Sylvana Soto2
; Gonzalo Díaz1
1
Laboratorio de Patología Frutal, Facultad de Ciencias Agrarias, Universidad de Talca, Talca, Chile
2
Instituto de Investigaciones Agropecuarias, Centro Regional de Investigación La Platina, Santiago,
Chile
E-Mail: rmendez@utalca.cl

La ‘sarna del manzano’ causada por el hongo Venturia inaequalis, es la enfermedad más
importante del manzano en Chile. El control químico de la sarna del manzano se basa
principalmente en aplicaciones foliares de fungicidas durante las etapas más predisponentes para
la ocurrencia de infección. En los últimos años se ha observado pérdida de efectividad de
fungicidas sobre esta enfermedad en algunos huertos comerciales de la zona central de Chile,
principalmente debido a la presión de selección ejercida por aplicaciones consecutivas de
fungicidas. En este trabajo se evaluó la sensibilidad in vitro de diferentes aislados de V. inaequalis,
provenientes desde distintos huertos comerciales y no comerciales de la Región del Maule, a los
activos trifloxystrobin, pyrimethanil, difenoconazole y penthiopyrad. Se evaluó la inhibición de
germinación de conidias e inhibición de crecimiento micelial para todos los fungicidas, utilizándose
concentraciones entre 0,0001 – 20 µg ml-1. Mediante las pruebas in vitro se determinaron las
concentraciones efectivas medias (CE50). Las pruebas de inhibición de la germinación conidial,
permitieron demostrar que el 7% de los aislados extraídos desde huertos comerciales fueron
resistentes al fungicida trifloxystrobin, presentando nula inhibición a dosis de 10 µg ml-1. Por otra
parte, se logró determinar la presencia de aislados de V. inaequalis sensibles a difenoconazole y
pyrimethanil, a través de las pruebas in vitro. Este trabajo es la primera determinación de la
ocurrencia de aislados chilenos de V. inaequalis resistentes a trifloxystrobin.

Comunicaciones Orales

Fungicidas VITISEAL y SPUR SHIELD (BSP-100) previenen el desarrollo de lesiones
causadas por Botryosphaeriaceae en vides

VITISEAL and SPURSHIELD (BSP-100) fungicides prevent the development of lesions caused by
Botryosphaeriaceae in vines
Carolina Torres; Diego Valencia; Ximena Besoain
Escuela de Agronomía, Facultad de Ciencias Agronómica y de los Alimentos, Pontificia Universidad
Católica de Valparaíso, Valparaíso, Chile
E-Mail: carolina.torres@pucv.cl

En los últimos años se ha descrito a Botryosphaeriaceae asociado a cancrosis y muerte de brazos
en vides. En Chile trabajos previos han demostrado que las principales especies aisladas desde
muerte de brazos son: Diplodia seriata, D. mutila y Neofusicoccum parvum. Por tal motivo esta
investigación tuvo como objetivo evaluar la eficacia de los fungicidas Vitiseal y Spurshield
aplicados como aspersión para el control preventivo de cancrosis causadas por
Botryosphaeriaceae en un viñedo cv. Cabernet Sauvingnon ubicado en Isla de Maipo, Región
Metropolitana. Para la obtención del inóculo, se utilizaron una mezcla de cepas de: D. seriata, D.
mutila y Neofusicoccum parvum recuperadas del Banco de Hongos del Laboratorio de
Fitopatología, las que fueron recuperadas y multiplicadas en APDA y luego incubadas a 25°C
durante 4 semanas hasta formación de conidios. En terreno, 48 horas antes de la aplicación, todas
las plantas fueron podadas en forma horizontal. Al día siguiente se aplicaron los tratamientos con
bomba de espalda en forma de aspersión, aplicando: T0= sólo agua; T1= 0,5 L/ha de Vitiseal y T2
= 0,5 L/ha de Spurshield. Al día siguiente se realizó la inoculación, depositando 50 µl sobre cada
sarmiento marcado a una concentración de 1*105 ufc/ml. La evaluación se realizó 48 días postinoculación,
podándose los sarmientos a 40 cm y se midió el largo de la estría, procediendo a
realizar aislamientos a partir de la zona de avance de las lesiones. Los resultados obtenidos se
analizaron mediante análisis de varianza y las medias fueron comparadas mediante test de
Duncan (p ≤ 0,05). Los tratamientos con Vitiseal (T1) y Spurshield (T2) lograron reducir la lesión
provocada por especies de Botryosphaeriaceae y la recuperación del inóculo desde lesiones en
comparación con el testigo (T0). Aspersiones foliares efectuadas con los fungicidas Vitiseal y
Spurshield a sarmientos podados, logran reducir en forma significativa la lesión causada por
especies de la familia Botryosphaeriaceae.

Agradecimientos: Proyecto financiado por Empresa Summit Agro Chile.

Comunicaciones Orales

Línea base de sensibilidad de aislados chilenos de Botrytis cinerea recuperados desde uva
de mesa a fluopyram

Baseline sensitivity of Chilean Botrytis cinerea isolates from table grapes to fluopyram
Marcela Esterio1
; María José Araneda1
; Mauricio Rubilar1
; Charleen Copier1
; Loreto Ozimica2
;
Jaime Auger1
1
Laboratorio de Fitopatología Frutal y Molecular, Depto. de Sanidad Vegetal, Fac. de Ciencias
Agronómicas, Universidad de Chile, Santiago, Chile
2
Bayer S.A., División CropScience, Chile
E-Mail: mesterio@uchile.cl

Las carboxamidas son importantes herramientas para el control químico de Botrytis cinerea (Bc);
actúan inhibiendo la enzima succinato deshidrogenasa (SDH). Actualmente, boscalid es la única
molécula en uso en Chile, habiéndose ya detectado ciertos niveles de pérdida de sensibilidad
asociados a presencia de mutaciones en el gen sdhB (H272R/Y/L y P225L/H). Según estudios
precedentes, algunas de estas mutaciones confieren resistencia cruzada positiva a moléculas del
mismo grupo. La mayoría de los nuevos botryticidas prontos a introducirse en el país pertenecen a
este grupo (fluopyram, isofetamida, penthiopyrad). El objetivo del presente estudio fue determinar,
mediante ensayos in vitro en medio Succinato, la línea base de sensibilidad a fluopyram en
aislados de Bc (n=70), nunca antes sometidos a esta molécula y sensibles a boscalid
(0,15<ec50<1,14µg ml).=”” además,=”” evaluar=”” el=”” efecto=”” de=”” fluopyram=”” sobre=”” 38=”” aislados=”” distinto=”” nivel=”” sensibilidad=”” a=”” boscalid=”” (ec50:=”” entre=”” 0,16=”” y=””>1000µg/mL), y sobre aislados resistentes que
presentaban las mutaciones H272R/Y/L y P225L. El valor EC50 promedio de fluopyram para
germinación conidial fue 0,16µg/mL, fluctuando entre 0,020 y 0,36µg/mL, obteniéndose para
elongación del tubo germinativo valores aún menores. Fluopyram presentó un mayor nivel de
inhibición que boscalid sobre aislados de distinto nivel de sensibilidad inicial, incluso sobre los más
resistentes. Similar comportamiento se obtuvo sobre la elongación del tubo germinativo. Todos los
aislados que presentaron las mutaciones en el codón 272, fueron más sensibles, no así los que
presentaban la P225L. Los resultados obtenidos señalan a fluopyram como una promisoria
alternativa de control de Botrytis, que permitiría recuperar la sensibilidad a boscalid en poblaciones
en que predominen las mutaciones H272R/Y/L, que hasta el momento son las más frecuentes en
Chile. Sin embargo, es importante señalar que un uso inadecuado de fluopyram podría generar
una mayor frecuencia de la mutación P225L, y con ello alta resistencia a la mayoría de las
carboxamidas. </ec50<1,14µg>

Agradecimientos: Proyecto de investigación U. de Chile – Bayer S.A., División CropScience Chile
y Plataforma on line de sensibilidad a botryticidas U. de Chile / InnovaChile de CORFO.

Comunicaciones Orales

Caracterización genética de aislados de Botrytis spp. de distinto nivel de sensibilidad a
fungicidas inhibidores de SDH en arándanos

Genetic characterization of Botrytis spp. Chilean isolates with different levels of sensitivity to
inhibitors SDH fungicides in blueberries
Geovanny Julca; Marcela Esterio; Lorena Pizarro; María José Araneda; Charleen Copier; Mauricio
Rubilar; Jaime Auger
Laboratorio de Fitopatología Frutal y Molecular, Departamento de Sanidad Vegetal, Facultad de
Ciencias Agronómicas, Universidad de Chile, Santiago-Chile
E-Mail: mesterio@uchile.cl

El cultivo del arándano en Chile, ha experimentado en los últimos años un sostenido crecimiento y
Botrytis spp., es una de las limitantes más importantes que lo afecta. Los inhibidores de la enzima
succinato deshidrogenasa (SDHIs) son una de las moléculas fungicidas base de los programas de
control químico de botrytis. Boscalid es el único fungicida de este grupo actualmente registrado en
el país. La pérdida de sensibilidad a boscalid ha sido asociada a la presencia de mutaciones en los
genes sdh que codifican para las subunidades del complejo SDH del patógeno. El objetivo de este
estudio fue identificar las mutaciones presentes en los genes sdhB y sdhC en poblaciones de
Botrytis spp. de distinto nivel de sensibilidad a boscalid en las principales zonas productoras de
arándano en Chile y, evaluar el efecto in vitro de otras carboxamidas próximas a introducirse
(fluopyram e isofetamida) en un número representativo de aislados resistentes. Mediante la
amplificación (PCR), secuenciación y alineamiento de los genes sdhB y sdhC de aislados
resistentes se detectaron las mutaciones H272R/Y (sdhB), previamente reportadas en vid y otros
cultivos, y la mutación G37S en el gen sdhC. Se comprobó que la mutación H272Y confiere una
mayor sensibilidad hacia otras moléculas SDHIs; los aislados resistentes a boscalid con esta
mutación, se comportaron como altamente sensibles a fluopyram e isofetamida (valores EC50
fluctuantes entre 1,62*10-2
µg.mL-1
/ 4,05*10-2
µg.mL-1
y 6,50*10-2
µg.mL-1
/6,79*10-2
µg.mL-1
,
respectivamente). Los aislados con las mutaciones H272R y G37S presentaron valores EC50 para
fluopyram e isofetamida similares a aislados sensibles (EC50<15 µg.mL-1
). La sustitución de glicina
por serina detectada en el codón 37 del gen sdhC (G37S), no ha sido descrita previamente y
señala que en arándanos la pérdida de sensibilidad a boscalid no estaría asociada solo a
mutaciones en el gen sdhB.

Agradecimientos: Proyecto InnovaChile de CORFO/FDF/Comité de Arándanos (Código: 12BPC2-
13492)/U. de Chile y Plataforma on line de sensibilidad a botryticidas, U. de Chile / InnovaChile de
CORFO.

Comunicaciones Orales

Determinación de sensibilidad a cyprodinil + fludioxonil, genotipos y fenotipos de aislados
de Botrytis cinerea obtenidos desde viveros de eucalipto

Sensitivity to determination to cyprodinil + fludioxonil, genotypes and phenotypes for Botrytis
cinerea isolates obtained from eucalypt nurseries
Myriam Solís1
; Marcela Esterio2
; Eugenio Sanfuentes1
1Universidad de Concepción, Facultad de Ciencias Forestales y Centro de Biotecnología,
Laboratorio de Patología Forestal, Concepción, Chile
2 Universidad de Chile, Facultad de Ciencias Agronómicas. Laboratorio de Fitopatología Frutal y
Molecular, Santiago, Chile.
E-Mail: esanfuen@udec.cl

La enfermedad “moho gris”, causada por Botrytis cinerea, constituye el principal problema
fitosanitario en viveros de eucalipto en Chile. Las frecuentes aplicaciones de fungicidas para el
control del moho gris y las características propias del patógeno, como su profusa esporulación,
determinan un potencial riesgo para la pérdida de sensibilidad en la población del patógeno. Entre
los eficaces botriticidas usados en viveros esta la mezcla cyprodinil + fludioxonil (Switch®), para la
cual ya existen reportes de aislados resistentes en viñedos del país. El objetivo fue determinar la
sensibilidad de aislados de B. cinerea en viveros de Eucalyptus spp. a cyprodinil + fludioxonil y su
relación con genotipos y fenotipos presentes. Fueron colectados 45 aislados de B. cinerea desde
dos viveros de la Región del Biobío (Quinchamalí y Yumbel). Se determinó la sensibilidad de los
aislados en seis concentraciones del producto comercial (desde 0 a 0,25 μg·mL-1
) en medio Sisler,
incubado a 24oC, por 4 días, y midiéndose el crecimiento de la colonia. La CE50 se obtuvo mediante
análisis Probit, utilizando el software Minitab 12.1, siendo el punto crítico de sensibilidad CE50 de
0,1 μg·mL-
1
. La genotipificación se realizó mediante detección de elementos transponibles y la
fenotipificación se realizó determinando crecimiento de micelial, esporulación y producción de
esclerocios del hongo. La agresividad se evaluó en discos de hojas verdes y secos de E. globulus
y E. nitens. La sensibilidad de los aislados de B. cinerea a la mezcla fluctuó entre 0.0003 μg·mL-1 y
3 μg·mL-1
, constatándose una pérdida de sensibilidad en el 17,7% de los aislados. Fueron
detectados todos los genotipos con predominancia de transposa (55,5%) y con mayor frecuencia
en vivero de Quinchamalí. Los aislados sensibles presentaron mayor capacidad de crecimiento,
esporulación, producción de esclerocios y agresividad que la registrada en los aislados resistentes.
Este estudio constituye el primer reporte de pérdida de sensibilidad a la mezcla en viveros de
eucalipto.

Agradecimientos: Forestal Mininco S.A., Sr. Francisco Rodríguez. Vivero Proplanta, Sr. Leopoldo
Quezada.

Comunicaciones Orales

Determinación de la sensibilidad de Alternaria solani a los fungicidas QoI, boscalid y
difenoconazole in vitro y su relación con la sustitución F129L

Sensitivity determination of Alternaria solani to QoI, boscalid and difenoconazole fungicides in vitro
and its relation with F129L substitution
Camila Sandoval; Ivette Acuña; Sandra Mancilla; Mincy Vargas
Instituto de Investigaciones Agropecuarias, Centro Regional de Investigación Remehue.
E-Mail: camila.sandoval@inia.cl

Tizón temprano causado por Alternaria solani, es la segunda enfermedad de follaje más importante
en el cultivo de papa en la zona sur del país, ocasionando pérdidas de hasta un 30% en cultivares
susceptibles. Para controlar a este hongo, comúnmente, se utilizan fungicidas basados en
estrobirulinas, los cuales inhiben la respiración mitocondrial por unión al sitio Qo del complejo
citocromo b (cytb). Debido a su sitio de acción único y específico, estos productos son vulnerables
a la evolución de resistencia a fungidas, reportándose en los últimos años pérdida de sensibilidad
de A. solani a QoI en Europa y Estados Unidos, asociada a la sustitución F129L en el gen que
codifica para cytb. El objetivo de este trabajo fue determinar la sensibilidad de A. solani a
fungicidas QoI, boscalid y difeconazole in vitro y su relación con la sustitución F129L. Los
aislamientos utilizados fueron obtenidos desde lesiones de hojas de papa e identificados mediante
análisis morfológico y molecular para luego determinar su sensibilidad a azoxystrobin y
pyraclostrobin mediante ensayos de germinación conidial utilizando 0-0,01-0,1-1 y 10 ppm en el
medio de cultivo. Asimismo, se evaluó el crecimiento micelial frente a los productos boscalid y
difenoconazole, obteniéndose que todos los aislamientos de A. solani evaluados resultaron ser
altamente sensibles a estos fungicidas. Complementariamente, se monitorearon los genotipos de
este patógeno y la presencia de la mutación F129L utilizando partidores específicos, seguido de
secuenciación. Se detectó la presencia de los genotipos I y II, descritos tanto en Europa y Estados
Unidos, pero no la mutación F129L, asociada a la pérdida de sensibilidad a QoI, lo cual concuerda
con los resultados obtenidos en las pruebas de resistencia a fungicidas. Esta información
constituye la línea base ante posibles futuros cambios en la resistencia a QoI de A. solani
asociadas al cultivo de papa en Chile.

Agradecimientos: Proyecto financiado por la Fundación para la innovación Agraria FIA a través
del proyecto Consorcio Papa Chile S.A. FIC-CS-C-2005-1-A-006.

Comunicaciones Orales

Evaluación de la interacción susceptibilidad varietal y dosis de fungicida en el control de
Tizón tardío (Phytophthora infestans) en el cultivo de la papa

Efficiency assessment of cultivar susceptibility and fungicide doses interaction for Late blight
(Phytophthora infestans) control in the potato crop
Ivette Acuña; María Paz Castro; Pamela Tejeda; Fabiola Cádiz; Mincy Vargas
Instituto de Investigaciones Agropecuarias, Centro Regional de Investigación Remehue
E-Mail: iacuna@inia.cl

Phytophthora infestans, agente causal del Tizón tardío de la papa, es la enfermedad más seria en
este cultivo, debido a su alta capacidad destructiva, al infectar tanto hojas, como tallos y
tubérculos, cubriendo una gran superficie al existir condiciones medioambientales favorables,
llegando a disminuir en más de 50% los rendimientos. El control del patógeno, entre otros, está
basado en la utilización de cultivares resistentes y la aplicación de fungicidas. Con el objetivo de
evaluar la interacción de la resistencia varietal y el control químico sobre la severidad del Tizón
tardío, se establecieron parcelas experimentales en INIA Remehue, Osorno, durante cuatro
temporadas (2011/12, 2012/12, 2013/14 y 2014/15). Las parcelas fueron establecidas en un diseño
de parcelas divididas en bloques completos al azar, utilizando los cultivares Symfonia, Patagonia y
Yagana (resistente, medianamente resistente y susceptible, respectivamente) como sub parcelas y
diferentes dosis de fungicidas como parcelas principales (0, 50, 75 y 100% de la dosis
comerciales). En las cuatro temporadas evaluadas se determinó diferencias estadísticas entre los
cultivares para la severidad del daño, en donde Symfonia mostró los menores niveles de daño,
seguido por Patagonia y Yagana. A su vez se determinó interacciones significativas entre dosis y
resistencia varietal. Así, según las condiciones de la temporada y presión de la enfermedad, es
posible llegar a disminuir en un 50% la dosis de fungicida recomendada en cultivares resistentes,
para obtener niveles de protección similares a las dosis de 100% en cultivares susceptibles. Los
resultados obtenidos en los experimentos dejan de manifiesto la importancia de la utilización de
cultivares resistentes a la enfermedad, con el objeto de evitar el desarrollo severo del patógeno
sobre el cultivo. La utilización de estos cultivares, enmarcado dentro del Manejo Integrado de
Enfermedades, permite disminuir la utilización de agroquímicos, reduciendo los costos y el impacto
en el medio ambiente.

Agradecimientos: Proyecto financiado por la Fundación para la innovación Agraria FIA a través
del proyecto Consorcio Papa Chile S.A. FIC-CS-C-2005-1-A-006.

Comunicaciones Orales

Sedaxane: Nueva molécula fungicida de Syngenta exclusiva para la desinfección de semillas
en distintos cultivos

Sedaxane: New fungicide from Syngenta, exclusive for seed treatment on several crops
Santiago Valdés
Syngenta Chile
E-Mail: santiago.valdes@syngenta.com

La etapa entre la siembra y la emergencia del cultivo es donde la planta está en su estado más
vulnerable y el ataque de patógenos tiene un alto impacto en la productividad. El uso de
desinfectantes de semillas es una práctica habitual; sin embargo, generalmente se utilizan
productos que se aplican de manera foliar con dosis adaptadas. El uso racional de fitosanitarios y
la constante innovación son parte integral de la visión de Syngenta. Sedaxane es un ingrediente
activo diseñado y destinado especialmente para el tratamiento de semillas, pertenece a la familia
química de los inhibidores de la enzima succinato deshidrogenasa, tiene un amplio espectro de
acción y se caracteriza por actuar eficientemente contra Rhizoctonia en distintos cultivos,
controlando la mayoría de los grupos de anastomosis; posee una acción sistémicas y forma un
halo protector a nivel de suelo, lo que le permite proteger el desarrollo inicial de la planta.

Vibrance Integral (Sedaxane, Fludioxonil, Difenoconazole y Thiametoxam) está registrado para su
uso en Trigo y cebada. Ensayos realizados en distintas temporadas demostraron un excelente
control en enfermedades de suelo y semilla como Rhizoctonia, Fusarium, carbón hediondo (Tilletia
foetida), Septoria (Mycosphaerella graminícola) en trigo y Rincosporiosis (Rhynchosporium secalis)
en cebada. Al mismo tiempo al tener incorporado un insecticida tiene excelente control en áfidos.
Aumentando la productividad en 4,8 qqm/ha respecto a otros estándares comerciales en un
promedio de más de 20 localidades.

Vibrance 500 FS (basado exclusivamente en Sedaxane) ha mostrado un excelente control de
carbón de la panoja (Sphacelotheca reiliana) en maíz. En papas está indicado para el control de
Rizoctonia (Rhizoctonia solani), observándose en los distintos ensayos niveles de control en tallos
superiores a tratamientos estándares en más de un 40%. El excelente control en estolones
permitió obtener una mayor cantidad de tubérculos aumentando de la productividad promedio en
más de un 8% respecto a otros estándares comerciales.

Comunicaciones Orales

Estrategia de control biológico para el control de pudrición gris y pudrición del racimo de
uva de mesa

Biological control strategy for the control of gray mold and bunch rot in table grapes
Fabiola Cádiz; Eduardo Salgado; Ximena Besoain
Pontificia Universidad Católica de Valparaíso, Facultad de Ciencias Agronómicas y de los
Alimentos, Escuela de Agronomía, Laboratorio de Fitopatología
E-Mail: fabiola.cadiz@pucv.cl

Pudrición gris, causado por Botrytis cinerea y pudrición del racimo, causado por un complejo de
hongos formado por los géneros Aspergillus, Botrytis, Penicillium y Rhizopus, son importantes
enfermedades que afectan a la uva de mesa y representan un desafío para un manejo integrado u
orgánico de estas enfermedades. Con el propósito de desarrollar un producto biológico con
actividad antimicrobiana sobre los agentes causantes de pudrición gris y pudrición del racimo, se
llevó a cabo una serie de ensayos in vivo sobre bayas de uva de mesa cv. Red Globe. Se
evaluaron dos microorganismos, que por razones de protección de propiedad intelectual serán
denominados mc1 (microorganismo 1) y mc2 (microorganismo 2). Los microorganismos fueron
probados como medida de control preventivo, por separados, en mezcla y en diferentes
concentraciones (concentración alta y baja), sobre cada uno de los patógenos causantes de las
enfermedades mencionadas. Primero se inocularon mc1 y mc2 y 24 horas después los hongos
patógenos. La evaluación se realizó a los 4 y 15 días post inoculación. Las diferencias entre los
tratamientos fueron analizadas mediante ANOVA y comparadas a través del test de Tukey (p <
0,05). Tanto el mc1 como el mc2 tuvieron efecto de control sobre los patógenos inhibiendo
significativamente el desarrollo de los hongos en relación al testigo. El mc1 logró mayor efecto de
control que el mc2, para todos los patógenos. Sin embargo, al mezclar ambos microorganismos el
efecto de control se vio potenciado en relación al efecto de cada microorganismo por separado. Así
se logró un sinergismo entre los mc1 y mc2. Por otra parte, se comprobó la persistencia de control
sobre los agentes patógenos por al menos 15 días post inoculación. Finalmente, no se observaron
diferencias estadísticas entre las concentraciones altas y bajas de los microorganismos evaluados
en relación a su eficacia de control.

Agradecimientos: Proyecto Innova Corfo Línea 4, código14IDL4-30322.

Comunicaciones Orales

Mezclas antagonistas para control de Neofusicoccum australe y Diplodia seriata en vid
vinífera cv. Cabernet Sauvignon

Antagonist mixtures for the control of Neofusicoccum australe and Diplodia seriata on grapevine cv.
Cabernet Sauvignon
Valeria Arriagada; Javiera Molina; Mauricio Ramírez; Jaime Auger; Luz M. Pérez; Jaime
Montealegre
Laboratorio de Fitopatología y Control Biológico de Enfermedades, Facultad de Ciencias
Agronómicas, Universidad de Chile
E-Mail: vale.arriagada.g@gmail.com

El control de patógenos de la madera de la vid como Neofussicoccum australe y Diplodia seriata,
se realiza a través del uso de fungicidas químicos y de labores culturales. La demanda de una
alternativa de control sustentable ha generado la necesidad de encontrar antagonistas que puedan
controlar efectivamente a estos hongos que penetran a la planta, principalmente a través de las
heridas de poda. El objetivo del presente trabajo fue evaluar la capacidad de mezclas de
antagonistas bacterianos y fungosos en el control de N. australe y D. seriata en estacas y plantas
de vid del cultivar Cabernet Sauvignon. Se realizaron tres experimentos, uno con estacas no
enraizadas bajo condiciones de invernadero y dos con plantas de vid a nivel de campo. Cortes de
poda frescos se trataron con las mezclas Bac1, Bac3 y Fun1, un producto de biocontrol comercial y
una formulación comercial de tiofanato de metilo y se inocularon con conidias de N. australe y D.
seriata. El nivel de control se determinó evaluando el porcentaje de desarrollo de la lesión y
porcentaje de incidencia de N. australe y D. seriata en lesiones asintomáticas. Los resultados se
analizaron por ANOVA, y en caso de existir diferencias estadísticas, se aplicó el test de Fisher
(LSD). El porcentaje de desarrollo de la lesión fue muy variable y no se determinaron diferencias
significativas entre los tratamientos. El porcentaje de incidencia de N. australe y D. seriata en
lesiones asintomáticas permitió identificar diferencias significativas entre los tratamientos, siendo la
mezcla Fun1 el tratamiento más efectivo, con un 0% de incidencia de recuperación de ambos
patógenos, tanto a nivel de invernadero como de campo. En conclusión, la mezcla antagonista
Fun1 es una alternativa eficaz para la protección de heridas de poda al ataque de estos
fitopatógenos en plantas de vid.

Agradecimiento: Financiado por FONDEF IDea Nº CA 13I-10035

Comunicaciones Orales

Capacidad antagónica in vitro e identificación molecular de microorganismos aislados de un
suelo y un compost supresivo a caída de plantas

Antagonistic capacity and molecular identification of microorganisms isolated from soil and compost
suppressive to damping-off
Violeta Muñoz1
; Paz Millas2
; Ernesto Moya-Elizondo1
; Marisol Vargas1
1Universidad de Concepción, Facultad de Agronomía
2
Instituto de Investigaciones Agropecuarias, Centro Regional de Investigación Quilamapu
E-Mail: violetamunoz@udec.cl

El control biológico de enfermedades del suelo es una interesante alternativa para disminuir el uso
de pesticida químicos en la agricultura. En este marco, el uso de sustratos supresivos a
enfermedades ha ganado un creciente interés entre científicos y agricultores. La supresividad es
atribuida a microorganismos (MO) que habitan en estos sustratos, los cuales inhiben el crecimiento
de patógenos mediante diversos mecanismos de antagonismo. Con el objetivo de aislar MO
antagonistas frente a Rhizoctonia solani y Pythium ultimum, se realizaron diluciones seriadas a
partir de un suelo y un compost supresivo a caída de plántulas, las que fueron sembradas en
medios de cultivo no selectivos y selectivos para Pseudomonas, Bacillus, Trichoderma y
actinobacterias. Para determinar la actividad antagonista in vitro de los aislados se evaluó la
competencia a través del porcentaje de inhibición del crecimiento (PIC) micelial en cultivo dual y la
acción de metabolitos antifúngicos a través del PIC radial. Además, en el caso de hongos la
actividad antagonista se clasificó utilizando la escala de Bell y se evaluó micoparasitismo. Los MO
antagonistas fueron identificados molecularmente utilizando partidores universales para hongos y
bacterias. Para las variables de PIC micelial y radial se realizó un análisis de conglomerados. De
80 MO aislados, 17 inhibieron el crecimiento micelial de R. solani entre 21 y 73% y 13 de P.
ultimum entre 16 y 53%. A su vez, tres hongos mostraron signos de parasitismo frente a ambos
patógenos y 11 inhibieron entre 11 y 80% el crecimiento radial de R. solani por medio de
metabolitos volátiles. Los MO antagonistas destacados pertenecieron a los géneros Bacillus,
Streptomyces, Penicillium y Aspergillus. Por lo tanto, se concluye que sustratos supresivos son
fuente de MO antagonistas que inhiben a patógenos mediante diversos mecanismos de acción.

Agradecimientos: Financiamiento Proyecto Fondecyt Iniciación 11121273.

Comunicaciones Orales

Hongos patógenos asociados a malezas Genista monspessulana y Cytisus scoparius y
susceptibilidad en especies de interés forestal

Pathogenic fungi associated to weeds Genista monspessulana and Cytisus scoparius and
susceptibility of forest interest species
Felipe Balocchi; Eugenio Sanfuentes
Universidad de Concepción, Facultad de Ciencias Forestales, Centro de Biotecnología, Laboratorio
de Patología Forestal, Concepción, Chile
E-Mail: esanfuen@udec.cl

Entre los principales problemas que afectan a las plantaciones forestales se encuentra la
competencia con malezas, cuyo efecto es especialmente severo en las plantaciones jóvenes (1-3
años). Las especies Genista monspessulana (L.) L.A.S.Johnson y Cytisus scoparius (L.) Link están
dentro de las malezas con mayor impacto en plantaciones forestales y los métodos de control
disponibles están siendo restringidos debido a normativas ambientales. El control biológico de
malezas con microorganismos fitopatógenos presentes en malezas es poco estudiado y puede ser
una alternativa para solucionar este problema. El objetivo de este estudio fue determinar la
ocurrencia de patógenos en G. monspessulana y C. scoparius, y la susceptibilidad de Pinus radiata
y Eucalyptus globulus a estos agentes. Fueron realizadas prospecciones a plantaciones forestales
infestadas por estas malezas en las provincias de Arauco y Concepción colectándose plantas con
síntomas y/o signos de ataque por hongos. Desde plantas sintomáticas fueron efectuados
aislamientos en diferentes medios de cultivo. En condiciones de invernadero, plantas de seis
meses de C. scoparius y de G. monspessulana fueron inoculadas utilizando disco de micelio en el
tallo, evaluándose mortalidad y tamaño de lesión, en un diseño completamente al azar. Los
aislados patogénicos fueron identificados mediante secuenciación de fragmentos amplificados con
partidores ITS1/ITS4, e inoculados en plantas de P. radiata y E. globulus de 10 y 8 meses,
respectivamente, como también en ambas malezas. Entre 37 hongos aislados Fusarium solani, F.
sambucinum, Neofusicoccum parvum y Phytophthora multivora fueron patógenos a C. scoparius,
mientras que Chondrostereum purpureum, N. parvum y F. tricinctum, lo fue a G. monspessulana.
En P. radiata y E. globulus sólo F. sambucinum y P. multivora fueron inocuos, mientras que N.
parvum fue patógeno sólo en E. globulus. Estos resultados sugieren que algunos patógenos
presentan cierto potencial para ser desarrollados como bioherbicidas, aunque estudios adicionales
son requeridos para dilucidar esta posibilidad.

Agradecimientos: Forestal Mininco S.A., Innova Bío-Bío Proyecto 12.288-EM.TES.

Comunicaciones Orales

Evaluación de la eficacia de los productos biológicos Coraza® y Mamull®, en el control de
enfermedades de madera, en vides

Evaluation of the biological products Coraza® and Mamull®, in the control of wood decay diseases
in grape
Eduardo Donoso; Walter Hettich; José Manuel Caballero; Claudio Valdés; Jorge Bratti
Bio Insumos Nativa SPA, Talca
E-Mail: edonoso@bionativa.cl

Diversos controladores biológicos han mostrado efectos en el control in vivo de patógenos
causantes de enfermedades de madera, como son Neofusicocum australe, Phaemoniella
chlamydospora. Las que causan importantes daños en cultivos de vid, tanto de mesa como
vinífera. Frente a esto se planteó la realización de dos ensayos de campo, con inoculación artificial,
en los que en plantas de vid Cabernet Sauvignon de 20 años, se evaluó en un diseño factorial, el
efecto de diversos tratamiento y diámetros de corte (1-2 mm; 1,5; 2,5 y 3,5 cm), sobre los que se
realizaron inoculaciones de Neofusicocum australe y Phaemoniella chlamydospora. Similarmente,
en plantas del mismo cuartel, se realizaron cortes de poda, que fueron inoculados con los
patógenos indicados, y se realizaron aplicaciones de los tratamientos a las 0, 24, 48, 72 y 96 horas
post inoculación. Evaluándose en ambos ensayos 7 meses después, el largo de lesión en los
puntos de corte inoculados.

Los resultados indican un efecto de control significativo de la pasta biológica para cortes desde 1,5
a 3,5 cm de diámetro para Neofusicocum (P<0,01) y lo mismo para P. chlamydospora (P<0,001),
los cortes menores no mostraron presencia de síntomas o presencia de los patógenos. Mientras
que la formulación asperjable mostro un efecto adecuado para ambos patógenos pero solo hasta
cortes de 2,5 cm de diámetro. En cuanto a tiempo residual, se observa que la formulación en pasta
logra niveles de control del 100% cuando se aplica con 24 horas post inoculación y con un efecto
significativo (P<0,05) hasta 72 horas post inoculación de Neofusicocum o Phaemoniella, mientras
que el asperjable, muestra efecto retroactivo de solo 48 horas. Presentándose ambos productos
como potenciales herramientas de control a nivel de campo.

Comunicaciones Orales

Evaluación de Coraza® en la extinción de cancros causados por Pseudomonas syringae en
Cerezo

Evaluation of Coraza® in the extinction of cankers produced by Pseudomonas syringae in Cherry
trees
Eduardo Donoso; Walter Hettich; José Manuel Caballero; Claudio Valdés; Jorge Bratti
Bio Insumos Nativa SPA, Talca
E-Mail: edonoso@bionativa.cl

El cáncer bacterial es la principal enfermedad que afecta al cerezo, generando pérdidas por
atizonamiento de yemas y flores como muerte de plantas a causa de cancros en la madera. Frente
al primer tipo de daño se cuenta con múltiples herramientas eficaces, como son productos cúpricos
y antibióticos, pero para el manejo de los cancros solo se han planteado alternativas paliativas que
consistían en la cauterización de los cancros. Durante varias temporadas, se ha evaluado el efecto
de aplicaciones de una formulación en pasta, de cepas de hongos y bacterias biocontroladoras, las
que han mostrado un efecto significativo de control. Para validar estas experiencias de campo, se
planteó un ensayo con un diseño completamente al azar, se seleccionaron plantas de cerezo en un
huerto en la Provincia de Linares de 7 años, con presencia de cancros activos. Previo a la
aplicación de los tratamientos (junio de 2012), se midió el diámetro de cada cancro y se registró su
ubicación. Posteriormente durante el otoño de 2013, se realizó la aplicación de los tratamientos
control sin aplicaciones, tratamiento comercial Polisulfuro de calcio (10 kg/ha) seguido de pintura
de poda o Coraza. En diciembre de 2012, se evaluó la presencia de cancros activos, variación de
tamaño y presencia de callo, considerado como síntoma de cicatrización. Los resultados indican,
que tanto Coraza como el manejo del huerto lograron una reducción de número de cancros activos
(P<0,05), Coraza, logra una reducción significativa del tamaño de los cancros (P<0,05) así como
una mayor frecuencia del proceso de cicatrización (P<0,01), diferenciándose significativamente del
manejo químico, el seguimiento posterior de los árboles, indican una recuperación de vigor de las
plantas, así como una recuperación del diámetro de tronco, pese a lo promisorio de estos
resultados, no es posible eliminar la presencia endófita de Pseudomonas de los arboles tratados.

Comunicaciones Orales

Elicitación de respuesta defensiva en plántulas de vid cvs. Cabernet Sauvignon y
Chardonnay

Elicitation of defense response in vine seedlings cvs. Cabernet Sauvignon and Chardonnay
Luz M. Pérez1
; Juan C. Ríos2
; Valeria Arriagada1
; Mauricio Ramírez1
; Jaime Montealegre1
1
Laboratorio de Fitopatología y Control Biológico de Enfermedades, Departamento de Sanidad
Vegetal, Facultad de Ciencias Agronómicas, Universidad de Chile
2Universidad de Los Lagos
E-Mail: luzmitaproepke@gmail.com

La enfermedad del brazo muerto de la vid es causada por diferentes géneros de hongos de la
familia Botryosphaeriaceae, de importancia creciente en ciertas zonas de cultivo a nivel mundial.
Su control se realiza a través de métodos culturales y aplicaciones preventivas de fungicidas
formulados para aplicación directa sobre cortes de poda. En la búsqueda de antagonistas
biológicos para el control de patógenos de la vid, nuestro laboratorio seleccionó hongos y bacterias
antagonistas a Neofusicoccum australe y Diplodia seriata. El objetivo de este trabajo fue establecer
si uno de los antagonistas seleccionados, Trizian 1, tenía además de poseer la característica de
controlar a estos fitopatógenos, poseer la capacidad de elicitar una respuesta defensiva en plantas
de vid. Para ello se germinaron semillas de vid de los cvs. Cabernet Sauvignon y Chardonnay en
bandejas que contenían una mezcla de suelo/perlita/fibra de coco, se regaron por capilaridad, y se
mantuvieron a 20°C en invernadero bajo luz natural. Cuando las plántulas alcanzaron un estado de
desarrollo de dos hojas verdaderas, se inocularon con una suspensión de 1×106 conidias mL-1
de
Trizian 1. A diferentes tiempos desde la inoculación, se prepararon homogeneizados en los que se
cuantificó espectrofotométricamente la actividad de enzimas que se inducen cuando existe
elicitación de defensa (Fenilalanina amonio liasa (PAL), endoquitinasas y endoglucanasas). Los
resultados mostraron una respuesta elicitora de Trizian 1 mediante la inducción de PAL, de
diferente magnitud, en plántulas de ambos cvs., mientras que solamente el cv. Chardonnay indujo
a las endoquitinasas y endoglucanasas. Los resultados permiten concluir que las diferencias
genéticas entre los cvs. Cabernet Sauvignon y Chardonnay se manifiestan en la diferencia de
respuesta observada frente a Trizian 1 y se relacionan con antecedentes sobre la diferente
susceptibilidad al ataque por patógenos de la madera de estos dos cultivares.

Agradecimiento: Financiado por FONDEF-IDeA Nº CA 13I-10035.

Comunicaciones Orales

Antagonistas fúngico y bacteriano sobre hongos de la familia Botryosphaeriaceae
promueven desarrollo en plántulas de vid cvs. Cabernet Sauvignon y Chardonnay

Fungal and bacterial antagonists on Botryosphaeria fungi promote development in vine seedlings
cvs. Cabernet Sauvignon and Chardonnay
Luz M. Pérez; Valeria Arriagada; Mauricio Ramírez; Javiera Molina; Jaime Montealegre
Laboratorio de Fitopatología y Control Biológico de Enfermedades, Departamento de Sanidad
Vegetal, Facultad de Ciencias Agronómicas, Universidad de Chile
E-Mail: luzmitaproepke@gmail.com

Diferentes hongos de la familia Botryosphaeriaceae son los agentes causales de la enfermedad del
brazo muerto de la vid. Actualmente se controlan mediante métodos culturales y aplicaciones
preventivas de fungicidas, formulados para aplicación directa sobre cortes de poda. Nuestro
laboratorio ha estado interesado en la búsqueda de antagonistas biológicos eficaces para el control
de hongos patógenos de la madera de la vid, y ha seleccionado hongos y bacterias capaces de
controlar el desarrollo de Neofusicoccum australe y de Diplodia seriata. El objetivo de este trabajo
fue establecer si estos antagonistas tenían además, la capacidad de promover el desarrollo de las
plantas de vid. Para ello se sembraron semillas de vid de los cvs. Cabernet Sauvignon y
Chardonnay en bandejas que contenían una mezcla de suelo/perlita/fibra de coco, y se sometieron
a diferentes tratamientos. Estos incluyeron inoculación de semillas, inoculación del suelo, riego con
el inoculante, y sus combinaciones. Los inoculantes usados fueron FUN1 y Bac3. Los controles se
realizaron en ausencia de inoculantes. El riego se realizó por capilaridad. Las bandejas se
mantuvieron en invernadero a 20°C bajo luz natural. Al finalizar el ensayo (3 meses) se evaluó:
longitud total, longitud de raíz, peso fresco y peso seco de plántulas. Los resultados mostraron que
Bac3 tiene un mejor efecto promotor de crecimiento que FUN1 en plántulas de vid del cv. Cabernet
Sauvignon, y que ambos promueven en magnitudes semejantes el desarrollo en plántulas de vid
del cv. Chardonnay, reflejado en el aumento en la masa de las plántulas expresada en los pesos
fresco y seco. La diferencia genética entre ambos cvs. puede explicar la diferente respuesta en
promoción de crecimiento frente a los biocontroladores usados.

Agradecimientos: Financiado por FONDEF-IDeA Nº CA 13I-10035.

Comunicaciones Orales

Relaciones ecológicas entre comunidades fúngicas de la corona de trigo y genotipos de
Pseudomonas spp. productoras de 2,4-diacetilfloroglucinol (2,4 DAPG) y fenazina (PCA)

Ecological relationships between fungal communities of the crown and genotypes of 2,4-DAPG and
phenazine-producing Pseudomonas bacteria
Herman Doussoulin1
; Nolberto Arismendi2
; Ernesto Moya-Elizondo2
1
Instituto de Producción y Sanidad Vegetal, Facultad de Ciencias Agrarias, Universidad Austral de
Chile
2Departamento de Producción Vegetal, Facultad de Agronomía, Universidad de Concepción
E-Mail: hdoussoulin@gmail.com

Bacterias Pseudomonas productoras de 2,4-diacetilfloroglucinol (2,4-DAPG) y fenazina (PCA) han
sido asociadas al control de fitopatógenos del trigo (Triticum aestivum L.); sin embargo, la relación
entre comunidades de fitopatógenos y la presencia de este tipo de bacterias ha sido poco
estudiada. Se evaluó la frecuencia de especies de hongos asociadas al primer internudo de tallos
de trigo, la incidencia y severidad que causan, y su relación con la presencia de Pseudomonas
productoras de 2,4-DAPG y PCA en cuatro sementeras comerciales de trigo en la Región de La
Araucanía y Los Lagos, durante dos temporadas de cultivo. Porciones del primer internudo de
tallos fueron sembradas en medio de cultivo para aislamiento de hongos, mientras que las raíces
se utilizaron para detectar Pseudomonas spp. productoras de 2,4 DAPG y PCA mediante PCR con
partidores específicos del gen phlD y phzCD. Géneros de hongos Phaeosphaeria, Fusarium,
Microdochium y Rhizoctonia fueron frecuentemente aislados (52,6; 22,1; 7,8 y 4,9%,
respectivamente). Se detectó la presencia de los grupos genéticos A, B, D, K, L y P asociados al
gen phlD, variando la composición genética entre predios y periodos en que se realizó el muestreo.
La presencia de bacterias productoras de 2,4 DAPG y PCA benefició la sanidad del cultivo,
relacionándose su presencia con un aumento del rendimiento y altura de plantas y una reducción
de la incidencia y severidad de daño por microorganismos en el primer internudo, asociado a un
efecto sinérgico con la diversidad de microorganismos en aquellos predios con mayor diversidad
de hongos en la corona. Este estudio entrega información relevante sobre la diversidad fúngica
asociada a la corona del trigo, los genotipos de Pseudomonas 2,4-DAPG presentes y las
relaciones existentes entre ambos grupos de microorganismos y la sanidad del cultivo de trigo bajo
condiciones del sur de Chile.

Agradecimientos: Trabajo financiado por Proyecto Fondecyt de Iniciación N°11110105.

Comunicaciones Orales

Evaluación de cuatro biofungicidas y dos aislamientos del género Trichoderma contra
Botrytis cinérea

Evaluation of four biofungicides and two isolates of the genus Trichoderma against to Botrytis
cinérea
Paulo García; Germán Melo
Universidad Santo Tomas, Grupo de Gestión Ambiental y de los Recursos Naturales en Colombia.
Programa Administración Ambiental y de los recursos Naturales. Facultad de Ciencias y
Tecnologías
E-Mail: paulogarcia@ustadistancia.edu.co

El moho gris es una enfermedad cosmopolita y limitante del cultivo y la poscosecha de la rosa en
Colombia; por lo que se propuso como principal objeto, establecer una prueba ¨in planta¨ en tallos
de rosa tiernos (Rosa spp. variedad Vendela) para la evaluación de eficacia de los biofungicidas
Rhapsody® (i.a. Bacillus subtilis cepa QST 713/dosis 7,5 ml.l-1
), Botector® (i.a. Aureobasidium
pullulans cepas DSM 14940 y DSM 14941/dosis 1,0 y 2,0 ml.l-1
), Foliguard® (i.a. Trichoderma
harzianum cepa DSM 14944/dosis 1,0 ml.l-1
), Mycobac® (i.a. Trichoderma lignorum/dosis 1,2 g.l-1
);
dos aislamientos nativos del género Trichoderma USTA_Tri-004 y USTA_Tri-006 respectivamente;
y como controles comerciales los fungicidas Sportak® (i.a. Prochloraz/dosis 0,8 g.l-1
) y Cabo® (i.a.
Fenhexamida/dosis 1,0 g.l-1
). Todos los tratamientos evaluados, presentaron valores de lesión
significativamente menores que el testigo fitopatógeno. El biofungicida Botector®, el aislamiento
USTA_Tri-004, y los fungicidas Sportak® y Cabo® respectivamente alcanzaron un 100% de
protección contra el moho gris. De otra parte los tratamientos correspondientes a los biofungicidas
Foliguard®, Mycobac®, y aislamiento USTA-Tri_006 alcanzaron una protección superior al 85%
contra B. cinerea; en contraste con el biofungicida Rhapsody® con el que solo se alcanzó un 63%
de protección. Los resultados demuestran de forma consistente, la inhibición de síntomas y signos
producidos por el moho gris en el presente modelo ¨in planta¨, por efectos de aplicación de los
biofungicidas Botector®, Foliguard®, Mycobac® y los aislamientos USTA_Tri004 y USTA_Tri006,
debido posiblemente a su interacción antagónica con el fitopatógeno, basado en el
micoparasitismo, competencia por espacio o nutrientes y antibiosis.

Agradecimientos: Al cuerpo docente del programa Administración Ambiental y de los Recursos
Naturales de la Facultad de Ciencias y Tecnologías (VUAD), y al personal coordinador del
Laboratorio de Microbiología de la Universidad Santo Tomas en Bogotá.

Comunicaciones Orales

Identificación de especies del género Meloiodgyne en el Valle Central de Chile y su
interacción con portainjertos de frutales de Carozo

Identification of Meloidogyne species from the Central Valley of Chile and interaction with stone
fruits rootstocks
Pablo Meza1
; Braulio Soto1
; Luis Rojas1
; Daniel Esmenjaud2
1
Instituto de Investigaciones Agropecuarias, Centro Regional La Platina
2UMR Institut Sophia Agrobiotech (ISA), INRA, France
E-Mail: pablo.meza@inia.cl

Los nematodos del género Meloidogyne (RKNs) son considerados unos de los más dañinos en el
mundo. En frutales de carozo pueden ocasionar pérdidas cercanas al 15%. Con el objetivo de
identificar las especies de Meloidogyne spp. en el Valle Central de Chile se colectaron 20
poblaciones entre las regiones V y VII, las que fueron caracterizadas con marcadores moleculares
e isoenzimáticos. Las especies identificadas correspondieron a M. ethiopica (75%), M. javanica
(15%) y M. arenaria (10%). Esto confirma la amplia distribución de M. ethiopica en el País.
Posteriormente, de cada población se obtuvieron 10.000 huevos para inocular dos portainjertos
descritos como resistentes, Nemaguard (Prunus persica x P. davidiana) y Marianna 2624 (P.
cerasifera x P. munsoniana), y un susceptible, Pomona (P. persica). Luego de 5 meses se evaluó
el agallamiento del sistema radical y el número de nematodos por planta. El análisis estadístico
utilizó un diseño completamente aleatorio con 5 repeticiones. El portainjerto Pomona mostró
resistencia a algunos aislados de RKNs, mientras que Nemaguard presentó una mayor resistencia
frente a M. arenaria. Por su parte, el patrón Marianna 2624 fue inmune a todas las poblaciones.
Nuestros resultados demuestran que los portainjertos de Prunus spp. pueden expresar diferentes
niveles de resistencia frente a RKNs. Esta resistencia puede ser activa tanto a nivel de aislado
(Pomona), a nivel de especie (Nemaguard) o a nivel de género (Marianna 2624).

Agradecimientos: Proyecto Fondecyt N° 11121209

Comunicaciones Orales

Riesgo de infestación por Nemátodo dorado, en predios de la agricultura familiar campesina
del área libre de enfermedades cuarentenarias de la papa

Golden cyst nematode infestation risk, in small scale farming, at the pest quarantine free area for
the potato crop
Manuel Muñoz; Pamela Tejeda; Ivette Acuña; Andrés France
Instituto de Investigaciones Agropecuarias, Centro Regional de Investigación Remehue, Programa
de Mejoramiento Genético de papa (PMGP-INIA)
E-Mail: manuel.munozd@inia.cl

El Nemátodo dorado de la papa (Globodera rostochiensis Woll.) es una importante plaga
cuarentenaria y de difícil erradicación en suelos infestados. En Chile, si bien se encontraba
confinada en la zona centro norte, durante los últimos años se han reportado focos en el área libre,
constituyendo un riesgo permanente para la zona productora de semilla de papa del país. Se
disemina por el uso de tubérculo infestado usado como semilla y por movimiento de suelo portador
del parásito. La susceptibilidad de las variedades empleadas determina la tasa de incremento
poblacional una vez introducido el parásito en un predio. El objetivo del trabajo fue recopilar
información sobre el manejo del cultivo de papa efectuado por pequeños agricultores, relacionada
con el origen de la semilla, variedades empleadas y limpieza de maquinaria y herramientas, con el
fin de evaluar el riesgo de diseminación de esta plaga hacia zonas limpias. Se aplicó una encuesta
a 80 pequeños agricultores y se obtuvo información desde bases de datos INIA de otros 122
productores de la agricultura familiar campesina (AFC), ubicados en el área libre de plagas
cuarentenarias. Un 90,1% de los agricultores utilizan semilla propia que no ha pasado por procesos
de certificación. Un 62,3% utilizan la variedad Desirée (susceptible a Nemátodo dorado) y un
porcentaje menor, variedades descritas como resistentes (Karú 15,6%, Yagana 10,7%, Rodeo
6,6%). Sobre un 45% no realiza limpieza de maquinaria e implementos agrícolas antes ni después
de usarlos. Además, el 60% declara tener conocimiento nulo sobre plagas cuarentenaria de la
papa. Podemos concluir en forma preliminar que la AFC es un grupo de alto riesgo debido al
extendido uso de semilla con baja trazabilidad, el empleo mayoritario de variedades susceptibles y
la falta de conocimiento entre los agricultores, lo que impide realizar manejos adecuados para
prevenir la diseminación de esta plaga.

Agradecimientos: Financiado por Proyecto Innova Corfo Bienes públicos 14BPC4-28525.

Comunicaciones Orales

Detecciones relevantes de plagas fitopatológicas durante período agosto 2014 y 2015.
Programa Vigilancia Fitosanitaria Agrícola, Servicio Agrícola y Ganadero

Relevant reports of phytopathological pests since August 2014. Phytosanitary Surveillance
Program, Servicio Agrícola Ganadero
Fernando Torres; Claudia Vergara; María Eugenia Murillo
Servicio Agrícola Ganadero (SAG), Subdepto. Sanidad Vegetal, Sección Vigilancia Fitosanitaria
Agrícola
E-Mail: fernando.torres@sag.gob.cl

El SAG cuenta con un Programa de Vigilancia Fitosanitaria, cuyo objetivo es mantener actualizada
la situación fitosanitaria del ámbito silvoagrícola nacional. En el ámbito agrícola, el SAG ejecuta
anualmente un sistema de vigilancia territorial orientada a la detección precoz de plagas
cuarentenarias, conocer la condición y distribución de las plagas relevantes presentes en Chile. Lo
anterior, permite apoyar la categorización de las plagas reglamentadas y respaldar la situación de
los cultivos a nivel nacional e internacional. El Sistema de Vigilancia Agrícola incluye el desarrollo
de un Plan Anual de Prospecciones visuales de cultivos y de Monitoreo de plagas mediante una
red de trampas con expresión nacional.

Este trabajo tiene como objetivo informar sobre las nuevas determinaciones e incursiones producto
de la vigilancia en las distintas áreas de riesgo, con énfasis en los organismos fitopatógenos
cuarentenarios ausentes, durante el período agosto 2014 a agosto 2015.
En dicho período, 24.843 muestras fueron examinadas en la red de laboratorios del SAG. Del total
de muestras colectadas, se determinaron 10.327 plagas en las diferentes disciplinas, de las cuales
1.292 corresponden al área fitopatológica: 144 reportes bacteriológicos, 870 micológicos y 278
virológicos.

Dentro de las determinaciones más relevantes, se identificó a High plains virus, Bean common
mosaic necrotic virus, Fitoplasma 16Sr grupo XIII, subgrupo A, Apple stem grooving virus, Potato
mop top virus, Dickeya solani, Dickeya dadantii, Phoma exigua var. foveata. El SAG, dentro de sus
facultades, considera la implementación de medidas emergenciales para controlar las plagas
cuarentenarias. Actualmente y frente a estos hallazgos, el SAG ha intensificado la vigilancia para
conocer su distribución y varias de éstas se encuentran bajo medidas oficiales de erradicación o
contención.

La vigilancia fitosanitaria ha permitido identificar plagas cuarentenarias en una condición precoz
que permite la adopción de medidas emergenciales y limitar el impacto económico en los cultivos
hospedantes.

Agradecimientos: Equipos del Programa de Vigilancia Fitosanitaria Agrícola sectoriales y
regionales SAG, Red de Laboratorios SAG.

Comunicaciones Orales

Manual Interactivo de la Papa: nueva herramienta de transferencia tecnológica INIA

Interactive Potato Manual: a new INIA technological transfer tool
Ivette Acuña; Manuel Muñoz; Patricio Sandaña; Sandra Orena; Rodrigo Bravo; Julio Kalazich;
Pamela Tejeda; María Paz Castro; Camila Sandoval
Instituto de Investigaciones Agropecuarias, Centro Regional de Investigación Remehue
E-Mail: mp.castrot@gmail.com

El Manual Interactivo de la Papa INIA (http://manualinia.papachile.cl) es una nueva herramienta de
transferencia tecnológica desarrollada por INIA, en conjunto con el Consorcio Papa Chile S.A. y el
apoyo de la Fundación para la Innovación Agraria (FIA). El objetivo principal de este manual es
servir como una herramienta de apoyo tecnológico tanto para productores agrícolas, asesores
técnicos, profesionales del rubro, y todos aquellos actores de la cadena productiva del cultivo de la
papa. Al acceder al manual, los usuarios podrán encontrar variada y actualizada información
relacionada a diversos aspectos de la producción de este cultivo, tales como: manejo agronómico,
cosecha y almacenaje de tubérculos, características y usos de las variedades comerciales de papa
y manejo integrado de plagas, enfermedades y malezas, entre otros. Además, cuenta con una
sección especialmente dedicada a las diferentes herramientas de apoyo a toma de decisiones
desarrolladas por INIA, como alertas tempranas de enfermedades y calculadora razonada tanto de
fertilización como rendimiento. En conjunto a esto, los usuarios pueden acceder a una nutrida
galería de imágenes ilustrativas, con sus respectivas descripciones y autorías. Una de las
novedades que ofrece el manual es la interactividad que lo caracteriza, ya que los usuarios pueden
visualizar imágenes y definición de conceptos dentro del mismo texto que están visitando, sin
necesidad de buscar otra sección o página web, otorgando comodidad al momento de la
navegación. En complemento a lo anterior, el manual se encuentra interconectado en todas sus
secciones, es decir, el usuario puede transitar entre diferentes temáticas, sin la necesidad de
buscarlas específicamente dentro del menú de inicio. De este modo, el Manual Interactivo de la
Papa INIA brinda a los visitantes un formato amigable, cómodo y fácil de visitar, el cual sirve como
una importante fuente de conocimiento e información vital para un correcto manejo del cultivo.

Agradecimientos: Proyecto financiado por la Fundación para la innovación Agraria FIA a través
del proyecto Consorcio Papa Chile S.A. FIC-CS-C-2005-1-A-006.

Comunicaciones Póster

Eclosión de J2 de Globodera rostochiensis ante la presencia de exudados radicales de
cuatro especies solanáceas

Globodera rostochiensis J2 hatching in presence of four Solanaceae species root exudates
Pedro Brintrup; Laura Böhm; Herman Doussoulin
Instituto de Producción y Sanidad Vegetal, Facultad de Ciencias Agrarias, Universidad Austral de
Chile, Valdivia
E-Mail: pb393_17@hotmail.com

Globodera rostochiensis, es uno de los patógenos más importantes de papa (Solanum tuberosum
L.), considerado plaga cuarentenaria de control obligado a nivel mundial, pudiendo infestar
además, pero en menor intensidad a otras solanáceas. Para iniciar su ciclo biológico G.
rostochiensis requiere del exudado radical de papa, el que estimula la eclosión de J2 y la posterior
penetración de raíces. El objetivo de este trabajo fue comparar el efecto, en la eclosión de J2 del
nemátodo, de exudados radicales de papa cv. Desireé (testigo susceptible), tomate (S.
lycopersicum) cv. “Cherry”, petunia corriente (Petunia hybrida) y ají “amarillo” (Capsicum annum).
Para ello se realizó un ensayo in vitro en base a cinco tratamientos, en función de cada especie
vegetal y un control con agua destilada con tres repeticiones cada uno. En portaobjetos excavado
se dispusieron de a tres quistes del nemátodo a los cuales se incorporó 1mL del exudado radical
correspondiente, obtenido por la metodología de Turner et al. (2009), manteniendo el ensayo en
cámaras húmedas a 18 ± 2 °C durante cinco semanas; semanalmente se contabilizaba el número
de J2 eclosionados, incorporando nuevamente 1 mL del exudado en cada tratamiento. Las
evaluaciones se realizaron comparando el número y porcentaje de eclosión de J2 en relación al
testigo papa cv. Desireé. Los resultados obtenidos indican que la eclosión efectiva de J2 desde
huevos fue significativamente superior en tomate y papa, comparados con el resto de los
tratamientos, lo cual refuerza que tomate constituye un hospedero alternativo a nivel de campo.
Por otra parte, el tratamiento con agua destilada indujo una mayor eclosión de J2 que los exudados
radicales de ají y petunia lo que significaría que ambas especies no son hospederas de G.
rostochiensis.

Agradecimientos: Los autores agradecen a la dirección de investigación de la Universidad Austral
de Chile por los aportes realizados por el proyecto DID UACh S-2014-11.

Comunicaciones Póster

Efecto de extractos acuosos de plantas nativas chilenas en la eclosión de J2 de Globodera
rostochiensis

Globodera rostochiensis hatching effects of aqueous extract from Chilean native plants
Laura Böhm; Herman Doussoulin; Erika Briceño
Universidad Austral de Chile, Instituto de Producción y Sanidad Vegetal
E-Mail: lbohm@uach.cl

Los juveniles de segundo estado (J2) de Globodera rostochiensis, que inician el proceso infestivo
en plantas, se forman en los huevos contenidos dentro de los quistes en respuesta a la presencia
de exudados radicales de papa (ERP). La posibilidad de enmascarar el efecto ERP constituye una
alternativa viable para el control del nemátodo. En la presente investigación se evaluó el efecto
sobre la eclosión de J2 desde quistes del nemátodo expuestos a extractos acuosos del follaje de
Aristotelia chilensis (maqui), Drymis winteri (canelo), Gevuina avellana (avellano), Laurelia
sempervirens (laurel), Luma apiculata (arrayán), Maytenus boaria (maitén), y Ugni molinae (murta).
El extracto acuoso base de cada especie (EB) se preparó con 10 g de polvo de hojas secas
maceradas en 100 mL de agua destilada estéril durante 24 h en oscuridad y filtrada en papel
Whatmann Nº1. Las diluciones de 50 y 10% se realizaron con agua destilada estéril. El ERP se
obtuvo desde plantas del cultivar Desireé siguiendo metodología estándar. En vasos de precipitado
de 80mL se dispusieron 15 mL de ERP y 15 mL de cada especie y concentración, insertando
dentro de los vasos un tamiz conteniendo 10 quistes del nemátodo, replicando cada tratamiento
cinco veces. Los tratamientos testigos correspondían a ERP y agua destilada y el ensayo se
mantuvo durante ocho semanas a 20°C. Semanalmente se renovabas las suspensiones
contabilizando los J2 eclosionados. Los resultados obtenidos muestran que todas las especies
vegetales disminuyeron significativamente la tasa y porcentaje de eclosión de J2, efecto más
marcado a partir de la tercera semana de ensayo. Coincidiendo con la literatura la formación de
juveniles infestivos se vio incrementada en presencia de ERP. Los recuentos realizados una vez
finalizado el ensayo mostraron que en los tratamientos conteniendo extractos de laurel, canelo y
maqui, los huevos remanentes en los quistes presentaban porcentajes de destrucción superiores al
32%.

Comunicaciones Póster

Detección de un nuevo virus en el cultivo del ajo (Allium sativum) en Chile

Detection of a new virus in garlic (Allium sativum) in Chile
Mónica Madariaga; Isabel Ramírez; Elizabeth Kehr
Instituto de Investigaciones Agropecuarias. Centro Regional de Investigación La Platina
E-Mail: mmadariaga@inia.cl

El cultivo del ajo (Allium sativum) se ve afectado por múltiples infecciones virales de especies
pertenecientes a los géneros Potyvirus, Carlavirus y Allexivirus. La propagación vegetativa del
cultivo permite la permanencia de estas virosis desde una generación a otra provocando un
aumento en las pérdidas del rendimiento en cada ciclo sucesivo del cultivo. En Chile se determinó
en los años ´90 la presencia de Onion yellow dwarf (OYDV) afectando el cultivo. No obstante, la
sintomatología que muestran las plantas de ajo en la actualidad sugieren la presencia de
infecciones múltiples. El objetivo de este trabajo fue identificar la presencia de virus pertenecientes
a los géneros Potyvirus, Carlavirus y Allexivirus en plantas de ajo con síntomas de clorosis y falta
de crecimiento. Se colectaron muestras compuestas de hojas y se realizó una extracción de RNA
utilizando RNA-Solv de acuerdo a las instrucciones del fabricante. El RNA obtenido se utilizó para
generar una hebra de DNA (cDNA) en presencia de Random primers. El cDNA se amplificó
mediante PCR utilizando cinco pares de patidores para la detección de potyvirus, carlavirus y
allexivirus. Los resultados mostraron dos amplicones que correspondieron a la amplificación de
451 pb del genoma del carlavirus Garlic common latent virus (GarCLV) y 318 pb de la región del
genoma del potyvirus OYDV, ambos fragmentos amplificados correspondieron a la región del
genoma que codifica para la proteína de cubierta de los virus. Estos resultados corresponden a la
primera identificación en Chile de GarCLV y corroboración de la presencia de OYDV afectando el
cultivo. Ambos productos de PCR fueron enviados a secuenciar a Macrogen para posteriormente
comparar las secuencias obtenidas con las disponibles en las bases de datos. La identidad de
ambos virus fue corroborada mediante la prueba serológica ELISA con anticuerpos comerciales
específicos para cada virus.

Comunicaciones Póster

Detección de Turnip mosaic virus en berro (Nasturtium officinale W.T. Aiton) en Chile

Detection of Turnip mosaic virus in watercress (Nasturtium officinale W.T. Aiton) in Chile
Isabel Ramírez; Daniela Olivares; Gabriel Saavedra; Mónica Madariaga
Instituto de Investigaciones Agropecuarias. Centro Regional de Investigación La Platina
E-Mail: isabel.ramirez@inia.cl

El Berro (Nasturtium officinale W.T. Aiton), es una planta perenne que crece a orillas de arroyos o
lagunas. Es rico en vitaminas A y C, fibras y minerales, especialmente calcio, yodo y fósforo. Estas
cualidades nutritivas ofrecen una alternativa interesante para la producción del cultivo para fines
agroindustriales.

El berro, al igual que otras especies vegetales, no está ajeno a infecciones causadas por virus, las
cuales en la mayoría de los casos limitan el desarrollo de los cultivos. Por lo tanto, el objetivo de
este trabajo fue la identificación de virus presentes en plantas de berro y que mostraban
sintomatología de mosaico. Se colectaron ocho muestras desde plantas de berro afectadas. A
cada muestra se le realizó la prueba serológica Enzyme linked inmunosorbent Assay (ELISA) con
anticuerpos comerciales específicos para el género Potyvirus (Agdia Inc.). Los resultados
obtenidos indicaron la presencia de virus en las muestras analizadas. Para determinar la identidad
del potyvirus presente, se realizó la detección mediante RT-PCR, usando los partidores universales
Sprimer y M4T y se obtuvo una banda esperada de 1,7 kb. El amplicón fue purificado, insertado en
vector pGEM-T y clonado. Posteriormente los plásmidos obtenidos de los clones fueron
secuenciados en sentido y antisentido, obtenido una secuencia de 1709pb, la cual fue comparada
mediante BLASTn con secuencias presentes en la base de dato NCBI, obteniendo un 97% de
identidad con el virus Turnip mosaic virus (TuMV). Finalmente, la identidad del virus fue
corroborada mediante prueba ELISA usando anticuerpos específicos para TuMV (Agdia Inc.) y
además, se observaron partículas virales filamentosas de alrededor de 720 nm de largo mediante
microscopía electrónica. Estos resultados corresponden a la primera determinación de virosis en el
cultivo del berro en Chile.

Comunicaciones Póster

Detección y caracterización molecular de un fitoplasma asociado a la amarillez de la acelga
(Beta vulgaris subsp. vulgaris)

Detection and molecular characterization of a phytoplasma associated to swiss chard yellows (Beta
vulgaris subsp. vulgaris)
Nicola Fiore1
; Marcelo Cabrera2
; Maureen Pizarro2
; Ingrid Soto3
; Nicolás Quiroga1
; Alan Zamorano1
1Departamento de Sanidad Vegetal, Facultad de Ciencias Agronómicas, Universidad de Chile,
Santiago, Chile
2
Servicio Agrícola y Ganadero, Laboratorios y Estaciones Cuarentenarias de Lo Aguirre, Santiago,
Chile
3
Servicio Agrícola y Ganadero, Oficina de Arica y Parinacota, Arica, Chile.
E-Mail: nfiore@uchile.cl

El cultivo de la acelga en Chile se concentra en la zona central, principalmente en la Región
Metropolitana y alcanzando las 600 hectáreas a nivel nacional. Por otro lado, la región de Arica y
Parinacota, si bien no presenta una amplia superficie de plantación de acelga, alcanzando sólo 5
hectáreas, esta producción cubre las necesidades locales y así no se debe recurrir al mercado de
la zona central, evitando el aumento de costos por transporte. Durante el año 2013, un predio de
acelgas de la comuna de Arica presentó numerosas plantas con marchitez y amarillamiento severo,
ocasionando pérdida de producción. Los síntomas presentaban similitudes a los observados en la
enfermedad conocida como marchitez amarilla de la remolacha, causada por el fitoplasma 16SrIIIJ.
Se realizaron análisis por PCR anidada para dos genes de fitoplasma (tuf y 16Sr RNA) con
partidores universales. Los amplicones obtenidos fueron clonados y luego, cinco colonias fueron
secuenciadas para realizar posteriormente los análisis bioinformáticos: alineamientos de
secuencias, reconstrucciones filogenéticas y RFLP in silico. De las muestras analizadas, todas
fueron positivas al fitoplasma pertenciente al subgrupo ribosomal 16SrIII-J. Este es el mismo
agente causal de un gran número de enfermedades tanto en Chile como en Sudamérica.
Adicionalmente, este es el primer reporte de una enfermedad causada por fitoplasma en acelga en
el mundo.

Agradecimientos: Proyecto FONDECYT 2014 N° 1140883

Comunicaciones Póster

Estudio de la prevalencia de infecciones causadas por viroides en una colección de Vitis
vinífera

A prevalence study of viroids infection in a Vitis vinífera collection
Mónica Madariaga; Isabel Ramírez; Susana Moreno; Erika Salazar
Instituto de Investigaciones Agropecuarias. Centro Regional de Investigación La Platina
E-Mail: mmadariaga@inia.cl

Los viroides son agentes infecciosos que pueden causar graves enfermedades en las plantas,
generando importantes pérdidas económicas. El cultivo de la vid no está ajeno a este tipo de
infecciones. A nivel mundial se han determinado cinco viroides que lo afectan: Hop stunt viroid
(HSVd), Austalian grapevine viroid (AGVd), Grapevine yellow speckle viroid-1 (GYSVd-1),
Grapevine yellow speckle viroid-2 (GYSVd-2) y Citrus exocortis viroid (CEVd). En el último tiempo
estos fitopatógenos, a excepción de CEVd, fueron determinados en viñedos y parronales chilenos.
Su presencia muchas veces pasa desapercibida debido a que no todos ellos manifiestan síntomas.
GYSVd-1, y GYSVd-2 causan un fino moteado y en co-infección con el virus Grape fan leaf virus
(GFLV) generan el síndrome “vein banding disease”, producto de un sinergísmo entre el virus y el
viroide. El objetivo de este trabajo fue determinar la prevalencia de viroides que afectan la vid y del
síndrome Vein banding disease en la colección germoplasma de Vitis vinifera de INIA-La Platina.
Durante los meses de enero y febrero de 2015 se colectaron 89 muestras correspondientes a 27
variedades de vid colectadas en diversas zonas del pais, de las cuales se realizó una extracción de
ácidos nucleicos totales (TNA). El TNA se utilizó como templado para sintetizar cDNA en presencia
de RT-MMLV de Promega y de random primers. El cDNA obtenido se amplificó mediante un PCR
múltiple para determinar la presencia de los 5 viroides mencionados. En forma paralela, se utilizó el
cDNA sintetizado para amplificar un fragmento del genoma de GFLV. Los resultados indicaron una
prevalencia de 94,4% para HSVd; 7,9% para AGVd; 5,6% para GYSVd-1; 25,8% para GYSVd-2,
29,2% para GYSVd-1 y/o GYSVd-2; 34,8% para GFLV y 16,9% para Vein banding disease. Este
trabajo representa el primer reporte de prevalencia de viroides que afectan la vid en Chile.

Comunicaciones Póster

Prospección de tres virus asociados al complejo del leafroll de la vid (Grapevine leafroll
associated virus) en uvas para vino de la zona Centro – Sur de Chile

Survey of three viruses associated to the grapevine leafroll complex (Grapevine leafroll associated
virus) in wine grapes in South-Central Chile
Ma. Valentina Mujica1
; Roxana Mora2
; Marlene Rosales3
; Claudio Sandoval4
1
Instituto Nacional de Investigación Agropecuaria. Uruguay
2
Instituto de Investigaciones Agropecuarias, Centro Regional de Investigación La Platina
3
Pontificia Universidad Católica de Chile
4Universidad de Talca
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Uno de los problemas fitopatológicos más importantes de la viticultura a nivel mundial que afectan
el desarrollo, producción y calidad, son aquellos producidos por virus. El Grapevine leafroll
associated virus (GLRaV) está presente en todas las áreas donde el género Vitis es cultivado. Su
amplia distribución está relacionada con el modo en que las plantas son propagadas. En Chile, el
primer reporte de un virus perteneciente a este complejo fue realizado en el año 1988. Sin
embargo, no existen en el país antecedentes acerca de la dispersión de los virus de este complejo
en cultivares destinados a la producción de vino en la zona Centro-Sur. Por esta razón, el objetivo
de este trabajo fue prospectar en las variedades viníferas más importantes el grado de avance de
la infección de tres virus pertenecientes a este complejo: GLRaV-1, GLRaV-2 y GLRaV-3.
Muestras de Vitis vinifera sintomáticas y asintomáticas se colectaron en viñedos de la zona CentroSur,
las cuales fueron analizadas para determinar la presencia de los tres virus antes
mencionados. En esta zona se testearon un total de 1992 muestras a través de DAS-ELISA y los
resultados obtenidos se confirmaron por RT-PCR. La tasa de infección encontrada fue de 3,4%
para el GLRaV-1, 9,4% para el GLRaV-2 y 23,5% para el GLRaV-3. La tasa de infección global de
los viñedos analizados fue de 36,5%. El GLRaV-1 fue el virus menos prevalente (3,4%), estado
presente solo en el 2,5% de las muestras colectadas en la VI Región, 3,9% de las de la VII Región,
no siendo detectado en la VIII Región. El GLRaV-2 estuvo presente en el 9,3% de las plantas
muestreadas, siendo detectado en el 11,2; 8,6 y 12,9% de las muestras detectadas en la VI, VII y
VIII Regiones respectivamente. Finalmente, el GLRaV-3 fue el virus más prevalente (23,4%),
siendo detectado en el 33,8; 20,1 y 24,3% de las muestras colectadas en las Regiones VI, VII y VIII
respectivamente.