XIX Congreso de Fitopatología (Noviembre 2010)

Junio 27, 2019

XIX Congreso Nacional de Fitopatología

Noviembre 2010
Instituto de Investigaciones Agropecuarias
Pucón – Chile
9 al 12 de Noviembre de 2010

Generación de Nuevas
Variedades con Tolerancia a Fitopatógenos Utilizando Ingeniería Genética: Estrategias
Actuales en Chile
Prieto E., Humberto; Bioquímico, Dr.
INIA Centro Regional La Platina

Desde 2002 el Centro Regional INIA La Platina lleva a cabo un programa
de transformación genética de vides, a través del desarrollo de un sistema de alto
flujo de transformación vía Agrobacterium tumefaciens en embriones somáticos ‘Thompson
Seedless’. Inicialmente enfocado en el control de Botrytis, las líneas más avanzadas de
este programa se desarrollaron utilizando los genes chi42 y nag70 de Trichoderma harzianum
Pl, y el gen chi33 de un aislado local de T. virens. Cerca de 3000 líneas candidato se
han establecido de manera exitosa en invernadero de bioseguridad, de las cuales 103,
representadas por 568 plantas GM, se liberaron a campo de bioseguridad durante Septiembre
de 2004. Los resultados permitieron generar una población tolerante a hongos (20 líneas
top) basados en un análisis discriminante multivariado de las tolerancias observadas para
B. cinerea y E. necator durante tres temporadas. El escalamiento del sistema de
embriogénesis somática (SE) fue obtenido por el diseño de un biorreactor, útil en la
línea de trabajo para transformación genética de materiales portainjerto. La
generación de líneas tolerantes a Grapevine Fanleaf Virus fue iniciada junto con la
evaluación de distintas estrategias de silenciamiento génico en vides, utilizando para
ello vectores inductores de RNA doble hebra in vivo. Varias líneas portainjerto GM han
sido ya generadas y preliminarmente evaluadas mediante experimentos de microinjertación
sobre una población de plantas Saint George infectadas con GFLV Últimamente, nuevas
estrategias de silenciamiento se están desarrollando en formato «prueba de concepto»
para el uso de promotores inducibles de Vitis vinifera dirigiendo la expresión de
microRNA artificiales en esta especie. Los resultados y estrategias serán mostrados como
un análisis de la potencia de estas herramientas para generar y validar nueva tecnología
en especies frutales.

Perspectiva de los Cultivos Transgénicos
en el Sistema Productivo Agrícola Chileno
Sánchez Zúñiga, Miguel Ángel
Director Ejecutivo ChileBio

 

Después de 14 años de comercialización, en el 2009 se mantuvo en 25
el número de países que conforman la lista de aquellos que utilizan cultivos
genéticamente modificados, cubriendo un área total cultivada de 134 millones de
hectáreas. Los cultivos GM de mayor adopción son, en su orden: soya, maíz, algodón y
cañóla. La superficie acumulada entre 1996 y 2009 casi alcanzó los mil millones de
nectareas. En total, 57 países han autorizado la importación de cultivos de este tipo
para uso alimentario y forrajero y su liberación al medio ambiente desde 1996. En total,
se han otorgado 762 autorizaciones para 155 eventos en 24 cultivos. Existen dos claras
tendencias a nivel mundial relacionadas a la regulación de los cultivos transgénicos:
Estados Unidos versus la Unión Europea. Estados Unidos es el país líder en la
aplicación de la biotecnología a la agricultura. Una de las razones por las que ha
alcanzado esta posición es la flexibilidad de su marco regulador. En la UE, la posición
reticente de una parte significativa de la opinión pública ha contribuido a la
aprobación por parte de las autoridades de una legislación pensada para evitar los
riesgos potenciales de los Organismos Modificados Genéticamente (OMG) sobre la salud
humana y el medio ambiente. El procedimiento para autorizar uno de estos organismos es
largo y prolijo y se exige un etiquetado obligatorio a partir de un determinado umbral. En
Chile, la Resolución N° 1523 de 2001 del Servicio Agrícola y Ganadero regula la
liberación de transgénicos, autoriza sólo la entrada de semillas transgénicas para
multiplicación con fines de exportación. A su vez, el MINSAL posee la Norma Técnica
Administrativa sobre incorporación a nómina de eventos biotecnológicos en alimentos de
consumo humano (Norma N°83), la que pretende el adecuado registro en una nómina de
productos y componentes asociados a los alimentos que hayan sido originados por medio de
la biotecnología moderna. Chile está atrasado en estos temas en comparación a los
demás países de la región (Argentina, Brasil, Uruguay, Paraguay, Colombia, México,
EEUU, Canadá). Sin una legislación moderna se está impidiendo incrementar la
competitividad de productos de importancia nacional, coartando la investigación y
desarrollo a nivel nacional, y negando a la ciudadanía los beneficios de los cultivos y
alimentos transgénicos.

 

Marco Regulador Chileno: Análisis de
las Propuestas de Ley Sobre Cultivos Transgénicos Desde la Perspectiva Empresarial
Schindler Maggi, Mario
Gerente Ejecutivo ANPROS

La producción de cultivos transgénicos en Chile está limitada a la
producción y reexportación de semillas, con el objetivo de permitir el desarrollo de
esta actividad económica que en la actualidad le significa al país ingresos cercanos a
los US$ 200 millones. La normativa nacional que las ampara corresponde a resoluciones del
Servicio Agrícola y Ganadero, siendo la más relevante la resolución 1523 del año 2001,
que establece normas para la internación e Introducción al Medio Ambiente de Organismos
Vegetales vivos modificados (OVVM) de Propagación. En la actualidad existe la voluntad
manifiesta por parte de la actual administración del Gobierno de ampliar la autorización
de cultivos transgénicos en el País, para lo cual se ha visto que es imprescindible
contar con una legislación que permita sustentar la producción de OWM en Chile, proceso
que se encuentra en pleno desarrollo en la actualidad y cuya discusión legislativa se
espera sea retomada en el Senado a la brevedad. Es importante recalcar en este sentido que
en el Senado ya existe una moción parlamentaria llamada de Bioseguridad de Organismos
Vegetales Modificados, ingresada al Senado en Noviembre del 2006 y cuyo trámite
legislativo, por diversos motivos, ha estado detenido desde marzo del 2008. Para la
Industria Semillera chilena resulta también de mucha relevancia poder contar con un
cuerpo legal que le de sustentabilidad en el largo plazo a la producción de semilla OWM,
ya que las resoluciones son cuerpos administrativos fácilmente derogables. Adicionalmente
a lo anterior, la Industria Semillera Chilena ha debido desarrollar estrategias de
coexistencia entre las producciones OWM con las producciones convencionales, producto de
las exigencias de mercados como el europeo, que a la fecha no aceptan presencia adventicia
de OWM en sus lotes, lo cual ha significado un importante desafío para esta industria.
Por último, la importancia de desarrollar estrategias de coexistencia con otros sistemas
productivos ha llevado a la Industria Semillera Chilena a establecer una mesa de trabajo
con los agricultores orgánicos, siendo todas estas experiencias las que cimentarán las
bases para una futura y moderna coexistencia entre distintos cultivos y distintos sistemas
productivos.

Normativa de Autorización y Post-registro
de Plaguicidas en Chile
Figueroa Cornejo, Ignacio
Ingeniero Agrónomo
Jefe Subdepartamento de Plaguicidas y Fertilizantes División Protección Agrícola y
Forestal, SAG

La autorización de plaguicidas de uso agrícola en Chile es realizada
por el Servicio Agrícola y Ganadero, según lo establecido en el Decreto Ley N° 3.557 de
1980, y sus modificaciones, que otorgan al SAG la facultad de regular, restringir o
prohibir la fabricación, importación, exportación, distribución, tenencia, venta y
aplicación de plaguicidas de uso agrícola, y la Resolución N° 3.670 de 1999, que
establece los requisitos para la evaluación y autorización de plaguicidas. La
evaluación en Chile es realizada por el sistema de identidad, donde cada producto es
único y el usuario que tenga la intención de registrar un plaguicida en el país debe
presentar información asociada a certificados de composición para el ingrediente activo
y el producto formulado, toxicidad (aguda, subcrónica, crónica y otras), ecotoxicidad,
medioambiental, metodologías analíticas, residualidad, eficacia, entre otras. Una vez
finalizada la evaluación, el producto podrá ser denegada su solicitud o podrá ser
autorizado por resolución, en donde la etiqueta es parte integral de ésta y la cual
contiene la información más relevante presente en el dossier del producto, que permiten
un uso y manejo seguro de éste. Posterior a la autorización, existe una serie de
actividades de post-registro, que corresponden a: fiscalización de la internación y
formulación nacional de plaguicidas; fiscalización de uso y comercio de plaguicidas, de
acuerdo a lo establecido por la normativa vigente y para dar cumplimiento a lo indicado en
la etiqueta de un plaguicida; renovación de la autorización y modificaciones del
registro originalmente autorizado. Adicionalmente, existen actividades asociadas a
compromisos adquiridos por Chile ante organismos y convenios internacionales como la FAO,
Codex Alimentarius, OCDE, Estocolmo, Montreal y Rotterdam, cuya ejecución es trabajada en
mesas interinstitucionales, público-privadas.

Análisis de Riesgo y Equivalencia:
Desafíos para el Sistema de Autorización de Plaguicidas en Chile
Correa B., Arturo
Ingeniero Agrónomo
INIA Centro Regional La Platina

Desde la creación del Subdepartamento de Plaguicidas y Fertilizantes,
dependiente de la División de Protección Agrícola del Servicio Agrícola y Ganadero en
el año 2000, Chile ha contado con una entidad técnica especializada que, en los últimos
diez años, ha generado el marco legal para la importación, fabricación, exportación,
distribución, uso y manejo de plaguicidas, considerando aspectos relacionados a la salud
humana, la protección del medio ambiente, las prácticas agrícolas, los intercambios
internacionales, el control de fronteras y el comercio; ha definido Procedimientos
Estandarizados para las principales actividades realizadas; y ha establecido una
estrategia nacional de marcado carácter proactivo en pos de lograr un efectivo control en
el ciclo de vida de los plaguicidas. Si bien lo realizado hasta el momento ha sido
exitoso, aún existen materias pendientes que deben ser abordadas, si el país quiere
otorgar mayores garantías respecto de protección a las personas, el medio ambiente y la
eficacia agronómica en el uso de plaguicidas. Dos de ellas, factibles de ser exploradas
se relacionan con la complementación del actual sistema de autorización de plaguicidas,
a saber: a. La implementación de una evaluación de riesgo basada en el principio de
mínimo de riesgo para las personas; b. La adopción del registro de plaguicidas por
equivalencia. Ambas materias son actualmente parte estructural del proceso de
autorización de plaguicidas en los países más avanzados y por tanto, un desafío
técnico que Chile debe asumir.

Algunos Aspectos Susceptibles de Revisar
en la Actual Normativa de Registro y Empleo de Pesticidas Agrícolas en Chile
Andrade V., Orlando
Ingeniero Agrónomo, Ph. D.
Depto. de Recursos Naturales, Escuela de Agronomía, Universidad Católica de Temuco,
Temuco – Chile

El concretar la propuesta que Chile se constituya en una potencia
agroalimentaria, requiere mejorar significativamente los procesos y gestiones productivas
agrícolas, a la par con un decidido impulso a la innovación. Tanto los tratados y
acuerdos comerciales establecidos en los últimos años con otras naciones, como la
experiencia de quienes estamos de distintas formas involucrados en el tema de los
pesticidas de uso agrícola, así como el cada vez más audible clamor público derivado
de la a veces difusa información sobre el tema o del propio sentido común, imponen la
necesidad de mejorar los procesos productivos, particularmente en lo referido a
tecnologías de bajo impacto medioambiental. Sin embargo, a pesar de los esfuerzos
existentes en diversas materias relacionadas con políticas medioambientales tendientes a
preservar el patrimonio biológico, hidrológico y edáfico, en nuestro país aún es
posible mejorar sustancialmente algunos aspectos tan trascendentales como son la
regulación en el registro, comercialización y uso de pesticidas agrícolas. Si bien en
algunos rubros como frutales de exportación, los registros y limites de residuos en los
mercados de destino generan sus propias regulaciones y el asesoramiento
técnico-profesional se encuentra bastante más desarrollado, persiste en toda la restante
agricultura tradicional injustificadas falencias asociadas al tema pesticidas, que afectan
tanto a agricultores como a consumidores y al medio ambiente. Parte de tales falencias
están relacionadas con la ausencia de información completa y transparente que permita a
los usuarios tomar la decisión más adecuada en la elección de un pesticida. A juicio
del autor, algunos de los problemas relacionados con el registro, comercialización y uso
de plaguicidas están relacionados con a lo menos 3 aspectos susceptibles de ser revisados
y mejorados en nuestra normativa de pesticidas agrícolas: a) Requisitos para la
ejecución de experimentos y elaboración de informes técnicos sobre eficacia de los
pesticidas comercializados en Chile; b) Transparentar la información sobre eficacia
relativa de cada ingrediente activo o producto comercial; y c) Regular la venta de
pesticidas con el apoyo de personal capacitado. En relación al primer punto, se debiera
exigir la especialización de todos quienes emiten informes técnicos así como su
independencia de las empresas de agroquímicos; registrar sólo estaciones experimentales
independientes y que se encuentren debidamente implementadas para este tipo de
evaluaciones y, cruzar y verificar la información cuando existan contradicciones en el
comportamiento de algunas moléculas. Respecto del segundo punto, debieran implementarse
ensayos regionales o incluso nacionales, que incorporen todos los productos comerciales
que se recomiendan para un problema específico, de tal forma de establecer un ranking de
eficacia de amplio conocimiento. Hoy no se discrimina entre grados de eficacia en el
control del organismo objetivo y los agricultores y asesores no pueden tomar la mejor
decisión. Finalmente, en cuanto al tercer punto mencionado, debiera existir una mayor
fiscalización en la venta de pesticidas de tal forma de evitar que incluso, personas
iliteratas, puedan acceder libremente a estos productos como ocurre al día de hoy en el
comercio establecido. En algunos países, la venta de pesticidas requiere del diagnóstico
previo y recomendación de un especialista. En opinión del autor, la venta y uso de
plaguicidas de uso agrícola no pueden estar regulados por la libre competencia, debido a
la falta de transparencia en la información y a su impacto en la productividad y el medio
ambiente. Para concretar la propuesta que Chile se constituya en una potencia
agroalimentaria, se requiere, entre otras cosas, asignar mayores recursos y desarrollar
acciones destinadas a mejorar e implementar una normativa de registro, comercialización y
venta de plaguicidas en el país, más moderna, funcional y acorde con nuestros
compromisos como sociedad. Esa nueva normativa debe estar en sintonía con nuestra
decisión de integrar al país a las ligas mayores en materia económica, social y
productiva, pero sobre todo con la necesidad de cautelar nuestros propios recursos humanos
y naturales.

Actividad anti-fungica y anti-adhesiva por
extractos de plantas y bacterias nativas de chile contra Botrytis cinerea
Anti-fungi and anti-adhesive activity of native plants extracts and bacteria
from Chile against Botrytis cinerea
Razmilic, V.1; Zaldua, S.1; Sossa, K.1; Urrutia, H.1;
Becerra, J.2; Sanfuentes, E.1
1 Laboratorios de Patología Forestal/Microbiología Ambiental y Biopelículas,
Facultad de Ciencias Forestales y Centro de Biotecnología
2 Laboratorio de Química de Productos Naturales, Facultad de Ciencias
Naturales y Oceanógraficas Universidad de Concepción. e-mail: ksossa@udec.clesanfuen@udec.cl

Botrytis cinerea Pers. ex. Fr. es un hongo patógeno que ataca a una
gran variedad de hospederos, causando cuantiosas pérdidas en periodos de pre y
post-cosecha. Tradicionalmente, el control de B. cinerea se ha realizado usando
fungicidas, pero su constante utilización ha generado el surgimiento de poblaciones
resistentes del patógeno, llevando a la búsqueda de nuevas alternativas de control,
compatibles con el ambiente. En ese contexto, el objetivo de este estudio fue determinar
la actividad anti-fúngica y antiadherente de conidias de B. cinerea por extractos y
bacterianas aisladas de plantas nativas. Se probaron 33 extractos de plantas nativas y 25
cepas bacterianas que fueron ensayadas con B. cinerea en cultivos duales y en portaobjetos
con agar-agua, evaluándose la inhibición del crecimiento micelial y germinación
conidias del patógeno, respectivamente. Enbioensayos sobre pétalos de rosa se determinó
el efecto de extractos y bacterias en la adhesión débil y fuerte de las conidias del
patógeno, evaluadas a los 50 min y 5 h de incubación, respectivamente. El extracto de
Canelo y la bacteria HU-110 presentaron la mayor inhibición del crecimiento micelial. Los
extractos de Boldo, Canelo, Peumo y Radal, además de la bacteria HU-110, inhibieron
completamente la germinación de B. cinerea. La adhesión débil fue reducida entre 98-92%
por la aplicación de los extractos de Boldo, Peumo y Salvia negra, junto con las
bacterias HU-45 y HU-50. Los extractos más eficaces en reducir la adhesión fuerte fueron
Avellano, Boldo, y las bacterias HU-139 y HU-177, con niveles de inhibición entre 96-92%.
Entre los extractos y bacterias probados destacan algunos que tuvieron acción inhibitoria
sobre dos o más variables evaluadas. Estos resultados demostraron que los extractos de
plantas y cepas bacterianas nativas son eficaces para el control de B. cinerea en
condiciones controladas, y poseen un potencial como agentes de control en condiciones de
cultivo.

Evaluación de la eficacia de tres
formulaciones del fumigante MIDAS® en el control de hongos y nemátodos de suelo
Evaluation of the effect of three formulations of MIDAS® fumigant on the
control of fungus and nematodes in the soil
Sepúlveda R., Paulina1; Wong J., Wendy 2; Rebufel A., Patricia 1;
Soffia C., Verónica 3
1 Instituto de Investigaciones Agropecuarias, INIA La Platina, Santa Rosa
11.610 Santiago, Chile, e-mail: psepulve@inia.cl
2 e-mail: wwong261973@yahoo.com
3 Arysta Lifescience Chile S.A. El Rosal 4610, Huechuraba, Santiago, e-mail: veronica.soffia@arystalifescience.com

El fumigante liquido MIDAS® es una mezcla de los compuestos iodometano
y cloropicrina en diferentes proporciones y está recomendado para el control de hongos y
nemátodos de suelo, representando una alternativa al Bromuro de Metilo para ser utilizado
como fumigante de suelo en plantaciones frutales, invernaderos y plantaciones forestales.
En el campo experimental del Centro Regional de Investigación INIA La Platina, se
realizaron dos ensayo para evaluar la efectividad del fumigante MIDAS® en tres
formulaciones (50:50, 67:33 y 98:02) aplicado en diferentes dosis y con dos tipos de
plásticos (VIF y Estándar) para el control de hongos y nemátodos. Los hongos patógenos
utilizados para la evaluación fueron: Phytophthora cinnamomi, Fusarium oxysporum,
Rhizoctonia solani, Verticillium dahliae raza 2 y Pyrenochaeta lycopersici que fueron
multiplicados en avena e inoculados al suelo para contar con una infección homogénea de
los mismos. Para la evaluación de los nemátodos se consideró la infección natural de
suelo. Los resultados de los ensayos permitieron determinar un excelente efecto del
fumigante en las diferentes formulaciones utilizadas, especialmente cuando fue aplicado
con el plástico VIF que logró un control de los patógenos Phytophthora cinnamomi,
Rhizoctonia solani y Verticillium dahliae raza 2, en valores superiores a 90%, no
encontrándose diferencias estadísticamente significativas entre ellos, para el caso de
Fusarium oxysporum el control fue también mayor con el plástico VIF en ambos. El control
de Pyrenochaeta lycopersici fue comparativamente inferior que el de los otros hongos. La
evaluación del efecto del fumigante en el control de nemátodos también fue excelente,
logrando todas las formulaciones eliminar completamente las poblaciones de las especies
Meloidogyne sp., Pratylenchus sp, Criconemella sp, Hemicycliophora sp y Helicotylenchus
sp., presentes al inicio de los ensayos.

Teratosphaeria nubilosa, un patógeno
foliar cuarentenario de alto riesgo para las plantaciones de Eucalyptus globulus Labill.
en Chile

Teratosphaería nubilosa, a high-risk quarantine leaf pathogen for Eucalyptus globulus
Labill. plantations in Chile
Opazo, A.
Servicio Agrícola y Ganadero, División Protección Agrícola y Forestal. Casilla 4048,
Santiago, Chile, e-mail: alex.opazo@sag.gob.cl

Durante el año 2009 se publicaron los primeros reportes de la
presencia de Teratosphaería nubilosa (Cooke) Crous & Braun (=Mycosphaerella nubilosa)
en Sudamérica (Uruguay y Brasil). Esta especie está considerada, junto a T. cryptica,
como uno de los agentes responsables de los casos más severos de la enfermedad, que
afecta al follaje de los eucaliptos jóvenes, denominada «Mycosphaerella Leaf Disease»
(MLD) o «Mycosphaerella Leaf Blotch» (MLB). Esta es la enfermedad foliar más importante
para las especies de Eucalyptus que crecen en regiones templadas de todo el mundo y
Eucalyptus globulus es la especie más susceptible, por lo que algunos países en el
pasado han abandonado su cultivo por los efectos de la enfermedad. Debido a estos
antecedentes el Servicio Agrícola y Ganadera (SAG) realizó el respectivo Análisis de
Riesgo de Plagas (ARP) para Plagas Cuarentenarias según las directrices de la Norma
Internacional sobre Medidas Fitosanitarias (NIMF N° 11) de la Convención Internacional
de Protección Fitosanitaria (CIPF). En el ARP se evaluaron las evidencias biológicas u
otras evidencias científicas y económicas para determinar si este organismo es una
plaga, si debería ser reglamentado, y la intensidad de cualesquiera medidas
fitosanitarias que hayan de adoptarse contra él. El ARP de T. nubilosa mostró que la
plaga tiene potencial de introducción y dispersión en Chile y potencial económico y
ambiental para los eucaliptos que crecen en el país, especialmente E. globulus con
plantaciones muy importantes para la industria forestal del país, por lo que el ingreso
de T. nubilosa significaría un impacto negativo para el sector forestal. En base a los
resultados del ARP se concluye que T. nubilosa, plaga ausente en Chile, califica como
Plaga Cuarentenaria por lo que deben establecerse medidas fitosanitarias para las plantas
y productos que pueden ser vía de ingreso de la plaga al país.

Fusarium circinatum: control oficial en
chile y efecto de las medidas fitosanitarias
Fusarium circinatum: Official control in Chile and phytosanitary measure
effect
Murillo, M.
Servicio Agrícola y Ganadero, División Protección Agrícola y Forestal, SAG. Casilla
4048, Santiago, Chile, e-mail: mariaeugenia.murillo@sag.gob.cl

Durante el año 2001 fue detectado por primera vez en Chile el hongo
Fusarium circinatum Nirenberg & O2 Donnell en setos (plantas madres) de tres viveros
de Pinus radiata en la Región del Bio Bio, en las Comunas de Coronel, Yumbel y Bulnes. A
través de una denuncia fitosanitaria, el SAG realizó la verificación de la presencia en
el país de esta especie cuarentenaria, agente causal de la enfermedad conocida como
cancro resinoso de los pinos. El Servicio Agrícola y Ganadero implemento un Programa de
Control Oficial de Fusarium circinatum el cual contempla la vigilancia nacional a los
viveros y plantaciones de Pinus spp. y Pseudotsuga spp. en las áreas donde se encuentran
estos hospedantes; asimismo, se dicta la Resolución N° 1.742 de 2003 que declara el
control oficial de la plaga, estableciéndose las respectivas medidas fitosanitarias
mediante posteriores Resoluciones. A través de las acciones de vigilancia fitosanitaria e
inspección a los viveros de Pinus spp. y Pseudotsuga spp. realizadas entre las temporadas
2002 al 2010 en el país, se ha logrado establecer que la presencia del patógeno se
encuentra restringida a algunos viveros de pino en las Regiones de O’Higgins, Maule, Bio
Bio, La Araucanía y Los Ríos. Sin embargo, la correcta aplicación de las medidas
fitosanitarias en los viveros de P. radiata bajo control oficial han permitido disminuir
la incidencia del hongo, lo que se refleja en el hecho que entre los años 2008 a 2010 se
ha reducido de un 2% a un 0.6% las plantas eliminadas en los viveros bajo control oficial
por encontrarse positivas a la plaga. En este escenario, las regulaciones fitosanitarias
de la normativa vigente han contribuido a evitar la dispersión de F. circinatum hacia las
plantaciones forestales, no presentándose en Chile el síntoma de Pitch canker,
manteniéndose circunscrita la plaga sólo a algunos viveros.

Resistencia relativa de cultivares
comerciales de papa al tizón tardío causado por Pythophthora infestans en Chile
Relative resistance of commercial potato varieties to late blight, caused by
Pythophthom infestans in Chile
Acuña, Ivette; Inostroza, Juan; Mancilla, Sandra; Vargas, Mincy; Uribe, Marcos
Instituto de Investigaciones Agropecuarias INIA Remehue, Casilla 24-O, Osorno, Región de
Los Lagos, Chile, Fono: 56-64-450420, Fax: 56-63-237746. e-mail: iacuna@inia.cl

El tizón tardío de la papa es la enfermedad más importante de este
cultivo en Chile, causando pérdidas de más del 50% de la producción y con incidencia de
hasta un 100% en temporadas de condiciones ambientales favorables para la enfermedad. La
resistencia varietal es un factor importante en su manejo, determinando muchas veces la
pérdida o no del cultivo. Desde el año 2003 se han realizado evaluaciones de los
principales cultivares comerciales con el objetivo de determinar la resistencia relativa
al tizón tardío de la papa para lo cual se establecieron parcelas experimentales en el
Centro Regional Tranapuente en La Araucanía y en INIA Remehue en la Región de Los Lagos,
durante las últimas 7 temporadas. Las parcelas se establecieron en un diseño de bloques
completos al azar, bajo condiciones de riego por aspersión e inoculo natural. Las plantas
se evaluaron semanalmente para el porcentaje de follaje dañado, posteriormente se
calculó el área bajo la curva de progreso de la enfermedad (ABCPE) y el área relativa
(ARBCPE). Se estimó el comportamiento promedio de los cultivares en las temporadas de
evaluación. La severidad del daño de tizón tardío varió según las condiciones
ambientales predisponentes para la enfermedad en cada temporada y zona. Sin embargo, se
detectó diferencias significativas de los cultivares de papa en su susceptibilidad, aún
cuando todos los cultivares presentaron presencia de la enfermedad. Los cultivares
Amadeus, Sinfonía, Romano y Patagonia muestras un menor nivel de daño respecto al resto
de los cultivares evaluados, mientras Yagana, Shepody y Atlantic fueron las que
presentaron los mayores daños. Bajo un sistema de manejo integrado, es deseable la
utilización de cultivares resistentes a enfermedades, lo cual puede significar
disminución de los costos y las pérdidas de producción. Sin embargo, estos cultivares
tienen que cumplir con los requerimientos del mercado en cuanto a calidad y presentación.
De tal modo, es importante que los programas de mejoramiento continúen en la búsqueda de
materiales con resistencia durable y aptos para el mercado.

Poblaciones epífitas de Geotrichum
candidum en postcosecha de duraznos
Epiphytic population of Geotrichum candidum in stone fruit postharvest
Castelletip, Elena; Henríquez S., José Luis; Alarcón C., Paula
Depto. Sanidad Vegetal, Facultad de Ciencias Agronómicas, Universidad de Chile, Av. Santa
Rosa 11315, La Pintana, Santiago, Chile. e-mail: jhenriqu@uchile.cl

La pudrición acida de los carozos causada por Geotrichum candidum
Link., se convirtió en una importante patología de poscosecha a contar de la temporada
2003-2004. Los síntomas de la pudrición sólo se observan en los mercados de destino y
la enfermedad no se reproduce fácilmente siendo difícil de estudiar. El objetivo de este
trabajo fue validar un sistema de detección de poblaciones epífitas del patógeno sobre
la fruta. La metodología consiste en congelar los frutos para permitir el desarrollo
saprofítico de G. candidum sobre los tejidos muertos, sin embargo, el desarrollo de otros
saprofitos dificultan el recuento. Se estableció un primer ensayo en que duraznos Zee
Lady fueron tratados con Dicloran (1,5 g/L) en mezcla con pyrimethanil, iprodione o
benomilo (todos algo ml/L), para inhibir a los saprofitos indeseados. Posteriormente, los
frutos fueron congelados a -17 ÚC y luego almacenados en cámaras húmedas a temperatura
ambiente por cuatro días. La metodología se utilizó en poscosecha de duraznos Sweet
September provenientes de dos huertos con historial y dos sin historial de la enfermedad.
Se muestreó a la llegada a la planta de embalaje, a salida del hidroenfriado y en la caja
embalada. Las mezclas de Dicloran con pyrimethanil, benomilo e iprodione inhibieron el
desarrollo de los saprofitos indeseados permitiendo detectar las poblaciones epífitas de
G. candidum sobre la fruta. La mejor combinación fue Dicloran más pyrimethanil, que
permitió un mayor desarrollo del patógeno en cada fruto. Un 71,4% de la fruta
proveniente de huertos con historial de pudrición acida presentó poblaciones epífitas
del patógeno a la llegada a la planta embaladora, mientras que éstas se presentaron
sólo en un 23,7% de los frutos provenientes de huertos sin historial. Las poblaciones
epífitas no se incrementaron luego del proceso de hidroenfriado, pero alcanzaron un 96,6
y un 98,4% en la caja embalada para la fruta de huertos con y sin historial de la
enfermedad.

Primera detección de la fase sexual de Erysiphe
convolvuli
en Chile
First report of the sexual state of Erysiphe convolvuli in Chile
Henríquez S., José Luis; Alarcón C., Paula; Sandoval L., Pablo
Universidad de Chile, Facultad de Ciencias Agronómicas, Depto. Sanidad Vegetal. Av. Santa
Rosa #11.315, La Pintana, Santiago, Chile, e-mail: paulaalarcon@u.uchile.cl , jhenriqu@uchile.cl

La correhuela (Convolvulus arvensis L.) es una de las malezas más
frecuentes en los campos chilenos, es de difícil control y habitualmente un problema para
los agricultores. Todos los años esta maleza manifiesta los signos característicos de un
oidio sobre su follaje, presentándose desde mediados de primavera en adelante. En marzo
2010 se encontró por primera vez una muestra de correhuela con signos de oidio y con
desarrollo de los cleistotecios del patógeno. La primera muestra fue hallada en Calle
Larga, comuna de Los Andes, Región de Aconcagua. Posteriormente se realizaron colectas de
material con cleistotecios en la Región Metropolitana (La Pintana, Melipilla), Región de
Coquimbo (Ovalle) y Región del Libertador Bernardo O’Higgins (Malloa). Las muestras
presentaban cleistotecios inmaduros de coloración amarilla y rojiza y cleistotecios
maduros de color negro, dentro de los cuales se encontraron ascos maduros con ascosporas.
Las características morfológicas de las diferentes estructuras permitieron identificar
al oidio como Erysiphe convolvuli DC. variedad convolvuli. Este patógeno, a pesar de ser
muy común, no había sido reportado anteriormente en Chile y ésta corresponde a la
primera documentación de su fase sexual en el país.

Prospección de las enfermedades fungosas
y bacterianas del olivo en Chile
Survey of olive fungal and bacterial diseases in Chile
Henríquez S., José Luis; Alarcón C., Paula; Montealegre A., Jaime
Universidad de Chile, Facultad de Ciencias Agronómicas, Depto. Sanidad Vegetal. Av. Santa
Rosa #11.315, La Pintana, Santiago, Chile, e-mail: paulaalarcon@u.uchile.cl, jhenriqu@uchile.cl

Desde octubre 2008 a octubre 2010 se ha realizado una prospección de
enfermedades fungosas y bacterianas que afectan al cultivo del olivo entre el Valle del
Copiapó, Región de Atacama y hasta la Región del Maule. Las muestras sintomáticas
fueron trasladadas desde terreno hasta el laboratorio de Fitopatología de Poscosecha de
Frutas de la Universidad de Chile, donde se realizaron los aislamientos e identificaciones
de los agentes patógenos encontrados. Las pruebas de patogenicidad se realizaron en
invernadero sobre plantas embolsadas de un año. Las principales enfermedades encontradas
corresponden al repilo causado por Spilocaea oleagina Hughes, la verticilosis causada por
Verticillium spp. y el emplomado causado por Pseudocercospora cercosporioides (Sacc.)
Braun. Se determina por primera vez a nivel nacional y mundial la muerte de ramas y
ramillas causada por Botrytis cinerea Pers ex F. Además, se encontró a Schyzophyllum
commune Fr. asociado a cancros en el tronco y ramas de olivos de la variedad Frantoio y a
Sclerotinia sderotiorum (Lib.) de Bary asociado a muerte de ramas y ramillas. Por otra
parte, se encontraron árboles del cultivar Kalamata con síntomas de agallas de la corona
desde donde no se pudo comprobar la ocurrencia de Agrobacterium.

Repilo del olivo: dinámica de
esporulacion de Spilocaea oleagina en dos zonas productivas y susceptibilidad varietal
Olive leaf spot: Sporulation dynamics of Spilocaea oleagina in two growing
áreas and cultivar susceptibility
Alarcón C., Paula; Paez W., Paula; Henríquez S., José Luis
Universidad de Chile, Facultad de Ciencias Agronómicas, Depto. Sanidad Vegetal. Av. Santa
Rosa #11.315, La Pintana, Santiago, Chile, e-mail: paulaalarcon@u.uchile.cl ; jhenriqu@uchile.cl

El repilo del olivo causado por Spilocaea oleagina Hughes, es la
principal enfermedad del cultivo en Chile y obliga a realizar aplicaciones de fungicidas
para su control. La epidemiología de la enfermedad es poco conocida haciendo que el
control químico no sea siempre realizado oportunamente. El objetivo de este trabajo fue
conocer la dinámica de esporulación del patógeno en un huerto de la variedad Sevillana
localizado en el valle del Huasco y otro de la variedad Arbequina en Melipilla. Se
colectaron quincenalmente, desde octubre 2008 hasta Julio 2010 hojas con síntomas de la
enfermedad (manchas de repilo). En cada muestreo se lavaron 20 manchas por huerto,
determinándose el número de conidias presentes en 1 cm de diámetro de cada mancha. En
un estudio en paralelo, se inoculó en el huerto ramillas de las variedades Arbosana,
Bossana, Coratina, Frantoio, Leccino y Koroneiki con una suspensión de IxlO5 conidia/ mL
de S. oleagina en agosto 2009 y abril 2010, en un huerto ubicado en Lumbreras, comuna de
Melipilla, determinándose la incidencia (porcentaje de ramillas infectadas) y severidad
(porcentaje de hojas infectadas por ramilla) de la enfermedad. La esporulación del
patógeno en el huerto de la Región de Atacama se produjo durante todo el período de
estudio, con máximos en los meses otoñales y primaverales. La esporulación del
patógeno en el huerto de la Región Metropolitana en el primer año de estudio se
verificó entre octubre y enero, momento en que no se encuentran más hojas con síntomas
en los árboles producto de la defoliación inducida por la enfermedad. La esporulación
se reanudó en septiembre 2009 reduciéndose la producción de conidia hacia el verano,
con un repunte en el otoño hasta fines de abril donde nuevamente se produce defoliación
de las hojas afectadas. Las variedades Bossana y Coratina resultaron susceptibles,
Arbosana y Frantoio presentaron susceptibilidad intermedia mientras que Koroneiki y
Leccino fueron resistentes. La inoculación de otoño indujo mayores niveles de
enfermedad.

Efecto de virus en el rendimiento de
tomates en el Valle de Azapa, Chile
Virus effect in yield production in tomatoes on the Azapa Valley, Chile
Sepulveda R., Paulina 1; Rojas B., Claudia 2; Rosales V., Marlene 1;
Sepulveda Ch., Germán 3
1 Instituto de Investigaciones Agropecuarias, INIA La Platina, Santa Rosa
11.610
Santiago, Chile, e-mail: psepulve@inia.cl
2Centro de Investigación Especializado en Agricultura del Desierto y Altiplano
(CIÉ) INIA URURI Magallanes 1865 Arica. e-mail: crojasb@inia.cl
3 Universidad de Tarapacá, Facultad de Ciencias Agronómicas, Valle de Azapa,
Km. 12 – e-mail: gsepulve@uta.cl

El tomate es la principal hortaliza cultivada durante todo el año en
el valle de Azapa, abasteciendo así a los consumidores de la zona central del país. Este
cultivo se ha visto severamente afectado por enfermedades causadas por virus y diseminadas
por insectos vectores como mosquitas blancas y áfidos, que disminuyen la producción y
afectan al cultivo en diferentes estados de desarrollo. Con el objetivo de cuantificar el
efecto que los virus causan en el rendimiento, se realizó un estudio en un cultivo de
tomate variedad Naomi en el campo experimental de la Facultad de Ciencias Agronómicas de
la Universidad de Tarapacá en el Valle de Azapa, donde se evaluó el efecto de manto
térmico como barrera física contra insectos vectores, colocado sobre las plantas al
momento del trasplante y por un período de 20 días (previo al levante de las plantas o
conducción definitiva) y como testigo se dejaron plantas sin proteger. Cada tratamiento
estuvo conformado por una hilera de 25 m de largo, con 90 plantas aproximadamente. Para
determinar el momento de infección de las plantas con virus se realizó un monitoreo
semanal de modo de determinar la aparición de síntomas de virus en las plantas,
marcándolas y registrando la fecha en que ello ocurría. Paralelamente se realizó un
análisis en laboratorio para determinar cuál virus estaba presente en las plantas. El
efecto de los tratamientos se evaluó antes y al momento de cosecha determinado diversos
parámetros de rendimiento. Los resultados del estudio reflejaron que el uso del manto
térmico permitió reducir la incidencia de virus y retrasar la aparición de síntomas y
con ello un aumento en rendimiento del orden de 33%. Cuando las plantas se afectaron por
virus antes de los 20 días el efecto en rendimiento fue de 85% a 90%. Los virus presentes
en el estudio fueron el Virus del estriado amarillo de las venas del tomate (ToYVSV) y
Virus del mosaico peruano del tomate (PToMV).

Efecto de enmiendas orgánicas sobre el
desarrollo de la pudrición carbonosa de la raíz en Pinus radiata
Effect of organic amendments on development of the charcoal rot root in
Pinus mdiata
Gacitua, Sandra 1; Rubilar, Rafael 2; Shuijin Hu 3;
Valdebenito, Daniela 1; Sanfuentes, Eugenio 1
1 Laboratorio de Patología Forestal y
2 Laboratorio de Nutrición y Productividad de Sitios. Universidad de
Concepción, Chile
3 Laboratorio de Ecología de suelo, Universidad de Carolina del Norte, USA.
e-mail: esanfuen@udec.cl

La pudrición carbonosa de la raíz, causada por el hongo Macrophomina
phaseolina, ocasiona significativas pérdidas en viveros de Pinus radiata en Chile.
Actualmente, no existen fungicidas eficaces contra M. phaseolina y sólo se controla
mediante bromuro de metilo. Esto ha derivado en la búsqueda de nuevas alternativas de
control como la solarización y control biológico. En este contexto, el objetivo de la
investigación fue determinar el efecto de enmiendas orgánicas en la reducción de la
densidad de inoculo de M. phaseolina y de la enfermedad en plántulas de P radiata. El
ensayo se realizó en invernadero y se utilizó suelo arenoso infestado naturalmente con
el patógeno (10 ufc/g suelo) y que fue infestado con microesclerocios del patógeno a
razón de 250 ufc/g suelo. Los tratamientos aplicados consistieron en abono verde de
cultivos de alfalfa (TI), avena (T2), trigo (T3), junto con compost de corteza de pino
(T4), y estiércol de pollo (T5). El tratamiento control fue suelo natural (T6). Las
enmiendas fueron incorporadas 3% p/p. La densidad de inoculo de M.phaseolina fue estimada
mensualmente mediante medio selectivo DOPCNB. Después de 11 meses de realizada la
incorporación de las enmiendas se procedió a la siembra de P. radiata. Después de un
mes de la incorporación, todas las enmiendas redujeron la densidad de inoculo de M.
phaseolina en el suelo, siendo mayor este efecto al final del ensayo mediante la
aplicación de estiércol de pollo, reduciendo la población de M. phaseolina a 143 ufc/g
suelo. Todas las enmiendas orgánicas tuvieron un efecto de control de la enfermedad,
reduciendo la mortalidad de 29% (control) a 7% mediante la incorporación de trigo.
Actualmente, estas enmiendas están siendo probadas en ensayos de vivero.

Evaluación in vitro de extractos
producidos por fermentaciones del hongo chileno Cordyceps sp. contra hongos fitopatógenos
In vitro evaluation of extracts produced by fermentation of the Chilean
fungus Cordyceps sp nov. against phytopathogenic fungi
Espinoza, José Flavio 1; Aqueveque, Pedro 1,3; Palfner, Gotz 2;
Becerra, José 1; Silva, Mario 1
1 Laboratorio Química de Productos Naturales. Departamento de Botánica.
Facultad de Ciencias Naturales y Oceanógraficas. Universidad de Concepción. e-mail: josespinoza@udec.cl
2 Laboratorio de Micología y Micorrizas. Departamento de Botánica. Facultad
de Ciencias Naturales y Oceanógraficas. Universidad de Concepción
3 Laboratorio de Microbiología. Departamento de Agroindustria. Facultad de
Ingeniería Agrícola. Universidad de Concepción. Chillan.

La búsqueda de moléculas activas desde hongos ha sido el principal
objetivo del Laboratorio de Fitoquímica de la Universidad de Concepción. En esta
oportunidad informamos los resultados obtenidos del estudio realizado con el hongo
endémico Cordyceps sp. Una vez que el hongo fue colectado, cultivos miceliales puros se
obtuvieron a partir de tejidos fungicos en medio PDA. Posteriormente, se inocularon medios
líquidos estériles con trozos de micelio y cultivados en agitación (120 rpm, 22 °C)
hasta observar un abundante micelio y el contenido de glucosa tendió a cero. El cultivo
fue filtrado obteniéndose dos fases: una líquida y otra sólida. La fase liquida fue
extraída con acetato de etilo y la fase sólida con metanol:acetona (1:1), obteniéndose
así sus respectivos extractos. Ambos extractos fueron evaluados contra los hongos
fitopatógenos, tales como Ceratocystis pilifera, Botrytis cinerea y Trichoderma sp.
utilizando para ello el método de difusión en agar, testeando concentraciones de 100 ig
de extracto total. Sólo el extracto de la fase liquida (medio) mostró una actividad
antifúngica generando halos de inhibición contra C. pilifera y B. cinerea. En una
segunda etapa, se cultivó el hongo en diferentes medios, con el objetivo de optimizar la
actividad antifúngica observada, los medios utilizados fueron YMG, YMG-1, PG y
Czapek-Dox. Se obtuvieron extractos sólo de la fase líquida y ensayados contra los
mismos fitopatógenos. Los resultados permitieron observar que la actividad antifúngica
del extracto proveniente del medio YMG mostró la mayor actividad inhibitoria, comparado
con el resto de los otros extractos. Este extracto mostró una fuerte inhibición contra
C. pilifera y B. cinerea a una concentración de 100 ig. Actualmente, se analizan los
extractos mediante cromatografía en placa fina, HPLC y CG-MASA para conocer la
composición de ellos, y se escala a mayor volumen de cultivo para aislar e identificar
las moléculas responsables de la actividad antifúngica observada. Se discutirán estos
resultados.
Agradecimientos: Anillo-Conicyt ACT-38, IFS Nfi F/3972-1, Proyecto Semilla Patagonia N°
2005.111.046-lsp.

Phytophthora kernoviaeplaga
cuarentenaria potencial para Chile
Phytophthom kernoviae: A potential quarantine pest for Chile
Niccoli, C.; Morales, A.; Opazo, A.
Servicio Agrícola y Ganadero, SAG. Casilla 4048, Santiago, Chile, e-mail: cecilia.niccoli@sag.gob.cl

El Servicio Agrícola y Ganadero (SAG), dentro de sus actividades,
realiza en forma permanente una búsqueda y revisión de todas aquellas plagas no
presentes en Chile y que pueden ser potencialmente dañinas para los recursos
silvoagrícolas del país. En este contexto, se encontró que en Reino Unido, se presenta
una enfermedad que afecta a especies forestales y ornamentales, ocasionada por un
patógeno descrito recientemente como Phytophthora kernoviae Brasier et al. Phytophthora
kernoviae (Cromista: Oomycetes) es un patógeno ausente en Chile, de comportamiento
similar a la plaga cuarentenaria Phytophthora ramorum. Posee un amplio rango de
hospedantes entre los que destacan Rhododendron spp., Fagus sylvatica, Hederá helix, Ilex
aquifolium, Liriodendron tulipifera, Magnolia spp., Michelia doltsopa, Pierisformosa,
Prunus laurocerasus, Quercus ilex, Quercus robur y Vaccinium myrtillus. Es importante
señalar que en Reino Unido, algunas especies nativas de Chile como Drimys winteri,
Gevuina avellana y Podocarpus salignus también han sido afectadas. Los síntomas
descritos para P kernoviae, varían dependiendo del hospedante e incluyen necrosis foliar,
muerte regresiva de brotes, cancros y lesiones con exudación gomosa, anillado del tronco
y muerte de plantas o de árboles. En Chile, existen hospedantes susceptibles y zonas con
condiciones climáticas similares a las localidades donde se presenta este fitopatógeno,
por lo que su ingreso al país podría afectar a especies exóticas e impactar
negativamente a los bosques nativos. Dado lo anterior, se concluye que P. kernoviae puede
comportarse como plaga en Chile, por lo que es necesario evaluar si califica como plaga
cuarentenaria mediante un Análisis de Riesgo de Plagas.

Evaluación de la persistencia de
diferentes formulaciones de bactericidas cúpricos para el control de Pseudomonas
syringae pv syringae
en cerezos
Evaluation of the persistence of different copper bactericides
formulations to control Pseudomonas syringae pv. syringae on sweet cherry
Montealegre A., Jaime1; Herrera C., Rodrigo1; Rubí, Osvaldo2;
Morales F., Francisca1; Ramírez, Mauricio1
1 Universidad de Chile, Facultad Ciencias Agronómicas, Sta. Rosa 11.315, La
Pintana. Casilla 1004, Santiago, e-mail: rherrera@uchile.cl

2 Nu Farm Chile Ltda.

Los bactericidas cúpricos se han utilizado ampliamente en el control
de las principales bacteriosis que afectan frutales en Chile, especialmente Pseudomonas
syríngae pv. syringae, agente causal del cáncer bacterial en cerezos. Los tratamientos
son esencialmente preventivos, por lo mismo, es importante considerar el efecto de las
condiciones climáticas en la eficacia y persistencia de las diferentes formulaciones
existentes en el mercado. Se realizó un estudio comparando distintas formulaciones de
cobre a base de Hidróxido de Cu, Oxicloruro de Cu y Oxido Cuproso, con el objetivo de
determinar (i) la persistencia en campo y (ii) la solubilidad de cada uno a diferentes pH,
determinándose el Cu disponible en suspensión. Para evaluar la persistencia, se
realizaron aplicaciones de Hidróxido de cobre (Champ DP) a una dosis de 200 y 300 g/hL;
Oxido Cuproso a 170 g/hL y Oxiclururo de cobre a 400 g/hL. Se utilizaron 5 plantas de
cerezo cv. Brooks injertadas sobre patrón MaxMa. Los tratamientos fueron aplicados
mediante bomba de espalda con mojamiento de 2.000 L/ha. La persistencia se determinó
simulando 4 lluvias de 5 mm, a las O, 24, 96 y 144 horas post aplicación y tomando
muestras de ramillas después de cada lluvia, determinando el Cu total remanente. La
evaluación de la solubilidad de Cu, se determinó en agua destilada estéril midiendo el
pH inicial a las dosis mencionadas y posteriormente modificándose el pH mediante la
adición de ácido fosfórico. El Hidróxido de Cu (Champ DP) demostró tener una mayor
persistencia que el resto de las formulaciones. Al evaluar la solubilidad según pH, el
Hidróxido de Cu, demostró tener mayor disponibilidad de Cu, en todos los pH medidos.

Efecto de nuevos biocontroladores sobre
pudriciones de postcosecha en manzanas
Effect of new microorganisms on apple postharvest diseases
Radrigán N., Catalina1; Bosadilla, L.2; Donoso C., E.1,2;
Vásquez, Y.1
1 Bio Insumos Nativa Ltda. Chacra El Peral Lote A-l, Casilla 16-D, San Javier.
e-mail: edonoso@bionativa.cl
2 Universidad Católica del Maule, Escuela de Agronomía, Km 6, Camino los
Niches, Curicó

Las pudriciones de postcosecha son una de las mayores causas de rechazo
de fruta de exportación en destino. Tal situación, ha implicado la búsqueda de nuevas
alternativas de control, tales como el uso de biocontroladores a base de cepas de hongos
nativos, los cuales han sido aislados desde zonas frías (extremófilos) con el fin que
logren actuar a bajas temperaturas durante la post cosecha. Las cepas recolectadas fueron
seleccionadas mediante pruebas de competencia in vitro, frente a los principales agentes
fitopatógenos de postcosecha de manzanas, Botrytis cinerea, Penicillium expansum,
Neofabrea alba, Botryosphaeria sp., y Colletotrichum sp. Luego, se realizaron pruebas in
vivo, aplicando los microorganismos vía aspersión e inmersión e inoculando fruta con
los patógenos anteriores, evaluando dosis (109-106 UFC/mL) y mezclas de las mejores
cepas. Posteriormente, se han efectuado pruebas bajo condiciones comerciales de manzanas
var. Fuji, Pink Lady y Scarlett. En el caso de Fuji y Pink Lady, los frutos fueron
sumergidos en suspensiones acuosas de hongos extremófilos (por determinar), cuya
concentración corresponde a 1 x 108 ufc/mL, donde se evaluaron seis tratamientos: TO:
control químico (i.a. pyrimethanil) con dosis de 3cc/L; TI: S.L. Maule; T2: Queñes; T3:
Macerado; T4: C.l y T5: 4 Sillahur, éstos últimos en misma dosis que el control
químico. El diseño es completamente al azar con cuatro repeticiones de 18 frutos cada
una, donde se evaluó el tamaño de lesiones cada 30 días por un período de 5 meses de
guarda en frío, donde TI, T2 y T5 lograron igualar al químico, en variedad Fuji y en
Pink Lady, la cepa C. 1 resultó ser estadísticamente igual que el manejo químico, en
cuanto a un índice de lesión, asociado al tamaño promedio de lesiones de cada
tratamiento por el número de lesiones (Tukey, p< 0,05). En el caso de Scarlett, los
biocontroladores se aplicaron preventivamente, 24 horas antes de que la fruta fuera
inoculada con B. cinerea y P. expansum y se guardó a 0°C. La evaluación se realizó a
los 30 y 45 días de guarda, encontrándose diferencias significativas con respecto al
testigo absoluto y productos químicos comerciales, en relación a incidencia de
pudriciones (p<0,05), tanto en microorganismos solos y mezclas de éstos, corroborando
la efectividad del uso de hongos nativos para el manejo de pudriciones en frío.

Cepas nativas de Trichoderma spp. y
su efecto sobre pudriciones causadas por Fusarium oxysporum en cebollas
Native strains of Trichoderma spp. and its effect on rot disease caused by
Fusaríum oxysporum in onions
Ortiz T., César1; Donoso C., E.2; Barra, D.2
1 Bio Insumes Nativa Ltda. Chacra El Peral Lote A-l, Casilla 16-D, San Javier.
e-mail: laboratorio@bionativa.cl
2 Universidad Católica del Maule, Escuela de Agronomía, Km 6 Camino los
Niches, Curicó. e-mail: edonoso@ucm.cl

La fusariosis que presenta la cebolla, tanto en campo como en guarda,
ha aumentado progresivamente su incidencia, provocando la disminución de rendimientos y
contaminación de predios, debido a la alta capacidad de dispersión del hongo Fusaríum
spp. Durante las temporadas 2008-2010, se realizaron dos ensayos, uno en el Campus San
Isidro de la Universidad Católica del Maule, Los Niches, Región del Maule, donde se
evaluó el efecto de aplicaciones de cepas nativas de Trichoderma harzianum por única vez
como inmersión de raíces al transplante (P.C. Trichonativa®), la cal, se aplicó en la
preparación de suelo de las hileras de plantación. El suelo para este ensayo fue
inoculado artificialmente con el patógeno, esto en un diseño completamente al azar con
arreglo factorial (2×2), donde los factores fueron tratamientos (con y sin Trichoderma) y
presencia de cal (con y sin). Y un ensayo en suelo con historial de la enfermedad, ubicado
en la localidad de Auquinco, Región de O’higgins, donde se evaluó el efecto de 2
aplicaciones de Trichonativa®, una como inmersión de raíces y la otra 15 días después
de transplante, esto bajo un diseño completamente al azar con arreglo factorial, donde
los factores fueron variedades de cebolla y las aplicaciones de Trichoderma. En ambos
experimentos, se evaluaron incidencia de pudriciones y parámetros de vigor. En el primer
ensayo, se observó una disminución significativa de la incidencia, en los tratamientos
con Trichoderma (P< 0,01) y un incremento de rendimiento en los tratamientos con cal y
su interacción (P< 0,05). En el ensayo de campo, se observó una disminución
significativa en la incidencia de la enfermedad en las plantas tratadas con Trichoderma y
un efecto en algunos parámetros de vigor.

Efecto de NACILLUS® sobre tizón
bacteriano (Xanthomonas corylina) en avelllano europeo (Corylus avellana L.)
Effect of Nacillus ® on Bacterial blight (Xanthomonas corylina) on
Hazelnut tree(Corylus avellana L.)
Donoso C., Eduardo1,2; Ortiz, C.1; Mono Acá, C.2;
Hettich, W.1; Radrigán, C.1
1 Bio Insumes Nativa Ltda. Chacra El Peral Lote A-l, Casilla 16-D, San Javier.
e-mail: edonoso@bionativa.cl
2 Universidad Católica del Maule, Escuela de Agronomía, Km 6, Camino los
Niches, Curicó.

Durante las últimas tres temporadas se ha evaluado el bactericida
biológico Nacillus® en un huerto de avellano europeo variedad Barcelona, ubicado en
Cuneo, Región de la Araucanía, para determinar su efecto sobre Tizón bacteriano del
avellano (X. corylina). Los tratamientos consistieron en TI: manejo tradicional del huerto
(cobres y antibióticos); T2: manejo huerto más una aplicación de Nacillus® y T3:
Manejo huerto más dos aplicaciones de Nacillus® y T4: manejo huerto más tres
aplicaciones de Nacillus®. Las aplicaciones del bactericida biológico se realizaron en
dos dosis: 150 y 200g/L según estado fenológico de los árboles. El diseño del
experimento fue completamente al azar con 4 tratamientos y 7 réplicas cada una. La
evaluación se realizó dos meses antes de cosecha y en cosecha (85% de frutos en suelo).
En la temporada 2009, se evaluó el número de brotes quebrados a causa del patógeno,
siendo los T2 y T4 estadísticamente menores que el control (TI); en cuanto a rendimiento,
con una y tres aplicaciones de Nacillus® se observó un mayor rendimiento, el cual fue
estadísticamente distinto del manejo sólo químico. En esta última temporada 2010, se
ajustaron los tratamientos a aplicaciones de óxido cuproso (2 g/L) y éste más dos
aplicaciones de Nacillus® en brotación y floración (l,5g/L). Al evaluar la incidencia
de brotes quebrados a causa de Xanthomonas, el tratamiento con Nacillus® fue
estadísticamente diferente del manejo químico, disminuyendo a la mitad el número de
brotes dañados. A cosecha, no hubo diferencias entre tratamientos. Luego de tres años de
ensayos, se concluye que Nacillus® tuvo buen control sobre el Tizón bacteriano en
avellano europeo, cuando éste se aplica en los estados fenológicos más sensibles al
ataque de la bacteria.

Efecto de fertilización nitrogenada y la
exposición geográfica sobre la incidencia de cáncer bacterial (Pseudomonas syríngae
pv. syringae) en cerezos
Effect of nitrogen fertilization and geographical exposition on Bacterial
Canker (Pseudomonas syringae pv. syringae) in cherry trees
Donoso C, Eduardo1,2; Hernández G., H.2; Radrigán N., C.1;
Ortiz T., C.1.
1 Bio Insumes Nativa Ltda. Chacra El Peral Lote A-l, Casilla 16-D, San Javier.
e-mail: edonoso@bionativa.cl
2 Universidad Católica del Maule, Escuela de Agronomía, Km 6 Camino los
Niches, Curicó.

El Cáncer bacterial causado por la bacteria Pseudomonas syríngae pv.
syríngae se ha convertido en uno de los mayores problemas fitosanitarios que atacan a los
cerezos, Prunus avium L., repercutiendo en menores rendimientos y debilitamiento de
plantas, mermando su potencial productivo. Dentro de los manejos agronómicos, tales como,
establecimiento del huerto, poda, riego, fertilización entre otros, se ha observado una
mayor incidencia de la enfermedad en yemas ubicadas al lado norte respecto a las del lado
sur del árbol. Durante las temporadas 2008/2009/2010, se ha realizado un seguimiento a la
temperatura interna y externa de yemas de cerezos de dos huertos ubicados en la séptima
región, con alta incidencia de Cáncer bacterial, evaluando en cada estación, la
temperatura de yemas del lado norte y sur, así como también el número de dardos
atizonados y rendimiento según exposición. En cada temporada, se observó que las yemas
ubicadas al lado norte del árbol, presentaron mayor incidencia de la enfermedad y por
ende, un menor rendimiento al momento de la cosecha que las yemas ubicadas al lado sur,
las cuales a su vez, presentaban siempre menor temperatura que las del sector norte. En
cuanto a la fertilización nitrogenada, se evaluó el efecto de la aplicación de urea
sobre la incidencia de Cáncer bacterial, determinándose el nivel de incidencia de yemas
atizonadas, vigor y porcentaje de brotación con dosis de O, 10, 15 y 20 g urea/ planta,
siendo lOg urea la dosis recomendada. Las plantas se colocaron en macetas y fueron
inoculadas con la bacteria. Se realizaron dos aplicaciones de urea (Julio y Agosto 2009) y
en floración se observó que aplicaciones de 15 y 20 g / planta obtuvieron el mayor
porcentaje de yemas atizonadas y necrosadas versus la dosis recomendada, y el tratamiento
control fue significativamente distinto de los tratamientos anteriores. Es decir, tanto el
déficit de nitrógeno (sin aporte de urea), como el exceso en menor grado en que se
sobrepasan los 10 g/planta, generan una condición predisponente para la expresión de la
enfermedad.

Efecto de dos formulaciones comerciales
del hongo Trichoderma sobre el control de pudrición gris (Botrytis cinerea) en arándanos
orgánicos
Effect of two commercial Trichoderma formulations on Grey mold in organic
blueberries
Ortiz T., Cesar; Radrigan N., C.; Donoso C., E.
Bio Insumos Nativa Ltda., Chacra El Peral Lote A-l, Casilla 16-D, San Javier. e-mail: laboratorio@bionativa.cl

Durante la temporada 2009, se evaluó el efecto de dos productos
comerciales en base al hongo biocontrolador Trichoderma (Tr) bajo dos formulaciones:
líquida (suspensión concentrada) y sólida (esporas secas). El ensayo se realizó en un
huerto de arándanos orgánicos cv. Legacy y Ozarkblue, ubicado en la cuenca del río
Mataquito, Región del Maule. Se utilizaron ocho repeticiones por tratamiento (hileras de
50 m): Tr sólido (2,5 x 104 ufc/g) y Tr líquido (108 ufc/mL). Se realizaron tres
aplicaciones de cada tratamiento al 10, 50 y 90% de floración, ajustándose al programa
del predio. Ambos tratamientos se aplicaron con máquina turbo con un volumen equivalente
a 500 L/ha. La evaluación se realizó después de la segunda y tercera aplicación, donde
se recolectaron flores al azar, las cuales se trasladaron en contenedores plásticos hasta
el laboratorio de Bio Insumes Nativa. Se realizaron seis repeticiones de 10 flores cada
una, las cuales fueron colocadas en cámaras húmedas a +24°C en oscuridad y cada 48
horas se evaluó el número de flores atizonadas y con síntomas y signos asociados a
Botrytis cinerea en cada tratamiento. A la cosecha, se evaluó la incidencia de la
enfermedad y peso de frutos. En la evaluación de flor, no hubo diferencias estadísticas
entre los biocontroladores en ambos cultivares, pero sí previo a cosecha (fruto),
especialmente en Ozarkblue, la incidencia de Pudrición gris resultó significativamente
menor (p< 0,05) en el tratamiento con Trichoderma líquido, con respecto a la
formulación seca (esporas), al cabo de 10 días en cámara húmeda. En cuanto al peso de
frutos, tanto Legacy como Ozarkblue presentaron diferencias significativas entre ambos
tratamientos, siendo superior en frutos aplicados con la formulación líquida. Esta
situación puede explicarse debido a que la formulación líquida no sólo presenta
esporas (caso del Tr sólido), sino también micelio y productos de la fermentación del
hongo, lo que lo hace más resistente y capaz de establecerse por más tiempo en el
huerto, indicando su mayor eficiencia al momento de utilizarse en campo para la
prevención de Botrytis cinerea.

Selección y caracterización de levaduras
nativas para el biocontrol de Botrytis cinerea Pers. en uva de mesa
Selection and characterization of indigenous yeast f or biocontrol of Botrytis
cinerea Pers. on table grape
Sepúlveda, X.1, Vargas, M.1; Nally, C.2; Fuentealba, B.1
1Facultad de Agronomía, Universidad de Concepción, Av. Vicente Méndez 595,
Chillan, Chile. e-mail: marisolvargas@udec.cl
2 Instituto de Biotecnología, Facultad de Ingeniería, Universidad Nacional de
San Juan, Av. Libertador General San Martín 1109 (Oeste) (5400), San Juan, Argentina.

La pudrición gris causada por Botrytis cinerea es el principal
problema fitosanitario en uva de mesa, puesto que limita su producción y exportación.
Sin embargo, la creciente preocupación pública acerca de residuos de fungicidas en los
alimentos y el riesgo ambiental asociado con su uso, además del desarrollo de cepas
resistentes de patógenos a estos fungicidas, han generado interés en el desarrollo de
métodos alternativos no químicos de control, siendo el control biológico la alternativa
más explorada. Este estudio tiene como objetivos el seleccionar levaduras epífitas
capaces de controlar B. cinerea in vitro e in vivo, además de determinar algunos de sus
mecanismos de acción. Para ello se evaluaron 125 levaduras en cultivos duales, de las
cuales 11 produjeron inhibición del crecimiento de micelio del patógeno, en grado 2 a 4
según la escala propuesta por Swadding y Jeffries (1996). La actividad antagonista de
estas levaduras también fue evaluada a distintos pH (4,2; 4,6; 5,0 y 5,4), resultando el
pH 4,2 el más favorable, puesto que todas las levaduras presentaron algún grado de
inhibición del crecimiento de B. cinerea. En los ensayos in vivo estas levaduras fueron
probadas a dos regímenes térmicos (O y 20°C) y dos tiempos de colonización (2 y 24 h)
de la levadura en bayas del cv Thompson Seedless, previo a la inoculación del patógeno.
Dos levaduras redujeron la incidencia de Botrytis a un 29 – 33%, con un período de
colonización en la fruta de 24 h y almacenadas a 20°C. Los mecanismos de acción
evaluados fueron la producción de toxinas killer y el parasitismo. Las 11 levaduras
evaluadas presentaron actividad killer y 7 de ellas mostraron la capacidad de parasitar
hifas de B. cinerea. De este trabajo se concluye que las levaduras evaluadas tienen la
capacidad de reducir la incidencia de pudrición gris en uva de mesa y que la actividad de
biocontrol puede deberse a más de un mecanismo de acción.
Investigación financiada por Fondecyt 11080062

Potencial alelopático de Lupinus albus
L.
y Lupinus angustifolius L. sobre el crecimiento micelial in vitro de Fusarium
solani M.

Alellopathic potential of Lupinus albus L. and Lupinus angustifolius L. on
the micelial growth in vitro of Fusarium solani M.
R., Senn M.; E., Bensch T.; J., Guerrero C.; E., Ferrada Q.
Facultad de Ciencias Agropecuarias y Forestales, Universidad de La Frontera, Casilla 54-D,
Temuco, Chile. e-mail: rsenn@ufro.cl

En las plantas la presión de selección ejercida por su entorno ha
provocado el desarrollo de rutas de biosíntesis que generan metabolitos secundarios o
sustancias aleloquímicas que ejercen efectos sobre otras plantas, insectos o
microorganismos, fenómeno conocido como alelopatía. Las leguminosas, especialmente el
lupino, es importante en la rotación con cereales por cortar ciclos de enfermedades,
fijar nitrógeno atmosférico, mejorar la fertilidad del suelo y disminuir la incidencia
de malezas gramíneas. El objetivo de este estudio fue determinar potencial alelopático
de lupino sobre crecimiento micelial in vitro de Fusarium solani M., aislado de tomate,
localidad de Angol. Se postuló que Lupinus albus L. (cvs. Rumbo, Typ top y Pecosa) y
Lupinus angustifolius L. (cultivares. Wonga, Gungurrú y Tallerack) poseen efecto
alelopático diferencial sobre el crecimiento micelial in vitro de F. solani. Los
materiales utilizados fueron cultivares de lupino, cepas de Fusarium solani, agua
destilada estéril, medios de cultivo y diverso material de laboratorio. Mediante el
método de extractos radicales acuosos se evaluó seis concentraciones (O, 1, 3, 10, 30 y
90% v/v), con tres repeticiones y un diseño completamente aleatorizado. Análisis de
datos mediante Anova y comparación de medias por Tukey (p < 0,05) mediante
Statgraphics Plus 5.0. Ambas especies y cultivares de Lupino evaluados, ejercieron efecto
alelopático directamente proporcional a la concentración y periodo de interacción. A
concentración baja (1,3,10% v/v) los cultivares de L. albus Pecosa, Rumbo y Typ top,
ejercieron efecto alelopático inhibitorio significativo sobre el crecimiento micelial de
F. solani; en tanto, los cultivares de L. angustifolius Wonga y Gungurrú potenciaron el
crecimiento micelial del hongo evaluado, para Tallerack no se detectó efecto
alelopático. Lupinus albus posee mayor potencial alelopático inhibitorio sobre el
crecimiento micelial in vitro de F. solani que L. angustifolius.

Importancia de la protección de troncos
de cerezos, con pinturas fungicidas para el control de cáncer bacterial causado por Pseudomonas
syringaepv. syringae

Importance of cherry trunk protection, with fungicides paintings to
control bacterial canker caused by Pseudomonas syríngae pv. syringae
Pinilla C., Blancaluz; Corvalán E., Claudia
AGROLAB Ltda. Laboratorio de Fitopatología, José Domingo Cañas 2914, Santiago, Chile,
e-mail bpinilla@agrolab.cl ; ccorvalan@agrolab.cl

El cultivo del cerezo en Chile ha registrado un notable aumento de
superficie, que actualmente alcanza 16 mil hectáreas, plantadas entre las Regiones de
O’Higgins y Maule. Nuestras cerezas han logrado posicionarse fuertemente en diferentes
mercados de destino, sin que además tengamos grandes competidores en el Hemisferio Sur.
Desde el punto de vista del manejo fitosanitario, una de las enfermedades que mayormente
inciden en el cultivo del Cerezo, es el Cáncer Bacterial, causado por P. syringae pv.
syringae. Los síntomas pueden aparecer a los pocos meses de la plantación,
localizándose en el tronco, desde el cuello hasta el nacimiento de las ramas principales,
o bien en las axilas de las mismas. De acuerdo con las observaciones efectuadas en los
huertos y en las muestras de cerezos analizadas en el Laboratorio de Fitopatología de
AGROLAB, ha sido posible comprobar que heridas en los troncos, causadas por quema de sol
en verano y heladas en invierno, constituyen la principal vía de entrada de la bacteria a
las plantas. Considerando lo anterior, durante las últimas temporadas se han efectuado
ensayos para evaluar la eficiencia de pinturas fungicidas formuladas con distintos
fungicidas cúpricos, aplicadas manualmente, pintando los troncos desde el cuello hasta el
inicio de la inserción de las ramas principales. La aplicación de los tratamientos se
efectuó una sola vez al inicio del invierno, complementándola con aplicaciones de
fungicidas cúpricos en la parte aérea de los cerezos en el mismo periodo. La evaluación
de los tratamientos consideró la presencia de cancros, en troncos y ramas principales.
Los resultados reflejaron que los tratamientos con pinturas fungicidas, redujeron
significativamente el porcentaje de cancros causados por la bacteria, comparados con el
tratamiento testigo, que no fue pintado.

Actividad de biocontrol de levaduras
nativas sobre Botrytis cinerea en postcosecha de manzana
Biocontrol activity of indigenous yeast against postharvest gray mold
(Botrytis cinerea) on apple
Vargas, M.1; Berrios, J.1; Tapia, M.1; Nally, C.2
1. Facultad de Agronomía, Universidad de Concepción, Av. Vicente Méndez 595,
Chillan, Chile. e-mail: marisolvargas@udec.cl
2. Instituto de Biotecnología, Facultad de Ingeniería, Universidad Nacional
de San Juan. Av. Libertador General San Martín 1109 SOeste (5400), San Juan, Argentina.

La pudrición gris causada por el hongo Botrytis cinerea, es la segunda
enfermedad de importancia en postcosecha de manzana, produciendo graves pérdidas
económicas. Debido al creciente interés de los consumidores por alimentos libres de
pesticidas, es necesario estudiar alternativas de control, una opción es la utilización
de levaduras como agentes de biocontrol. El objetivo de esta investigación fue
caracterizar la actividad antagonista de dos aislados de levaduras nativas (174bl y 156a5)
frente a B. cinerea, en poscosecha de manzanas cv. Fuji. Se estudió el efecto de la
concentración de levadura (105,106,107 y 108 células mi”1) (bioensayo 1) y el
efecto del tiempo de colonización de las levaduras (2,24 y 48 h) (bioensayo 2), en el
control de B. cinerea. En heridas realizadas en los frutos se inoculó una suspensión de
levadura a concentraciones de acuerdo al tratamiento, transcurridas 2 h de colonización
de la levadura en la herida, se inoculó con una suspensión de conidias del patógeno
(106 conidias mi”1). Se establecieron tres repeticiones por tratamiento, con ocho
frutos por repetición. Los frutos se almacenaron a 0°C por 21 días, luego a 20-22°C
por 3 días, y se midió el halo de pudrición. Con estos datos se calculó el índice de
Inhibición del Halo de Pudrición (IIP %). La concentración de levaduras a la cual se
obtuvo el mayor IIP fue utilizada en el bioensayo 2, siguiendo la misma metodología
utilizada en el ensayo 1, pero variando los tiempos de colonización. La actividad de
biocontrol de las levaduras fue dependiente de la concentración utilizada y del tiempo de
colonización en las heridas. El aislado 174bl presentó la mayor actividad de biocontrol
(53,4 % IIP) a la concentración más alta evaluada (108 células mi”1), y al
aumentar el tiempo de colonización de 2 a 24 h con esta levadura, se obtuvo un aumento
significativo de la inhibición de la pudrición (95,9% IIP). De acuerdo a los resultados
de esta investigación las levaduras pueden constituirse en una interesante alternativa de
control de B. cinerea en postcosecha de manzana.
Investigación financiada por Fondecyt 11080062.

Efecto de la temperatura sobre Botrytis
cinerea
, el antagonista Clonostachys sp. (UDC-A10 y UDC-A11) y el control del
patógeno en bioensayos in vitro
Effect of temperatura on Botrytis cinerea, Clonostachys sp. and pathogen
control on in vitro bioassays
Zaldúa, Salomé; Sanfuentes, Eugenio
Laboratorio de Patología Forestal, Facultad de Ciencias Forestales & Centro de
Biotecnología. Universidad de Concepción. e-mail: szaldua@udec.cl
, esanfuen@udec.cl

Botrytis cinerea es un hongo patógeno que causa importantes pérdidas
en la producción de plantas de Eucalyptus spp. en condiciones de invernadero. Resultados
anteriores de los autores, han demostrado el potencial de dos cepas pertenecientes al
género Clonostachys (UDC-A10 y UDC-A11), en el control de B. cinerea en plántulas de E.
globulus. Los agentes de control biológico son afectados por condiciones bióticas y
abióticas, pudiendo afectar su eficacia de control, especialmente considerando las
fluctuantes condiciones ambientales en que deben operar. Es por ello que el objetivo de
este estudio fue determinar el efecto de la temperatura, en el comportamiento de B.
cinerea, los antagonistas y el control del patógeno. Se realizaron ensayos en condiciones
in vitro a 15,20 y 25°C donde se evaluó el crecimiento micelial y germinación de
conidias del patógeno y antagonistas, junto con la eficacia de control en cultivos
pareados en medio de cultivo. Enbioensayos empleando discos de hojas verdes y secas de E.
globulus se determinó el efecto de los antagonistas en la reducción de la colonización
y esporulación del patógeno. Los antagonistas Clonostachys UDC-A10 y UDC-A11 presentaron
un comportamiento similar entre ellos, en todos los ensayos y para todas las temperaturas
probadas. La germinación de conidias y crecimiento micelial del patógeno fueron mayores
entre 15 y 20°C, en cambio, para los antagonistas fue a 25°C. Los antagonistas
inhibieron el crecimiento micelial del patógeno en 44% a 15 y 20°C y en 26% a 25°C,
además, redujeron la colonización y esporulación del patógeno en discos de hojas en
57% a 15°C, 74% a 20°C y 95% a 25°C. Las cepas de los antagonistas y B. cinerea tienen
diferentes temperaturas óptimas para su crecimiento, germinación y esporulación, pero
los agentes de biocontrol presentaron una cierta versatilidad, manteniendo un efecto de
control significativo sobre el patógeno en el rango de temperaturas evaluadas.

Determinación de la actividad fungicida o
fungistatica de extractos de dos plantas nativas chilenas, sobre los hongos fitopatógenos
Botrytis cinerea y Alternaria alternata
Determination of the fungicidal or fungistatic activity of plant extracts
from two Chilean native species on the plant pathogenic fungi Botrytis cinerea and
Alternaria alternata
Apablaza, G.; Peña, C.; Gómez, M.; Salas, E.; Montenegro, G.
Departamento de Ciencias Vegetales, Facultad de Agronomía e Ingeniería Forestal,
Pontificia Universidad Católica de Chile, Avenida Vicuña Mackenna 4860, Macul, Santiago,
Chile, Casilla 306 Correo 22, Teléfono 56 2 3547216, Fax 56 2 5520780. e-mail: gmonten@uc.cl o gapablaz@uc.cl

Se estudiaron los posibles efectos de control de dos extractos de
plantas chilenas, sobre el desarrollo micelial in vitro, de dos hongos fitopatógenos que
causan daños de importancia económica en diversas especies agrícolas. Se prepararon y
probaron extractos completos de las dos especies y se determinaron sus efectos, utilizando
la técnica Food Poison Technique. Se encontró que los extractos crudos de ambas
especies, no inhibieron el crecimiento micelial de Botrytis cinerea proveniente de uva, ni
de Alternaría alternata proveniente de tomate. Se prepararon fracciones de los extractos
crudos con diferentes solventes ,y se probaron sus efectos de control sobre los mismos
hongos. La fracción etanólica del extracto (UC-Ag 23), mostró un efecto fungistático
sobre B. cinerea a una concentración de 78 [j.g/mL, con un valor de EC50 de 30,2 [j.g/mL;
y efecto fungicida a una concentración de 300 [ig/mL. Esta misma fracción a una
concentración de 400 [j.g/mL mostró inhibición total de A. alternata durante 7 días,
pero sin efecto fungicida sobre el patógeno. De manera similar, la fracción etanólica
del extracto (UC-Ag 24) inhibió un 67,5 % el crecimiento micelial de Alternaría
alternata, a una concentración de 400 [j.g/mL y una inhibición casi total (98 %) de B.
cinerea a la misma dosis. En consideración a estos antecedentes promisorios se continúa
su investigación.
Trabajo financiado por proyecto FUNDACIÓN COPEC-PUC QC008 a Gloria Montenegro.

Diseminación de tres virus asociados a la
enfermedad del enrollamiento de la hoja de la vid en un huerto comercial de chile central
Dissemination of three viruses associated to the grapevine leafroll
disease in a commercial field in central Chile
Mujica Teliz, María Valentina1; Rosales Villavicencio, Inés Marlene2;
Sandoval Briones, Claudio Roberto1
1 Universidad de Talca, Avenida Lircay S/N, Talca; e-mail: mmujica@utalca.cl
2 INIA La Platina, Santa Rosa 11610, La Pintana, Santiago

El complejo del virus del enrollamiento de la hoja de la vid (Grapevine
leafroll associated virus, GLRaV) constituye uno de los problemas más importantes de la
viticultura, tanto por el detrimento en rendimientos como por su rápida dispersión. Con
el objetivo de evaluar la dispersión de tres de los virus asociados a este complejo
(GLRaV-1, GLRaV-2 y GLRaV-3), se realizó el seguimiento de estos agentes en un viñedo
comercial de la variedad Cabernet sauvignon en la zona centro sur de Chile. Durante cuatro
temporadas (2006 – 2007, 2007 – 2008, 2008 – 2009, 2009 – 2010) se colectaron sarmientos
lignificados y se analizaron mediante ELISA. En paralelo se realizó extracción de RNAs
totales y luego RT-PCR para confirmar el diagnóstico. Al inicio del seguimiento, el
viñedo presentaba el 14% de sus plantas afectadas (1% con GLRaV-1,3% con GLRaV-2 y 10%
con GLRaV-3). Al término de la cuarta temporada de evaluación el viñedo presentó un
total de 67% de sus plantas afectadas, las cuales se distribuyeron de la siguiente forma:
13% con GLRaV-1, 14% con GLRaV-2 y 40% con GLRaV-3. Del porcentaje total de plantas
afectadas, un 22,4% lo representaron las infecciones múltiples, un 5,9% fueron plantas
afectadas conjuntamente por GLRaV-1 y GLRaV-2, 13,4% de las plantas presentaron GLRaV-2 y
GLRaV-3. No se detectaron plantas co-infectadas con los virus GLRaV-1 y GLRaV-3, sin
embargo un 2,9% de las plantas afectadas presentaron conjuntamente los tres virus. Estos
virus, salvo el GLRaV-2, tienen como vectores a los chanchitos blancos (Pseudoccocus sp.).
Sin embargo, en las cuatro temporadas analizadas, no se detectaron poblaciones lo
suficientemente grandes como para atribuirles un rol principal en la diseminación de
estos agentes virales. Por ello, la causa más probable de la diseminación se cree
serían los injertos naturales entre raíces de plantas vecinas, teoría que es apoyada
por los patrones de diseminación de los virus estudiados en el sentido de las hileras.

Comportamiento de una tecnología de aplicación
electroestática, en el control del oidio de la vid
Performance of an electrostatic technology to control grape powdery mildew
Riveros, F; Sánchez, M; Vera, J.; Alvarez, M.
El Santo 1785 Depto 502 La Serena e-mail: fdoriveros@gmail.com
; msanchez@anasac.cl

Con el objetivo de evaluar el comportamiento de una tecnología de
aplicación electrostática en el control del oidio de la vid (Erysiphe necator) se
estableció un ensayo sobre el cv. Moscatel de Alejandría conducido en parrón español
en la localidad de Limarí, Ovalle. Se utilizó una máquina electroestática ESS –
Sobitec Chile Grapes HT 150 modelo 2007 regulada por el fabricante para aplicar 75 litros
/Ha. Como tratamiento convencional se incluyó una nebulizadora marca Parada regulada para
1500 litros /Ha. El diseño experimental correspondió a bloques al azar con 5
tratamientos y 4 repeticiones. Los tratamientos correspondieron a: totalidad de
aplicaciones con electroestática, totalidad de aplicaciones con nebulizadora,
combinación de ambos métodos de aplicación en estados de floración e inicios de cuaja
y un testigo sin protección. Se realizó un total de 6 aplicaciones utilizando una
secuencia de fungicidas similar para todos los tratamientos que incluyó: difenoconazole,
quinoxifeno, tebuconazole, krexoxim methil y myclobutanil. Para evaluar con mayor
precisión la eficacia de los tratamientos, el área de ensayos fue dividida en 4 sectores
y en cada uno se marcó 4 repeticiones, donde se evaluaron 35 racimos. Se determinó
incidencia y severidad e índice de ataque de oidio en un total de 560 racimos por
tratamiento Los resultados demostraron que el testigo sin protección presentó entre 97.1
y 100 % de sus racimos enfermos y un índice de ataque que varió entre 22.2 y 41.7%. Los
porcentajes de racimos afectados, fueron significativamente inferiores en todos los
sectores de ensayo con protección con nebulizadora convencional en comparación con
aquellos tratamientos que incluyeron la tecnología electroestática. El tratamiento que
combinó protección inicial con tecnología electroestática y protección en estados de
crecimiento de bayas con nebulizadora convencional, presentó porcentajes de racimos
enfermos significativamente inferiores al tratamiento que protegió con electroestática
estados de crecimiento de bayas.

Evaluación de fungicidas en el control de
Spilocaea oleagina agente causal del repilo del olivo
Evaluation of fungicides to control Spilocaea oleagina, causal agent of
leaf spot of olive
Riveros, F; Sánchez, M.; Vergara, J.; Aguirre, R.
El Santo 1785 Depto 502 La Serena, e-mail: fdoriveros@gmail.com;
jvergara@inia.cl

Bajo condiciones de campo se evaluó la eficacia de diferentes
fungicidas para el control del hongo Spilocaea oleagina, agente causal de la enfermedad
repilo u ojo de pavo del olivo. El ensayo se realizó en la Hacienda La Compañía en
Vallena sobre plantas del cv. Sevillano bajo un diseño de bloques al azar con 4
repeticiones. Cada parcela estuvo constituida por 3 plantas y cada repetición por 63
ramillas que presentaban el 100 % de sus hojas enfermas. Los fungicidas fueron aplicados
tres veces desde antes que se iniciara la brotación y correspondieron a: Azoxystrobin 25
SC (IL/Ha), Status SL (150 cc/Hl), Cu ANASAC (300 gr/Hl), Cónsul (90 y 120 cc/Hl) y
Silver SC (70 y 100 cc/Hl). Los tratamientos fueron evaluados sobre el nuevo crecimiento
vegetativo desarrollado a partir de ramillas enfermas, a través del porcentaje de brotes
nuevos enfermos, porcentaje de hojas nuevas visualmente enfermas y a través del
porcentaje de hojas nuevas que presentaban una infección latente de la enfermedad. Los
resultados determinaron que una vez completado el estado de floración, el testigo
presentaba el 28.3 % de sus brotes nuevos con alguna de sus hojas enfermas y difirió
significativamente de tratamientos protegidos con los fungicidas. Silver SC(ambas dosis),
Cónsul 65 WP (120 cc/Hl) y Cu ANASAC los que presentaron entre 4.5 y 6.3 % de sus brotes
nuevos enfermos, porcentajes que fueron significativamente inferiores al de brotes nuevos
enfermos con Cónsul 65 WP (90 cc/Hl), Status SL y Azoxystrobin 25 SC. Sólo el 4.2 % de
las hojas nuevas del testigo presentó síntomas visuales de la enfermedad, sin embargo,
pruebas de laboratorio determinaron que en este tratamiento el 53 % de hojas estaban
incubando la enfermedad. Todos los tratamientos fungicidas presentaron infección latente
en algunas de sus hojas. Status, Cu ANASAC, Silver SC (100 cc/Hl) y Cónsul 65 WP (120
cc/Hl) presentaron porcentajes de hojas con infección latente significativamente inferior
al porcentaje que presentaron los tratamientos Silver (70 cc/Hl), Azoxystrobin y Cónsul
65 WP ( 90 cc/Hl).

Efecto de la esterilización y dilución
de suelo en mezclas suelo-arena sobre las poblaciones de Trichoderma
Effect of the soil sterilization and dilution in soil-sand mixtures on
populations of Trichoderma
Millas, Paz; France, Andrés
INIA-Quilamapu, e-mail: pmillas@inia.cl

La capacidad antagónica de Trichoderma spp. ha sido demostrada para
una gran variedad de patógenos de plantas. Sin embargo, las respuestas de eficacia de
control son muy variables, dependiendo en parte de la capacidad para establecerse y
colonizar el ambiente. Los contenidos de materia orgánica del suelo (MOS) sirven como
base alimenticia para organismos adicionados, como a la biomasa de microorganismos que
compiten con los biocontroladores inoculados. Este estudio fue realizado para evaluar el
establecimiento de Trichoderma (T183) en mezclas de suelo-arena, ya sea esterilizando y
disminuyendo los contenidos de un suelo orgánico; además de determinar una posible
interacción entre ambos factores. Se prepararon dos grupos de mezclas con cinco
contenidos de suelo orgánico, a través de la dilución de un suelo rico en materia
orgánica (22%) con arena, obteniéndose mezclas de 0,6,11,17 y 22% de MOS. Uno de los
grupos fue autoclavado para eliminar los microorganismos del suelo, posteriormente se
inocularon todos los tratamientos con T183 y se incubaron en potes dentro de una cámara a
24°C, oscuridad, y reponiendo la humedad regularmente. A las 2 semanas desde la
inoculación se evaluó el número de unidades formadoras de colonia (ufe) por gramo de
suelo en medio selectivo. Se determinó un efecto positivo y significativo (p>0,00001)
tanto del autoclavado del suelo como del contenido de MOS sobre el número de ufe. En el
grupo de mezclas autoclavadas hubo más ufe que en el grupo que no se autoclavo (860 + 390
ufc/g y 217.351 + 42.270 ufc/g, respectivamente). A medida que aumentó el contenido de
MOS en las mezcla hubo más ufe (13, 44, 90, 165, 209 x 103 ufc/g). Además se presentó
una interacción significativa entre contenido de MOS y esterilización. Estos resultados
sugieren que los contenidos de MOS favorecen el establecimiento de Trichoderma, debido al
aporte de nutrientes, pero lo dificulta la competencia.

Colecta de Trichoderma spp. desde
diferentes ecosistemas de Chile
Trichoderma survey from different Chilean ecosystems
Merino, Loreto; France, Andrés; Cisternas, Viviana
INIA Quilamapu. Av. Vicente Méndez 515, Chillan, e-mail: lmerino@inia.cl

Trichoderma spp. corresponde a un género de hongos saprofitos con alta
actividad antagónica frente a patógenos del suelo y de gran desarrollo a nivel
comercial. Sin embargo, su abundancia y distribución en el suelo y su asociación con
diferentes ecosistemas es, en muchos aspectos, aún poco conocida. Con el objetivo de
colectar aislamientos del género Trichoderma, desde suelos provenientes de diferentes
ecosistemas de Chile, se realizó un cebado de muestras de suelo mediante el uso de
rosarios de esclerocios de Sderotinia minor insertos en tubos con 150 g de suelo. Los
tubos fueron incubados durante 10 días a 20°C y agitando diariamente las muestras.
Posteriormente, los esclerocios fueron extraídos desde el suelo, lavados con agua
potable, desinfectados superficialmente en una solución de hipoclorito de sodio al 1% y
sembrados en medio de agar agua. Los aislamientos de Trichoderma fueron purificados,
caracterizados morfométricamente, identificados de acuerdo a su morfología y almacenados
en nitrógeno líquido. La colecta indicó una abundancia de aislamientos de Trichoderma a
lo largo del país, colectándose un total de 240 aislamientos, de los cuales el 72%
correspondieron a la zona sur de Chile. La identificación morfológica demostró la
presencia de las especies T. virens (20,4%), T. harzianum (14,6%), T. asperellum (12,1%),
T. koningii (11,7%). T. longibrachiatum (11,3%), T. viride (6,7%), T. stromaticum (4,2%),
T. aeurioviride (2,1%) y T. ciírínoviríde (0,4%). Un 16,7% del total de aislados no se
han logrado identificar por no ajustarse a las claves o falta de estructuras de
identificación. La colecta de Trichoderma demostró que el género está presente en
ecosistemas tan contrastantes, como el altiplano del norte de Chile, sectores del salar de
Atacama y la tundra fría de la Patagonia. Todos los aislamientos se encuentran accesados
al Banco de Recursos Microbiológicos de INIA.

Influencia de la fecha y densidad de
siembra sobre el desarrollo de la mancha chocolatada (Botrytis cinerea Pers. Ex Fr. y
B. fabae
SARD.) y roya (Uromyces viciaefabae (Pers.) J. Shórt), en tres
cultivares de haba baby, en Valdivia
Influence of seeding date and plant density on the development of
chocolate spot (Botrytis cinerea Pers. Ex. Fr. and B. fabae Sard) and bean rust (Uromyces
viciae fabae (Pers.) J. Short) in three «baby» faba bean cultivars, in Valdivia
Doussoulin J., Hermán; Andrade S., Nancy; Acuña L., Rodrigo
Universidad Austral de Chile, Facultad de Ciencias Agrarias, Instituto de producción y
Sanidad Vegetal, Casilla 567, Valdivia, Chile. e- mail: hdoussoulin@gmail.com

La incorporación de nuevas alternativas agrícolas para una zona determinada, conlleva
a determinar qué factores agronómicos son favorables, y cuáles pueden ser limitantes
para alcanzar el rendimiento potencial. Entre estos factores, determinar el grado de
incidencia de sus principales enfermedades es fundamental. El objetivo de la presente
investigación, fue evaluar la incidencia de la mancha chocolate y roya del haba afectando
cultivares de haba tipo «baby», introducidos en la zona de Valdivia. Se evaluó la
incidencia de enfermedades, el momento de aparición de patógenos, y el rendimiento en
función de la fecha de siembra (7 de agosto, 1 y 22 de septiembre de 2010), densidad (20,
30 y 40 plantas nr2) y cultivar (Retaca, Alarga y Verde Bonita). Este estudio se realizó
en la Estación Experimental Santa Rosa y el Laboratorio de Fitopatología de la
Universidad Austral de Chile, entre agosto de 2009 y enero de 2010. Entre las enfermedades
de importancia que afectaron al cultivo, la mancha chocolate (Botrytis fabae y B. cinerea)
fue la primera en aparecer, mientras hacia el final del ciclo del cultivo se presentó la
roya del haba (Uromyces viciae fabae). La fecha de siembra temprana presentó una menor
incidencia de B. fabae (14,1%), y U. viciaefabae (0,4%) comparado a fechas tardías de
siembra (B. fabae 84,3%, U. viciaefabae 75,2%), a excepción de B. cinerea que presentó
una relación opuesta de incidencia durante el desarrollo del cultivo (12.2% y 3,3%,
respectivamente). La densidad de siembra y cultivar no influyeron en la incidencia de las
enfermedades evaluadas. Siembras tempranas (7 de agosto y 1 de septiembre de 2010) y altas
densidades de siembra (30 y 40 plantas ni’2) alcanzaron los mayores rendimientos. Los
cultivares presentaron rendimientos similares. Esto resultados sugieren que realizar
siembras tempranas (agosto a principios de septiembre) en densidades de 30 y 40 pl
m”2 presentarán una menor incidencia de los patógenos evaluados y maximizarán los
rendimientos de haba baby.
DID S-2009-68

 

Una escala diagramática para evaluar el
complejo de cenicilla que afecta tomate en Arica
Oidium Complex in tomato in Arica: a diagramatic scale for assess
Sepúlveda-Chavera, Germán F.
Facultad de Ciencias Agronómicas. Universidad de Tarapacá. Avda. General Velázquez
1775, Arica. e-mail: gsepulve@uta.cl

Las condiciones climáticas de los valles de Arica, son ideales para el
oidio (Erysiphe polygoni y Leveillula taurina), siendo difícil su cuantificación. El
objetivo de este trabajo fue validar una escala esquemática que ayude a evaluar la
severidad de esta enfermedad en tomate. Se muestreó al azar foliólos con diferentes
niveles de síntomas y signos de la enfermedad, se digitalizaron, cuantificando el área
foliar total y el área ocupada por las colonias del hongo en los foliólos. El modelo se
baso en la ley de los incrementos logarítmicos de Weber y Fechner. A partir de foliólos
de área conocida se hizo una progresión teórica con diferentes patrones de
distribución de la enfermedad. La escala se validó sometiendo la muestra a un panel no
entrenado. Los valores obtenidos por cada evaluador fueron comparados con los valores
reales calculados. La precisión de las observaciones visuales se estableció con el
coeficiente de determinación (R2), por medio de una regresión lineal, considerando la
severidad real como la variable independiente y la severidad estimada como variable
dependiente. La prueba de T sugirió la necesidad de establecer metodologías de
entrenamiento pre-evaluación. Sin embargo, la precisión de la escala, por ser más bien
la definición de confiabilidad de las evaluaciones del daño, se determino por regresión
lineal establecida entre la severidad real y estimada. Cuanto mayor valor de R2, más
precisa es la escala. Los resultados obtenidos indican que la escala tuvo coeficientes de
determinación superiores a 0,80 (R2) en más del 90 % de los observadores. Los valores de
R2 permiten concluir que la escala diagramática propuesta es precisa y se puede utilizar
en condiciones de campo.
Proyectos: Formulación de sistemas de producción limpia para los principales cultivos
del Valle de Azapa. INIA-U. Tarapacá – INNOVA CORFO. Diversidad fúngica de los
principales agroecosistemas de los valles de Lluta y Azapa. U. de Tarapacá.
Vicerrectoría Académica. Dirección de Investigación y Extensión Académica.

Programa nacional de sanidad de la papa
(Solanum tuberosum) en Araucanía, Chile
National Security Program of Potato (Solanum tuberosum) in Araucanía,
Chile
Lillo, C.; Saavedra, I.; Seguel, M.; S. Moreira
Servicio Agrícola y Ganadero, Francisco Bilbao 931, 3º Piso, Térmico, Chile. e-mail: claudio.lillo@sag.gob.cl

La Región de la Araucanía está situada al sur de Chile (38°00′-
39°30′ S), comprende una superficie total de 31.842 km2 y es la región con mayor
superficie de cultivo de papa (14.000 ha).Está declarada como área libre de las plagas
cuarentenarias de la papa bajo control oficial. El Programa Nacional de Sanidad de la Papa
(PNSP) establece las directrices en vigilancia para verificar el estatus de plagas
cuarentenarias mediante prospecciones dirigidas propendiendo a la.detección temprana y
oportuna de agentes etiológicos de importancia potenciando la producción de tubérculos
semilla legal y consumo, prospectándose anualmente el 20% de la superficie cultivada
(2.500 productores). Entre los agentes fitopatógenos de importancia contemplados en las
prospecciones es posible citar a bacterias: Clavibacter michiganensis subsp. sepedonicus,
Ralstonia solanacearm y hongos: Thecaphora solani. El trabajo considera las coordenadas en
GPS de cada predio y potrero, los que posteriormente son ingresados en Sistema de
Información Geográfica (SIG) geo-referenciando cada muestra, la cual posteriormente es
analizada en Laboratorio de Fitopatología. Los análisis bacteriológicos se realizan por
ELISA (confirmación PCR) y el análisis micológico se realiza directamente
(confirmación PCR).Luego se realiza el Informe Fitosanitario en línea en el Sistema de
Información de Sanidad Vegetal (SISVEG), donde quedan disponibles para que personal de
Protección Agrícola y Forestal pueda demostrar el estado fitosanitario del cultivo en la
región y el país, permitiendo que se establezcan las estrategias y medidas pertinentes
desde el punto de vista epidemiológico, tales como: registro productores, control de
comercio, transporte y medidas de exclusión (cuarentenas vegetales). La Región de la
Araucanía (2009-2010) mantiene su estatus de área libre, respecto de Thecaphora solani,
donde se informa se han cuarentenado!7 predios y se mantiene en cuarentena 326 ha.
Similarmente, respecto de Ralstonia solanacearum se informa de un predio cuarentenado y un
decomiso positivo en comercio.

Resultados de análisis nematologicos
realizados por el Servicio Agrícola y Ganadero de Chile
Nematological analysis results carried out by the Servicio Agrícola y
Ganadero of Chile
Pacheco F., Hugo1; Moreno L., Ingrid2
1
Subdepto. Laboratorios y Estación Cuarentenaria Agrícola, Laboratorio de
Hematología. Ruta 68 Km. 12, Pudahuel, Santiago. e-mail: hugo.pacheco@sag.gob.cl
2 Subdepto. Vigilancia y Control Oficial Agrícola. División de Protección
Agrícola y Forestal. Bulnes 140, Santiago, e-mail: ingrid.moreno@sag.gob.cl

El Servicio Agrícola y Ganadero desarrolla varios programas de
vigilancia y certificación fitosanitaria a nivel nacional para dar cumplimiento a
normativas establecidas siguiendo directrices que tienen validez internacional, tales como
el Acuerdo sobre la Aplicación de Medidas Fitosanitarias de la OMC (1994), la Convención
Internacional de Protección Fitosanitaria-FAO y las Directrices de Vigilancia (NIMF N°
6/1998). Estos programas producen muestras que se encuentran georeferenciadas, y que son
analizadas por una red de laboratorios distribuidos a través del país. El objetivo de la
presentación es exponer datos consolidados de la disciplina de nematología
correspondientes al año 2009 que derivan de las determinaciones de nemátodos
fitoparásitos realizadas por la red de laboratorios SAG. Durante ese período se analizó
más de 12.000 muestras de suelo y partes vegetales. Los programas más relevantes en
nematología corresponden a Vigilancia Agrícola, Inspección de Viveros y Certificación
Fitosanitaria de bulbos para exportación. De acuerdo a los resultados, el género
Pratylenchus es el que presenta la mayor frecuencia de detección. Existe un patrón de
distribución de las especies de Pratylenchus que presentaría correlación con los
requerimientos edafoclimáticos y de hospedantes del nemátodo. Las técnicas de
diagnóstico para la determinación de las especies de nemátodos, incluyen el uso de la
taxonomía tradicional y PCR con partidores específicos. Se proyecta continuar con el
análisis de los datos de las determinaciones y técnicas de diagnóstico a nivel de
género y especie para cada nemátodo determinado.

Mejoramiento de la calidad fitosanitaria
en el cultivo de papa mediante un servicio de diagnóstico a distancia utilizando
herramientas TIC
Improvement of the potato crop phytosanitary quality, through a long
distance diagnostic service using information technology
Bravo, Rodrigo; Acuña, Ivette; Chacón, Gustavo; Inostroza, Juan; Sandoval, Camila;
Mancilla, Sandra
Instituto de Investigaciones Agropecuarias INIA Remehue, Casilla 24-O, Osorno, Región de
Los Lagos, Chile, Fono: 56-64-450420, Fax: 56-63-237746. e-mail: iacuna@inia.cl

Una de las grandes limitantes en la producción agrícola son los
problemas sanitarios, los cuales producen pérdidas significativas en los rendimientos y
calidad de los productos. La mejor estrategia de control de enfermedades es indudablemente
a través de un manejo integrado, esto es el uso de factores genéticos, agronómicos y
culturales, considerando el uso de información relevante para elegir las mejores opciones
de manejo. El diagnóstico fitopatológico es una de las herramientas de apoyo más
importante en la toma de decisiones en el manejo integrado, ayudando a lograr el control
eficiente de un problema y prevenir la posibilidad de una epifitia. Por lo tanto, un
diagnóstico correcto y oportuno puede determinar la pérdida o no de un cultivo. El INIA
en el año 2009 se adjudicó un proyecto financiado por INNOVA Chile, CORFO, el cual tiene
como objetivo el mejorar la calidad fitosanitaria en el cultivo de papa mediante un
servicio de diagnóstico a distancia utilizando herramientas de la tecnología de la
información y de las comunicaciones, TIC, para apoyar la toma de decisiones de pequeños,
medianos y grandes empresarios y empresarias agrícolas. El resultado principal del
proyecto será un servicio de diagnóstico a distancia validado, que permita realizar
diagnóstico vegetal en las principales enfermedades de importancia económica en el
cultivo de papa. Los protocolos de recepción y envío de muestras digitales desarrollados
consideran la imagen digital de acuerdo a la sintomatología descrita, la distribución de
la enfermedad y manejo del cultivo utilizando Internet como interf az de comunicación con
especialistas en fitopatología del cultivo papa. En esta primera etapa, se recibe una
contramuestra física de la planta afectada, la cual ingresa al laboratorio con un
protocolo que considera un formulario de entrada, procesamiento de muestra según
sintomatología, análisis microscópico, medios de cultivo específicos y marcadores
moleculares, que confirme el diagnóstico digital. Junto con lo anterior, el uso de las
TIC permitirá georeferenciar las muestras para realizar un monitoreo temporal y
territorial de la aparición de diferentes problemas fitopatológicos de papa.
Presentación POSTER

Hongos fitopatogenos asociados a síntomas
de muerte regresiva y cancrosis severa en Eucalyptus globulus Labill.
Phytopathogenic fungí associated to canker and dieback symptoms in
Eucalyptus globulus Labill.
Palma, Ma Antonieta1; Chávez, Eduardo2; Piontelli, Eduardo3;
Opazo, Alex4 ;Ovalle,Vladimir4 ;San Martin, Joanna1
1 Servicio Agrícola y Ganadero, Laboratorio Regional SAG Región de
Valparaíso, Varas 120 Valparaíso, e-mail: antonieta.palma@sag.gob.cl
2 Servicio Agrícola y Ganadero, Departamento de Laboratorios y Estaciones
Cuarentenarias Agrícola y Pecuarias, ruta 68 Km. 22. e-mail:eduardo.chavez@sag.gob.cl
3 Universidad de Valparaíso, Laboratorio de Micología, Facultad de Medicina,
Casilla 92 V, Valparaíso, e-mail: eduardo.piontelli@uv.cl
4 Servicio Agrícola y Ganadero, SubDepto. Vigilancia y Control Oficial
Forestal, casilla N° 4048 Santiago, e-mail: alex.opazo@sag.gob.cl; vladimir.ovalle@sag.gob.cl

En Diciembre de 2009, el Servicio Agrícola y Ganadero (SAG), en el
marco del programa de Vigilancia y control oficial Forestal, realizó una prospección (40
ha) asociada a sintomatología de cancrosis severa y muerte apical en Eucalyptus globulus
de 5 a 8 años, ubicados en la localidad de el Yali Bajo, Comuna de Santo Domingo,
Provincia de San Antonio, Región de Valparaíso. Inicialmente fueron captadas muestras de
ramas y ramillas con muerte regresiva de ápices y posteriormente se obtuvo muestra de
ramas con cancrosis severa. La cancrosis observada es similar a un problema de causa
desconocida denominado lepra del eucalipto y la muerte apical de ramas asemejan muerte
regresiva o dieback, que afecta a Eucalyptus sp. en la Región y es causada aparentemente
por la acción de una especie de Cytospora y un integrante del género Botryosphaeria
asociado a su anamorfo (Neofusicoccum). Desde la zona apical de ramillas con avance de
tejido enfermo, se realizaron aislamientos en agar papa dextrosa (PDA), a partir de los
cuales se desarrollaron colonias fúngicas de color gris y fluocosas que posteriormente se
identificaron taxonómicamente como Botryosphaeria eucalyptorum, (especie cercana a
B.eucalypticola). Sus ascomas midieron en alto entre 97 y 180 jUm., las ascosporas
midieron un promedio de 23,57 x 8,58 jUm, (n = 44) y sus mitosporas en promedio 22,41 x
6.58 um. (n = 50). Debido a las similitudes morfométricas de las especies de B.
eucalypticola y B. eucalyptorum que dificultó su definición, se analizo los aislamientos
mediante secuenciación y análisis de la región ITS del rDNA y técnica PCR-RFLP,
identificándose de acuerdo a la comparación de bases de datos de genes y patrón de
digestión, como Botryosphaeria eucalyptorum Crous, H.Smith & M.J. Wingfield. En
cancros severos, se obtuvo en forma consistente colonias de lento crecimiento color café
oliváceo, pertenecientes a Cytospora sp.de la Sección Cytospora. Con posterioridad deben
realizarse estudios para determinar la especie y confirmar su relevancia en la
patogénesis asociada al rodal.

Utilización de cebos de eucaliptus para
la detección y cuantificación de Phytophthora sp. en suelos
Use of Eucaliptus baits for the detection of Phythophthora sp. in soils
Wong J., Wendy1; Sepúlveda R., Paulina2; Rebufel A., Patricia2
1Universidad Iberoamericana de Ciencias y Tecnología (UNICIT), Padre Miguel de
Olivares 1620, Santiago, Chile, e-mail: wwong@unicit.cl
2 Instituto de Investigaciones Agropecuarias, INIA La Platina, Santa Rosa
11.610 Santiago, Chile. E-mail: psepulve@inia.cl

Las especies de Phytophthora representan un serio peligro para la
fruticultura, reduciendo severamente los rendimientos y la calidad de las plantas. El
conocimiento de la infectación de suelo por estos patógenos es muy relevante, para poder
realizar medidas preventivas de control. El uso de cebos (hojas de tabaco), ha sido
desarrollado con éxito para la detección y cuantificación de P. nicotianae en suelos
destinados al cultivo del tabaco. Tomando en consideración estos trabajos, el presente
estudio tuvo como objetivo la utilización de hojas de eucaliptos, para detectar y
cuantificar especies de Phytophthora en suelos de cultivos frutales de Chile. Se
muestrearon suelos destinados al cultivo de frutales y en el laboratorio de Fitopatología
de INIA La Platina, se pesaron 10 g de cada muestra por separado y se realizaron
diluciones seriadas de 1/10 hasta la concentración de 1/1000. Se tomaron placas de
cultivo de tejidos de 24 pocilios, en cada orificio se añadieron 2 mi de cada dilución y
sobre la superficie, se colocó una circunferencia de Icm de diámetro de una hoja joven
de eucaliptus. Las placas se incubaron durante 5-6 días en una cámara con temperatura de
27 + 2° C y un fotoperíodo de 12 horas luz y 12 horas oscuridad. Posteriormente, se
realizó un recuento de infección por esporangios en cada hoja y se calculó el número
de propágulos presentes, utilizando el método del número más probable. Los resultados
permitieron identificar y cuantificar claramente especies de Phytophthora presentes en las
muestras de suelo. Esta metodología fue empleada con éxito para analizar la eficiencia
de distintas alternativas al uso del bromuro de metilo en fumigaciones de suelo y en el
análisis de suelos destinados al cultivo de palto en la localidad de Codpa, Región de
Arica y Parinacota. En todos los ensayos se obtuvieron muy buenos resultados, por lo cual
esta metodología representa una real alternativa para conocer la infección por
Phytophthora en suelos destinados al cultivo de frutales.

Primer reporte de atizonamiento de brotes,
flores y frutos de granados causado por Botrytis cinerea en Chile
First report of shoot, blossom, and fruit blight of pomegranate caused by
Botrytis cinerea in Chile.
Alarcón C., Paula; Henríquez S., José Luis
Universidad de Chile, Facultad de Ciencias Agronómicas, Depto. Sanidad Vegetal. Av. Santa
Rosa #11.315, La Pintana, Santiago, Chile, e-mail: paulaalarcon@u.uchile.cl , jhenriqu@uchile.cl

El granado (Púnica granatum L.), se ha convertido en un cultivo frutal
de importancia económica en Chile, con cerca de 300 ha plantadas y una producción de 600
ton de fruta exportada. Brotes, flores y frutos atizonados fueron observados por primera
vez en diciembre de 2009 en un huerto de granados var. Wonderful localizado cerca de La
Serena, en una localidad ubicada a unos 20 km de la costa, caracterizada por abundantes
neblinas durante la primavera. Los síntomas observados correspondieron a atizonamiento de
los brotes terminales, atizonamiento parcial o total de flores y frutos recién cuajados.
Sobre flores y frutos se observaron lesiones negras de bordes regulares ubicadas
principalmente en la zona calicinal. Adicionalmente, se observó abundante esporulación
sobre los tejidos infectados, lo que se evidenció además cerca de cosecha en frutos
partidos. En laboratorio se hicieron cultivos en agar papa dextrosa obteniéndose un
micelio blanco con esporulación grisácea y producción de esclerocios negros de forma
irregular. Las conidias del hongo midieron 4 – (4.1) -5×5- (5.8) – 7 [j.m y fueron
típicas de aquellas de Botrytis cinerea Pers: Fr. Posteriormente, se realizaron
inoculaciones de ramas de granados con trozos de agar de 3 mm de diámetro con micelio del
patógeno. Para ello se hicieron cortes levantando la corteza para situar el trozo de agar
en la herida que fue posteriormente cubierta con un trozo de parafilm. Se inocularon 4
brotes en 4 árboles y 4 brotes fueron inoculados con un trozo de agar estéril como
control negativo. Lesiones necróticas se produjeron en todas las ramas inoculadas con el
patógeno luego de 30 días y B. cinerea fue reaislada de dichas lesiones, completando los
postulados de Koch. No se observaron lesiones en los brotes testigos inoculados.
Pudrición de frutos de granado han sido observados previamente en Chile, pero no
reportados. Este constituye el primer reporte de atizonamiento por Botrytis cinerea en
granados en Chile.

Detección y diagnostico de Erwinia
chrysanthemi pv. dianthicola en cultivos de clavel en Chile
Detection and diagnosis of Erwinia chrysanthemi pv. dianthicola in
carnation crops in Chile
Vega Berroeta, Ernesto; Ureta Olivares, Carolina
Servicio Agrícola y Ganadero, Departamento Laboratorios y Estaciones Cuarentenarias
Agrícola y Pecuaria, Ruta 68, Km. 12, s/n, Lo Aguirre, Santiago, Chile, e-mail: ernesto.vega@sag.gob.cl.

Durante la temporada 2009, se determinó en el cultivo de clavel
localizado en la Región Metropolitana, la presencia de una bacteria causando daño
vascular en condiciones de anaerobiosis radicular. Posteriormente, durante las temporadas
2009-2010, entre las Regiones de Coquimbo al Maule, se ha continuado con las prospecciones
a cultivos de clavel, dirigidas a síntomas de marchitez, presencia de follaje flácido y
con pérdida del brillo foliar. De los aislados obtenidos, se seleccionaron 24 de distinta
procedencia para caracterizar el agente causal. Los primeros análisis consistieron en
test serológico ELISA para Erwinia chrysanthemi, aislamiento en medio de cultivo CVP,
pruebas bioquímicas básicas y específicas para el género y la especie y PCR a partir
de colonias, utilizando los partidores ADE1 y ADE2 (Nassar y col., 1996). Posteriormente,
se han realizado pruebas similares para las muestras de las prospecciones 2009-2010,
agregándose el PCR directo de tejido vegetal y la digestión enzimática, para llegar a
determinar el patovar, utilizando para este último análisis las enzimas Hpall y Alul y
el patrón de digestión de acuerdo Nassar y col., 1996. Test ELISA positivo a Erwinia
chrysanthemi. Colonias con degradación en medio CVP. Aislados de forma bacilar; Gram,
fluorescencia y oxidasa negativa; pudrición en papa, crecimiento a 36°C, sensibilidad a
la eritromicina y producción de indol positivos; utilización de la glucosa fermentativa;
producción de ácido a partir de sorbitol y arabitol negativos, y positivos a partir de
lactosa. PCR, a partir de colonias y tejido vegetal, con presencia de banda de
amplificación del orden de los 420bp y digestión enzimática coincidentes con uno de los
patrones de digestión propuestos. Los análisis realizados permitieron determinar como
agente causal de los daños en el cultivo de clavel a la bacteria Erwinia chrysanthemi pv.
dianthicola, constituyéndose el primer reporte de esta plaga en el país. Además, se
concluyó la utilización de la técnica PCR directo para continuar con los futuros
análisis de prospecciones de clavel, y la digestión enzimática para descartar otros
patovares.

Pestalotiopsis clavispora y Pestalotiopsis
sp. en palta (Persea americana)
Pestalotiopsis clavispora and Pestalotiopsis sp. in avocado (Persea
americana)
Valencia, A. L.; Torres, R.; Latorre, B.A.
Facultad de Agronomía e Ingeniería Forestal. Pontificia Universidad Católica de Chile.
Casilla 306-22, Santiago, Chile. Proyecto Fondecyt 1100246. e-mail: alvalenc@uc.cl

Las pudriciones de paltas Hass (Persea americana) son un importante
problema patológico en los mercados internacionales de destino de la palta chilena,
siendo común la pudrición peduncular del fruto. Esta pudrición resulta difícil
detectarse durante la cosecha y embalaje. Los síntomas aparecen en la cavidad peduncular
y eventualmente afecta gran parte del fruto. En paltas refrigeradas a 6°C, la pudrición
se inicia luego de 15 días de conservación, aproximadamente. Este trabajo tuvo por
objetivo determinar el agente causal de la pudrición peduncular de la palta. Para esto,
se sembraron trozos de la zona de avance en APD (20°C por 7 días). De un total de 24
aislados, tentativamente identificados como Pestalotiopsis, se seleccionaron tres
aislamientos (PALUC-06, PALUC-10, PALUC-12) para su caracterización morfológica,
molecular y estudios de patogenicidad. La patogenicidad se determinó en paltas Hass (con
26.81% de materia seca), heridas y sin herir; las que se incubaron en cámaras húmedas a
20 y 25°C durante 10 días. Los resultados demostraron la presencia de colonias fungosas
blancas algodonosas y acérvulos negros con conidias fusiformes ((23.9)25.0-38.8 x
(6.7)8.0-9.4; (22.9)27.5-35.3 x (5.5)7.0-9.7 y (22.2)27.0-30.4 X (6.3)7.0-9.8 |im,
dependiendo del aislamiento), provistas de 2-4 apéndices apicales (12.0-24.4; 5.5-25.4 ó
13.4-48.0 [j.m, según el aislado) y un apéndice basal ramificado (PALUC-06, PALUC-10) o
sin ramificar (PALUC-12), con 4 septos, siendo sus 3 células centrales oscuras e hialinas
las células de los extremos. En función de las características morfológicas de las
conidias y de los análisis moleculares, estos aislamiento se identificaron como P.
clavispora (PALUC-12) y Pestalotiopsis sp. (PALUC-06, PALUC-10). Todos los aislamientos
fueron patogénicos en paltas Hass previamente heridas. No hubo desarrollo de la
enfermedad en frutos inoculados sin herir. En conclusión, los resultados de este trabajo
demostraron la presencia de Pestalotiopsis como causante de pudriciones de paltas en
condiciones de postcosecha. Sin embargo, estos resultados no descartan la posibilidad que
especies de Pestalotiopsis coexistan con otros hongos causantes de pudriciones en palta.
Agradecimientos Beca CONICYT-Gobierno Regional de Valparaíso

Pudrición radical de Nothofagus
macrocarpa
Root rot of Nothofagus macrocarpa
Valencia, A. L.; Chorbadjian, R.; Latorre, B.A.
Facultad de Agronomía e Ingeniería Forestal. Pontificia Universidad Católica de Chile.
Casilla 306-22, Santiago, Chile. Proyecto Fondecyt 11090237. e-mail: alvalenc@uc.cl

El roble de Santiago (Nothofagus macrocarpa), componente principal de
los bosques de altura entre las provincias de Valparaíso y Rancagua, tiene un creciente
interés como especie ornamental, siendo multiplicado en viveros específicos de la zona
central de Chile. En uno de estos viveros, se determinó la presencia de plantas
marchitas, parcialmente defoliadas. Al examinar el cuello y las raíces invariablemente se
observó el desarrollo de podredumbre y cancros rojizos café cobrizo. Con el propósito
de estudiar la etiología de esta enfermedad se sembró pequeños trozos de raíces y
tejidos del cuello de plantas enfermas en agar maíz antibióticos (AMA) y agar papa
dextrosa. Los cultivos se incubaron a 20°C por 5 días en oscuridad. Adicionalmente se
utilizó paltas y manzanas maduras como cebadores, para facilitar el aislamiento del
agente causal desde muestras de suelo saturado a 20°C, obtenido desde las macetas con
plantas enfermas. Se obtuvieron 27 aislamientos de Phytophthora, de los cuales se
seleccionaron 9 para su caracterización morfológica y fisiológica. 3 aislamientos
obtenidos desde el cuello, raíz y suelo se emplearon para pruebas de patogenicidad en
ramillas de N. macrocarpa y N. obliqua. Con este objetivo se inocularon cinco ramillas
(15-20 cm de largo), heridas, con una suspensión micelial (106 propágulos/ml) y se
incubaron en cámara húmeda a 20°C por 12 días. Todos los aislamientos fueron
patogénicos en ambas especies de roble, siendo más susceptible N. macrocarpa que N.
obliqua. En conclusión, los síntomas observados se deben a la acción de Phytophthora
spp., siendo ésta la primera mención de Phytophthora en N. macrocarpa en Chile.
Agradecimientos Beca CONICYT-Gobierno Regional de Valparaíso

Especies de Diatrypaceae asociadas a
cancrosis de la madera (CM) de la vid
Diatrypaceae species associated to wood canker on grapevine
Díaz, Gonzalo A.1; Chavez, Eduardo2; Latorre, Bernardo A.1
1 Laboratorio de Patología Frutal, Facultad de Agronomía e Ingeniería
Forestal, Pontificia Universidad Católica de Chile, Macul, Santiago
2 Laboratorio de Micología, Servicio Agrícola y Ganadero, Lo Aguirre,
Santiago e-mail: gadiaz3@uc.cl

La CM de la vid (Vitis vinifera) reduce la vida útil del viñedo,
disminuye los rendimientos y calidad de la cosecha. Varias especies de ascomicetes,
principalmente especies de Diatrypaceae, se han descrito como posibles agentes causales de
CM en el mundo. En este trabajo se presentan los resultados obtenidos al examinar 225
muestras de vides (>5 años de edad), afectadas por CM, las que se recolectaron entre
Aconcagua y Malleco. Los aislamientos se realizaron a partir de tejidos vasculares
necrosados, asociadas a CM en brazos y troncos. Las muestras se sembraron en agar papa
dextrosa (APD) modificado con estreptomicina, tetraciclina e Igepal (APDM) incubado a
20°C por al menos 14 días. Se obtuvo 13 aislados de Eutypella leprosa y 7 aislados de
Cryptovalsa ampelina. Los aislamientos de E. leprosa presentaron colonias blancas de
aspecto aterciopelado-floculento de bordes irregulares, con un lento crecimiento,
cambiando a color gris oscuro a partir de 15 d. Las colonias de C. ampelina fueron blancas
con aspecto aterciopelado de bordes bien definidos, con un crecimiento micelial
relativamente rápido. El envés del medio APD se tino de color negro en el caso de E.
leprosa. Molecularmente, al analizar la región ITS del ADNr con los partidores ITS4-ITS5,
se obtuvo sobre 98% de identidad al compararlo con E. leprosa AJ302463.1 y C. ampelina
FJ430591.1 (Genbank, NCBI). Los aislamientos de E. leprosa y C. ampelina fueron
patogénicos en pruebas in vitro disminuyendo el crecimiento y la formación de hojas en
plántulas de Carménére in vitro. La frecuencia de aislamiento de Diatrypaceae (4.0%)
desde vides con CM fue considerablemente inferior a la frecuencia obtenida con especies de
Togniniaceae (34.5%), Botryosphaeraceae (18.2%) y especies de Basidiomycete (42.2%). En
este trabajo no se detectó a Eutypa lata, patógeno frecuentemente asociado a CM de la
vid en otros países. El hongo C. ampelina se detectó en restos de poda en el viñedo.
Esta es la primera mención de C. ampelina y E. leprosa asociados a la vid en Chile.
Agradecimientos a Conicyt-Beca de Doctorado

Hongos asociados a cancrosis de la madera
en Vitis Vinifera
Fungí associated to wood canker on Vitis vinifera
Díaz, Gonzalo A.; Latorre, Bernardo A.
Facultad de Agronomía e Ingeniería Forestal, Pontificia Universidad Católica de Chile
e-mail: gadiaz3@uc.cl

La cancrosis de la madera (CM) de la vid (Vitis vinifera) afecta la
propagación y produce declinación productiva en viñedos adultos (> 8 años). Se
caracteriza por producir necrosis interna en troncos y brazos, muertes de pitones,
sarmientos, brazos y eventualmente de la planta. Asociado a estos síntomas puede ocurrir
enrollamiento clorótico de las hojas. Previamente se han descrito Phaeomoniella
chlamydospora, Phaeacremonium spp., especies de Botryosphaeriaceae y Fomitiporella vitis
(Basidiomicete) como agentes asociados a CM de la vid en Chile. Se postula que la CM
resulta de la acción conjunta de hongos ascomicetes y basidiomicetes, los que
posiblemente actúan en forma secuenciada en el tiempo. Este estudio tuvo por objetivo
determinar la importancia relativa de las especies fungosas asociadas a CM y asociarlas
con pudrición blanda (PB), pudrición dura (PD), necrosis vascular (NV) (estrías y
puntuaciones necróticas) y línea necrótica de avance (L), que corresponden a los
principales síntomas internos de CM. En un total de 256 muestras de troncos y/o brazos de
vides obtenidas entre Aconcagua y Malleco en 2009-2010, se obtuvo Phaeomoniella
chlamydospora (33,7 %), Inocutis jamaicensis (21,8 %), Basidiomicete sp. (20,4 %),
Diplodia seriata (14,1 %), Diatrypaceae spp. (4,1 %), Dothiorella sarmentorum (2,7 %), y
Neofusicoccum parvum (1,2 %), Phaeoacremonium sp. (0,8 %), Seimathosporium sp. (0,4 %),
Cylindrocarpon sp. (0,4 %), Botryosphaeaceae I sp. (0,2 %) y Phomopsis sp. (0,2 %). Estas
especies se identificaron en forma morfológica y se corroboró molecularmente por sobre
98 % de identidad de especies de referencias depositadas en el Genbank. Pa. chlamydospora
se asoció a NV, I. jamaicensis y Basidiomicete sp. se encontraron en PB, D. seriata se
aisló de PD y Pa. chlamydospora, I. jamaicensis, Basidiomicete sp. se aislaron desde L.
En función de estos resultados es posible indicar que la CM de la vid en Chile está
asociada a un complejo fungosos donde predominan Pa. chlamydospora, I. jamaicensis,
Basidiomicete sp. y D. seriata.
Agradecimientos a Conicyt-Beca de Doctorado

Detección de Olpidium brassicae (Wpronin)
en raices de plantines indicadores y su relación con contenidos de N, P, K en los suelos
hortícolas de Quillota
Olpidium brassicae (Woronin) detection in root of indicators seedlings and its
relation with N, P, K content in horticultural soils of Quilota
Viano, R1; Arancibia, R1; Farias, A1.
1 Universidad del Mar, Escuela de Ciencias Agropecuarias. Prodesal,
Municipalidad de Quillota. e-mail: rosa.arancibia@udelmar.cl

Olpidum brassicae es un parásito obligado intracelular de raíces,
vector de virosis (Enfermedad de la vena gruesa) en lechuga (Lactuca sativa) y permanece
en restos radiculares en el suelo en forma de esporangiosporas. Con el propósito de
detectar Olpidium brassicae en suelos mediante plantas indicadoras, se determinó la
relación entre contenido de Nitrógeno, Fósforo, Potasio, pH, Ce, con la infestación de
O. brassicae de suelos hortícolas de Quillota. Se muestrearon suelos, de 15 predios de
las localidades de San Pedro (8), Santa Olivia (4), Pueblo Indio (2) y La Palma (1),
cultivados con hortalizas, determinándose contenidos (ppm) de N (amonio y nitratos), P,
K, Ce y pH. Se dispusieron en contenedores donde se cultivo plantas indicadoras; lechuga
(Lactuca sativa) y repollo (Brassica olerácea). Al cabo de 45 días, se emplearon trozos
de 30 raicillas de cada especie vegetal/ muestra de suelo empleándose la tinción
Phillips y Hayman (1970). Detectándose así, esporangiosporas (40X) de O. brassicae en
raicillas. Evaluándose incidencia y severidad (escala O, 1, 2, 3) de la colonización de
raíces. Mediante análisis estadístico multifactorial, se determinó la correlación
entre la incidencia y severidad de colonización de O. brassicae y los contenidos de
amonio, nitrato, fósforo, potasio, pH, C.e/muestra de suelo. Los resultados permiten
corroborar que ambas especies vegetales son indicadoras de O. brassicae. Los 15 predios
presentaron una infectación nivel 1, baja (1 a 30%). Determinándose correlación
positiva entre contenidos de amonio e inversa con nitratos de O. brassicae.
Considerándose el contenido de nitrógeno un buen indicador que afecta la colonización
de O. brassicae en plantas indicadoras mientras que los contenidos P, K, Ce y pH no
presentaron significancia para correlacionarlas con O. brassicae.

Primera determinación de Sclerotium
rolfsii Sacc. en statice (Limonium spp). Especie ornamental cultivada en localidades de
Quillota
First determination of Sclerotium rolfsii Sacc. on Statice (Limonium spp),
ornamental specie in Quillota locations
Arancibia, R.1; Ibañez. F.1 Lefno, N.2.
1 Universidad del Mar, Escuela de Ciencias Agropecuarias

2 Prodesal, Municipalidad de Quillota. e-mail: rosa.arancibia@udelmar.cl

El Statice es una planta ornamental de flores pequeñas colores azules,
violetas, anaranjados, amarillos, rosados y blancos empleada como relleno de arreglos
florales, siendo ampliamente cultivada en la Región de Valparaíso. En otoño del
presente año se detectaron síntomas de marchitez y desecación foliar, con reducción de
la altura de las plantas y menor formación de botones florales. A nivel del cuello se
observaba pudrición seca y presencia de restos de micelio blanco a café. Se observó
además, necrosis seca de la corona y de la base de tallos. Con el objetivo de determinar
el o los agentes causales de los síntomas descritos se realizó un muestreo de plantas
dirigido a plantas con síntomas y con distintos grados de severidad. Luego de la
desinfección de tejido obtenido del cuello y la corona de las plantas. Se dispusieron 5
segmentos de tejidos/planta/identificada, en medio de cultivo APD acidificado y se
incubaron a 22°C durante 8 días. Se determinó la presencia de abundante micelio y el
inicio de esclerocios de color blanco a café claro. Luego se purificaron 6 aislados en
APD acidificado (5 repeticiones). Los que se caracterizaron según; tasa de crecimiento
micelial por día (mm/día), número y tamaño de esclerocios (mm) promedio/ aislado. Los
resultados obtenidos con los 6 aislados fueron; una tasa de crecimiento micelial promedio
18, 25, 18, 17, 16, 20 mm/ aislado/día. Con un número promedio de esclerocios de 58; 97;
84; 74; 67; 72 / placa Petri/aislado. Con dimensiones promedio de 0,6; 0,67; 0,71; 0,68;
0,78; 0,65 mm de diámetro/esclerocio/aislado respectivamente. Estas características
miceliales y de esclerocios corresponden a Sclerotium rolfsii. Luego se realizó pruebas
de patogenicidad verificándose como agente causal de los síntomas descritos en Statice.

Identificación del estado telomorfico del
agente causal del pié negro del raps, Leptosphaeria maculans (Desm.) Ces. & de Not.,
en la zona sur de Chile
Identification of the teleomorphic stage of the causal agent of the blackleg
disease of oilseed rape, Leptosphaeria maculans (Desm) Ces. & de Not., at southern
Chile
Andrade V., Orlando
Facultad de Recursos Naturales, Universidad Católica de Térmico, Casilla 15-D, Temuco.
e- mail: oandrade54@gmail.com

El pié negro del raps, causado por el hongo deuteromycete Phoma Hngam
(Tode ex Fr.) Desm. (Telomorfo: Leptosphaeria maculans (Dem.) Ces. & de Not.,
constituye una enfermedad endémica en la zona sur de Chile. Descrita por primera vez el
año 1946 en Brassica napus, su etiología ha recibido escasa atención en el país. El
objetivo de este trabajo fue identificar la eventual presencia de la fase sexuada del
hongo causal. Se evaluó visualmente y se colectó, rastrojo de raps proveniente de 2
siembras del año 2008, en la Región de La Araucanía. Restos de tallos con numerosos
cuerpos negros, semiesféricos, ostiolados, ubicados mayoritariamente alrededor del cuello
y sobre tejido interno expuesto, fueron limpiados profusamente, para la extracción,
observación y medición de pseudotecios, ascos y ascosporas bajo el microscopio de luz.
Conjuntamente, se indujo la descarga de ascosporas en Agar-agua + streptomicina y APD para
generar cultivos monospóricos; posteriormente la multiplicación de picnidiosporas en
Agar V8; luego se realizaron pruebas de patogenicidad sobre las var. Artus y Taurus y
finalmente, la determinación de los grupos de patogenicidad de 3 de los aislamientos,
bajo invernadero sobre las var. Westar, Glacier, Quinta y Jet Neuf. Los resultados
obtenidos, esto es pseudotecios de 370 x 410 [j.m en promedio; ascos con doble túnica, de
14 x 124 [j.m, con 8 ascosporas; estas últimas cilindricas, bordes redondeados, color
pardo amarillentas, gutuladas, de 7 x 55 [j.m, mayoritariamente con 5 septos y levemente
contraídas en el septo central y, las pruebas de patogenicidad positivas que reprodujeron
la enfermedad y el reaislamiento de Phoma lingam desde esas lesiones, permitieron concluir
que los pseudotecios observados en el rastrojo corresponden al hongo ascomycete
Leptosphaeria maculans (Dem.) Ces. & de Not., fase telomórfica del agente causal del
pié negro del raps. Los 3 cultivos monoascospóricos evaluados pertenece al grupo de
patogenicidad PG-4 Al. Esta es la primera referencia sobre la fase sexuada del pié negro
del raps cañóla en Chile.

Pudricion del tallo en orobanche
(Orobanche ramosa) causada por Sclerotium rolfsii
Stem Rot of Branched Broomrape (Orobanche ramosa) Causea by Sclerotium rolfsü
Galdames G., Rafael; Díaz S., Jorge
Centro Regional INIA-Carillanca, Camino Cajón-Vilcún Km 10, Temuco. e-mail: rgaldame@inia.cl

Orobanche ramosa es una maleza holoparásita presente en algunas áreas
de la zona central y sur de Chile, la cual se encuentra afectando principalmente a
cultivos industriales como tomate y tabaco. Durante una extensiva prospección realizada
el verano del 2010, en diferentes zonas productoras de tomate, se detectaron plantas de
Orobanche con síntomas de pudrición de tallos en una siembra comercial ubicada en la
zona central (34°142 S, 71°12 O). Junto a los tallos afectados se observó micelio
blanquecino y esclerocios esféricos de alrededor de 1 mm de diámetro. Las plantas de
tomate parasitadas, no mostraban síntomas. En el laboratorio, los esclerocios fueron
tomados directamente con una aguja de disección y transferidos asépticamente a medio de
cultivo APD bajo una cámara de flujo laminar. La germinación de los esclerocios produjo
consistentemente colonias similares a Sclerotium rolfsii las que formaban nuevos
esclerocios dentro de 6- 7 días. Al observar el micelio bajo un microscopio de luz se
detectó la presencia de fíbulas. ADN fue obtenido de uno de los aislamientos y la
región ITS del ADNr fue amplificada con los partidores ITS1/ITS4. La secuencia fue
depositada en el banco de genes (NCBI, Accesión No. HM222638) y mostró alta identidad (e
_> 99%) con similar región de Athelia rolfsii (anamorfo S. rolfsii; Accession Nos.
AB075304, DQ0595578, AF499018, y AB075305). Diferentes pruebas de patogenicidad fueron
realizadas. El inoculo se preparó usando discos de micelio a partir de colonias de 6
días los que fueron transferidos a matraces conteniendo semillas de trigo esterilizado e
incubados por 2 semanas. Tres plantas de Orobanche cada una con 10 -15 vastagos en
diferentes estados de desarrollo (inicio de emergencia, floración y cápsulas formadas)
fueron cuidadosamente transplantadas a maceteros de 35 cm de diámetro. 10 g de inoculo
por macetero fue ubicado alrededor de las plantas. Uno de los maceteros fue usado como
control. Plantas de tomate y tabaco de 45 días, fueron también inoculados con similar
procedimiento. Después de 12 días, las plantas de Orobanche mostraron reducido vigor y
colapso de tallos. Después de 9 días las plantas de tabaco y tomate mostraron marchitez.
En todos los casos, el hongo fue reaislado de todas las plantas inoculadas. Este es el
primer reporte de S. rolfsii afectando a O. ramosa a nivel mundial.
Financiamiento: Proyecto FONDEF D05I10027

Resultados de prospección de Erwinia
chrysanthemi pv. dianthicola
Samson et al. en cultivos de claveles de Chile
Results of Erwinia chrysanthemi pv. dianthicola Samson et al. survey in
carnation orchards of Chile
Muñoz, Marco1; Vergara, Claudia1; Vega, Ernesto2
1 División Protección Agrícola y Forestal, SAG e-mail:
marco.munoz@sag.gob.cl; claudia.vergara@sag.gob.cl
2 Departamento Laboratorios
y Estaciones Cuarentenarias, SAG e-mail: ernesto.vega@sag.gob.cl.

A través del Programa de Vigilancia Agrícola, el Servicio Agrícola y
Ganadero (SAG), determinó a Erwinia chrysanthemi pv. dianthicola Samson et al. en
cultivos de claveles de la zona sur de la Región Metropolitana. Derivado de esta
determinación, el SAG realizó una prospección en cultivos de claveles localizados de
distintas regiones del país durante los años 2009 y 2010, a objeto de conocer la
distribución de esta plaga en el país. Las prospecciones abarcaron entre las Regiones de
Coquimbo a la del Maule. En el año 2009 se captó un total de 451 muestras, en tanto
hasta septiembre del año 2010 se han captado un total de 125 muestras. Las muestras
consistieron en tejido vegetal del tercio medio de las plantas con síntomas sospechosos,
las cuales fueron analizadas por ELISA, pruebas bioquímicas y PCR directo (Reacción en
Cadena de la Polimerasa), en el Laboratorio de Fitopatología del Subdepto. Laboratorios y
ECA, SAG de Lo Aguirre. En todas las regiones presentaron muestras con resultados
positivos a la bacteria, específicamente la Región Metropolitana con 32 muestras
positivas, Valparaíso con 29, Coquimbo con 5 y O’Higgins y Maule con 3 cada una. Este
patógeno será incorporado la nueva normativa de viveros y depósitos de plantas como
plaga a regular en la producción de plantas de claveles.

Phytophthora cryptogea y Phoma exigua,
patógenos causantes de la pudrición de raíz en achicoria
Phytophthom cryptogea and Phoma exigua, pathogens causing root rot in
chicory
Vargas, M.1; Loyola, C.1; Secor, G.2; Rivera, V.2;
Grinbergs, D.1; Zapata, N.1
1 Facultad de Agronomía, Universidad de Concepción, Av. Vicente Méndez 595,
Chillan, Chile
2 Department of Plant Pathology, Dept 7660 Box 6050, North Dakota State
University, Fargo, ND 58108. e-mail: marisolvargas@udec.cl

La achicoria industrial (Cichorium intybus L. var. sativum Bisch.) es
un cultivo relativamente nuevo en Chile. En las últimas temporadas se ha observado una
patología a nivel radicular, la cual provoca síntomas de pudrición. El objetivo de esta
investigación fue determinar él o los patógenos causantes de la pudrición de la raíz
en achicoria y estudiar algunos aspectos de su biología. Se analizaron un total de 700
raíces con síntomas de pudrición, procedentes de tres zonas geográficas (centro, norte
y sur) de la Región del Bio Bio. En todas las zonas, Phoma y Phytophthora fueron los
principales patógenos aislados. Se seleccionaron tres aislados de cada patógeno y se
analizaron características morfológicas de ellos, para esto Phoma fue sembrada en tres
medios de cultivo (agar avena, agar malta y agar cereza) y se midió el crecimiento de la
colonia, color del micelio, producción de picnidios, tamaño de las conidias, la
producción de metabolito E y la presencia de antraquinonas, determinándose que la
especie corresponde a Phoma exigua. Phytophthora fue sembrada en medio líquido V8
clarificado (V8c) para la inducción de esporangios y en medio agar V8c para las
descripciones morfológicas de hifas. Se analizó las temperaturas cardinales y se
determinó que los aislados no crecieron a 5 ó 35°C y su temperatura óptima fue
20-25°C. En cultivos duales con P cinnamomi Al y A2, se indujo la formación de
gametangios y se concluyó que los tres aislados pertenecen al grupo de apareamiento Al.
En base a estos resultados se determinó que la especie es P. cryptogea. Se realizaron
pruebas de patogenicidad y se cumplieron con los postulados de Koch. En inoculaciones en
raíces con micelio de los patógenos se determinó que ambos patógenos requieren de
heridas para infectar. En inoculaciones en discos de achicoria con micelio de los
patógenos a 20,25, 30 y 35°C se observó que el mayor halo de pudrición de Phoma y
Phytophthora se produjo a 20-25°C.
Investigación financiada por ORAFTI SA.

Calidad y fitopatogenos asociados a fruta
de avellano europeo (Corylus avellana L.) Cvs. Barcelona y Tonda di Giffoni en la región
de La Araucanía
Quality of fruit and associated pathogens in european hazelnut (Corylus
avellana L.) cvs. Barcelona and Tonda di Giffoni on La Araucania Región
Guerrero C, J.; Ferrada Q., E.; Pérez F, S.; Concha M., G.
Facultad de Ciencias Agropecuarias y Forestales, Universidad de La Frontera, Casilla 54-D,
Térmico, Chile. e-mail: jguerre@ufro.cl ; eferr08@ufromail.cl ; s.perez03@ufromail.cl ; g.concha01@ufromail.cl

La superficie de avellano europeo se ha incrementado sostenidamente en
la zona centro sur y sur de Chile. Muchas de estas plantaciones ya están en producción,
lo que constituye una alternativa productiva a los rubros tradicionales para el mercado
interno y de exportación. La calidad y condición de la avellana es un aspecto relevante
para su comercialización; en este sentido en las primeras cosechas obtenidas en algunas
plantaciones de la Región de La Araucania se han constatado diversos problemas de calidad
y condición. En la temporada 2010 se evaluaron frutos de cultivares Barcelona y Tonda di
Giff oni provenientes de tres huertos establecidos en tres localidades. Los resultados
indicaron que las alteraciones más frecuentemente observadas para los cultivares Tonda di
Giffoni y Barcelona fueron en promedio, respectivamente: frutos vanos (8% y 1%), dobles
(2% y 3%), arrugados (15% y 18%), cavidad parda (9% y 5%), pardeamiento del endosperma (6%
y 11%), podredumbre bacteriana (1% y 0%) y diversos hongos (22% y 10%). En condiciones de
cámara húmeda en ambiente de laboratorio, se determinaron los siguientes hongos
asociados en el interior del fruto, para los cultivares Tonda di Giffoni y Barcelona
respectivamente: Trichothecium roseum (8% y 3%), Alternaria alternata (3% y 2%),
Aspergillus niger (4% y 2%), Fusarium sp. (4% y 2%), Rhizopus stolonifer (2% y 2%) y
Penicillium sp. (1% y 1 %). La cantidad de frutos dobles, arrugados y con pardeamiento del
endosperma fue mayor en Barcelona que en Tonda di Giffoni. La cavidad parda y la
incidencia de hongos totales fue superior en Tonda di Giffoni, siendo el hongo
predominante en ambos cultivares T. roseum. Los factores de causalidad asociados con esta
pérdida de calidad y condición de la fruta de avellano europeo evaluada, requieren ser
investigados en diversas condiciones de cultivo del avellano en la zona sur, priorizando
estrategias locales de control de fitopatógenos y factores involucrados en la
polinización.

Botryosphaeria parva y Neofusicoccum
parvum asociados con muerte regresiva y cancros en arándanos cv. Brigitta y Elliott en la
región de La Araucanía
Botryosphaeria parva and Neofusicoccum parvum associate with dieback and
cankers in blueberry cv. Brigitta and Elliott in La Araucanía región
Pérez F, S.; Guerrero C, J.; Bensch T, E.
Facultad de Ciencias Agropecuarias y Forestales, Universidad de La Frontera, Casilla 54-D,
Térmico, Chile, e-rnail: s.perez03@ufromail.cl

En diferentes cultivares de arándano establecidos en plantaciones de
la zona sur de Chile, se ha detectado incremento de la incidencia de cancros y muerte
regresiva, requiriendo en muchos casos tratamientos fungicidas, con resultados inciertos.
Estos síntomas han sido asociados con Fusicocciim putrefaciens, F. aesculi,
Botryosphaeria ribis y B. dothidea. Plantas de arándano cvs. Brigitta y Elliott
provenientes de Villarrica, Freiré y Teodoro Schmidt, con muerte regresiva y cancro,
fueron dejadas en cámara húmeda en laboratorio. Desde cancros en tallos de dos y tres
años, se detectó picnidios y peritecios subepidérmicos agrupados o solitarios, maduros
e inmaduros. Las conidias fusiformes a elipsoidales, con paredes lisas y gruesas, base
truncada y ápice oval, con medidas (|om) de
(14,6-)19,7-21,l+2,5(-25,0)x(3,8-)6,l-6,8+l,2(-8,0) |om, L/A=3,2+0,5; características
coincidentes con las señaladas para Neofusicoccum parvum (Pennycook & Samuels) Crous,
Slippers & Phillips. El aspecto y crecimiento micelial en APD fue blanco grisáceo
variando a gris por el haz, amarillo grisáceo a negro por el envés. Las ascosporas
cenocíticas, elipsoidales a ovales, de bordes lisos con contenido granular, base redonda
a levemente truncadas, destacando el ancho en el centro de la espora; estas midieron
(20,4-)26,3-27,7+2,9(-34,0)x(9,0-)ll,0-ll,6+l,l(-14), L/A=2,4 +0,3|^m. Características
coincidentes con Botryosphaeria parva (Pennycook & Samuels) Crous, Slippers &
Phillips. El aspecto y crecimiento micelial fue blanco grisáceo a gris violáceo, y de
gris pálido a negro por el envés; la forma de crecimiento fue radial y algodonosa. Los
Postulados de Koch se cumplieron en el cv. Nelson, para ambas especies. La identificación
de N. parvum y B. parva mediante características morfométricas comparativas según
conglomerado jerárquico de especies afines, fueron corroboradas por análisis molecular
por el CABI Identification Service, Número IMI-398819. N. parvum fue reportada el 2009 en
cvs. Misty (Lampa, RM), Brigitta y Duke (Nancagua, Rapel, Región del Libertador Bernardo
O’Higgins). B. parva ha sido reportada el 2008 en cv. Misty (Lampa, RM) y Duke (Rapel,
Región del Libertador Bernardo O’Higgins). Constituye primera referencia de este
fitopatógeno para la Región de La Araucanía.

Desarrollo in vitro, y virulencia en
cultivares de arándano (Vaccinium corymbosum L.) de Botryosphaeria parva
(Pennycook & Samuels) Crous, Slippers & a J.L. Phillips, y el anamorfo Neofusicoccum
parvum
(Pennycook & Samuels) Crous, Slippers & A J.L. Phillips

Development in vitro, and virulence in blueberry cultivars (Vaccinium corymbosum L.) of
Botryosphaeria parva (Pennycook & Samuels) Crous, Slippers & AJL Phillips, and the
anamorph Neofusicoccum parvum (Pennycook & Samuels) Crous, Slippers & AJL Phillips
Pérez F, S.; Guerrero C, J.; Bensch T, E.
Universidad de La Frontera, Facultad de Ciencias Agropecuarias y Forestales, Casilla 54-D.
Térmico, Chile, e-rnail: s.perez03@ufrornail.cl
, jguerre@ufro.cl , eabensch@ufro.cl

La distribución y variabilidad de los géneros de la familia
Botryosphaeriaceae, exigen utilizar metodologías de identificación más precisas, como
el análisis genético. La caracterización morfométrica y el comportamiento en
condiciones diferenciales es de utilidad comparativa. El objetivo fue caracterizar
desarrollo y fructificación en diferentes sustratos y fotoperiodos, y evaluar virulencia
en cultivares de arándano, de Botryosphaeria parva y Neofusicoccum parvum (ambos
identificados genéticamente). Aislados monospóricos fueron caracterizados por
cromogenicidad, y crecimiento micelial diferencial en medio de cultivo, y para formación
de pseudotecios en acículas de pino. El diseño fue completamente al azar y resultados
analizados mediante ANO VA y prueba de Tukey (p <_ 0,05). El crecimiento micelial
radial para N. parvum y B. parva fue similar en APD y AM a 25°C con fotoperíodo 0-24
(6,24mm/día). A 19°C y fotoperiodo 14-10, N. parvum creció significativamente más
rápido en APD que en AM, mientras que B. parva no difirió. La mayor cantidad de
pseudotecios se produjo en APD a 19°C con fotoperiodo 14-10 horas para N. parvum;
mientras que para B.parva ocurrió en AM a 25°C, fotoperíodo 0-24, no se detectó
pseudotecios. La cromogenicidad fue muy similar entre ambas especies siendo factible
establecer diferencias sólo desde las 96 horas; por el envés de la placa se evidencia
gris oscuro para B. parva y gris amarillento para N. parvum. En acículas de pino en
condiciones de laboratorio, a los 20 días de incubación, se denotaron picnidios
solitarios o agrupados, la mayoría inmaduros, diámetro 200-400 [j.m. No se detectó
formación de pseudotecios para B. parva. Las pruebas de patogenicidad sobre cultivares de
arándano (Brigitta, Elliott y Legacy) fueron positivas y significativamente más
virulentas para B. parva. La mayor susceptibilidad para ambos hongos se produjo sobre
tejidos herbáceos (1 año) y la menor enlignificados (2-3 años). Las características
morfométricas variables de B. parva y N. parvum en distintas interacciones ambientales,
proporcionan aspectos distintivos que contribuyen en la identificación y comparación con
otras especies.

Fitopatogenos cuarentenarios en arándano
alto (Vaccinium corymbosum L.) y manejo del riesgo de plaga
Highbush blueberry (Vaccinium corymbosum L.) quarantine phytopathogens and
pest risk management
Biscupovich, Susana; Acuña, Riña
Servicio Agrícola y Ganadero, Paseo Bulnes 140, piso 3, Santiago, Chile, s-mail: susana.biscupovich@sag.gob.cl

El Servicio Agrícola y Ganadero (SAG), como Organización Nacional de
Protección Fitosanitaria, tiene la responsabilidad de establecer la reglamentación
fitosanitaria para la importación de productos de origen vegetal, a fin de prevenir la
introducción de plagas cuarentenarias que afecten a la producción agrícola y forestal,
armonizada con estándares internacionales sobre medidas fitosanitarias de la Convención
Internacional de Protección Fitosanitaria (CIPF) y el acuerdo de la Organización Mundial
del Comercio (OMC), dentro de los cuales se encuentra el procedimiento del Análisis de
Riesgo para Plagas (ARP) Cuarentenarias. Con el objeto de establecer las regulaciones de
importación para plantas de arándano alto provenientes de los países miembros de la
Comunidad Europea (CE) y de Estados Unidos de Norteamérica, y material de propagación in
vitro de cualquier origen, se elaboraron los correspondientes ARP, identificando a los
fitopatógenos cuarentenarios y estableciendo los Requisitos Fitosanitarios y
Declaraciones Adicionales requeridos para el Manejo del Riesgo de Plaga de cada patógeno.
Los hongos Botryosphaeria corticis, Exobasidium vaccinii y Monilinia vaccinii-corymbosi se
establecen como plagas cuarentenarias para plantas de arándano alto provenientes de
Estados Unidos; los patógenos causales de royas, Pucciniastrum goeppertianum y
Pucciniastrum vaccinii se regulan para los países de la CE y Estados Unidos; y además
para la CE el patógeno Phytophthora ramorum. Blueberry leaf mottle virus es considerado
cuarentenario en plantas y material in vitro provenientes de ambos orígenes, mientras que
Blueberry scorch virus y Blueberry stunt phytoplasma sólo se regulan para Estados Unidos.
El Manejo del Riesgo de cada fitopatógeno considerado como plaga cuarentenaria se
establece en la reglamentación fitosanitaria de importación como Requisitos
Fitosanitarios y Declaraciones Adicionales, los que deben constar en el Certificado
Fitosanitario oficial de la autoridad fitosanitaria del país de origen del material
vegetal, además de las regulaciones para otro tipo de plagas.

Caracterización fenotipica, valores de
EC50 a 9 fungicidas e identificación molecular de aislamientos de Botrytis sp. Obtenidos
de cultivos de peonías de la zona sur de Chile
Phenotypic characterization, EC50 valúes to 9 fungicides, and molecular
identification of Botrytis sp. isolates obtained from Peony cultures at southern Chile
Salgado P., Daisy1; Andrade V., Orlando1; Galdames G., Rafael2,
Gilchrist S., Lucy3; Chahin A., Gabriela2
1 Universidad Católica de Térmico, Casilla 15-D, Temúico, e-mail: dsalgado2005@alu.uct.cl , oandrade54@gmail.com
2 Instituto de Investigaciones Agropecuarias, Centro Regional de Investigación
INIA-Carillanca, Casilla 58-D, Temuco, e-mail: rgaldame@inia.cl
; gchahin@inia.cl
3 Consultora Privada, e-mail: igilcnrist@hotmail.com

La especie Paeonia lactiflora, es una planta ornamental de origen
Asiático, introducida a Chile de forma experimental en 1991. La importancia productiva de
este cultivo ha sido ascendente, constituyéndose como la flor más exportada del país.
Uno de sus problemas fitosanitarios de mayor significancia es la pudrición gris causada
por Botrytis sp., fitopatógeno polífago y polimorfico del cual se reconocen 22 especies
y un híbrido. La especie mas común es B. cinerea, sin embargo, existe una especie de
este hongo descrita como B. paeoniae afectando a peonías, sobre la cual no existen
reportes en Chile. El objetivo de este estudio fue hacer una caracterización
morfológica, determinar los valores de EC50 a nueve fungicidas de uso común e
identificar molecularmente, una colección representada por 18 cepas de Botrytis sp.,
obtenidas desde cultivos de peonías de las regiones de la Araucanía, Los Ríos y Los
Lagos. Los 18 aislamientos monospóricos de Botrytis sp., fueron caracterizados
morfológicamente (color de las colonias, presencia y tamaño de esclerocios) en medio PDA
al 50%. Paralelamente y en el mismo medio, se determinó lo valores de EC50 de cada
aislamiento a los ingredientes activos fungicidas boscalid, clorotalonil, cyprodinil,
dithane, iprodione, kresoxim-metil, pyraclostrobin, tebuconazole y tiofanato metil.
Finalmente, se secuenció el gen Gliceraldehído 3-fosf ato deshidrogenasa (G3PDH), con el
propósito de identificar cada uno de los aislamientos a nivel de especie. Se observaron
escasas diferencias en la velocidad de desarrollo del micelio, sin embargo, se apreció
una amplia variabilidad en el color y en la producción de esclerocios entre los
aislamientos. Los dendogramas contruídos a partir del análisis de las secuencias del gen
G3PDH, nos sugiere la presencia mayoritaria de B. cinerea (13/18) y B. paeoniae (4/18).
Una de las cepas mostró baja homología y no se agrupa con ninguna de las especies de
referencias empleadas (B. cinerea, B. tulipae, B elliptica y B. paeoniae). Los valores de
EC50 no arrojaron conclusiones categóricas entre las especies identificadas. Los menores
valores de EC50 lo obtuvieron los fungicidas cyprodinil, tebuconazole y tiofanato metil.
Investigación financiada por el Programa FIA PIT-2007-0247: «Encadenamiento productivo y
de gestión asociativa para la internalización del cultivo de peonía de la región de la
Araucanía». FIA-VBM-INIA

Identificación y asociación de
fitoplasmas en plantas nativas
Identification and association of phytoplasms in native plants
Andrade S., Nancy; Arismendi S., Nolberto; Miranda O., Pablo
Universidad Austral de Chile, Facultad de Ciencias Agrarias, Instituto de Producción y
Sanidad Vegetal, Casilla 567, Valdivia, Chile. e-mail: nandrade@uach.cl

La murta (Ugni molinae Turcz.), la chaura común (Gaultheria
phillyreifolia (Pers.) Sleumer), el arrayán ( Luma apiculata (D.C.) Burret.) y el
calafate (Berberís microphylla G. Fors.) son especies nativas de Chile. En algunos
individuos de estas especies, se ha observado una sobreramificación de tipo escoba de
bruja, enfermedad causada generalmente por fitoplasmas. Para verificar la presencia de
estos procariontes se analizaron mediante microscopía de fluorescencia (tinción DAPI),
ramillas afectadas de murta, chaura, arrayán y calafate. La tinción permitió observar
cuerpos fluorescentes y pleomórficos en los tejidos del floema, situación que no
ocurrió en plantas asintomáticas de cada una ellas. Además, se realizó un análisis de
PCR-anidada con partidores universales para fitoplasmas en plantas de murta y chaura con y
sin síntomas. Muestras positivas de la reacción PCR fueron secuenciadas para identificar
al fitopatógeno implicado. La secuenciación de los productos amplificados permitió
identificar al fitoplasma dentro del grupo Ash Yellows (16SrVII), estrechamente
relacionado al Candidatus phytoplasma fraxini, siendo el primer reporte que identifica a
un fitoplasma en especies nativas chilenas. Considerando la diversidad de especies de
plantas infectadas por el grupo Ash Yellows, se sugiere que murta y chaura podrían
constituir un reservorio fitoplasmático para otros cultivos agrícolas de importancia
económica. Asimismo, arrayán y calafate se encuentran en proceso de evaluación
molecular para asociar o determinar el grupo de fitoplasma implicado en las plantas
enfermas.

Caracterización de la secuencia genómica
del Virus del mosaico peruano del tomate, un virus emergente en la zona norte de Chile
Characterization of the genomic sequence of Perú tomata mosaic virus, an
emergent virus in the north of Chile
Muñoz, Marcela1; Medina, Claudia1; Sepulveda, Paulina1;
Rojas E., Claudia2; Rosales, Inés-Marlene1
1 Unidad de Mejoramiento y Biotecnología, Instituto de Investigaciones
Agropecuarias, INIA La Platina – Santiago, Chile
2 Instituto de Investigaciones Agropecuarias, INIA Ururi – Arica, Chile.
e-mail: mrosales@inia.cl

El cultivo de tomate en el Valle de Azapa es una de las principales
actividades económicas de la región, debido a que las condiciones climáticas del valle
permiten su cultivo durante todo el año. Sin embargo, últimamente se ha observado una
baja en la producción de este cultivo, debido principalmente a la presencia de
enfermedades causadas por virus. Los síntomas observados han sido mosaicos amarillos,
acucharamiento de las hojas, y deformaciones de frutos. Trabajos anteriores han
determinado que uno de los causantes de esta sintomatología es un potyvirus denomidado
Virus del mosaico peruano del tomate (PToMV). Actualmente se encuentran disponibles en la
base de datos del GenBank 13 secuencias nucleotídicas parciales y 3 secuencias genómicas
completas de este virus. Al utilizar estas secuencias para el desarrollo de sistemas de
diagnóstico e identificación, nos hemos encontrado con una alta variabilidad en la
anotación de las mismas, lo que ha imposibilitado avanzar en el estudios de diversidad y
variabilidad de este agente viral. El objetivo de este trabajo fue lograr la
secuenciación parcial de PToMV, basado en la técnica de clonamiento de cDNA doble hebra.
Para ello, primero se realizó extracción de RNA total desde plantas que presentaba
síntomas de infección viral, corroborándose la presencia de este virus mediante la
amplificación de un fragmento de aprox. 400 bp mediante RT-PCR. Posteriormente, se
realizó síntesis específica de la primera y segunda hebra de cDNA viral y luego ésta
fue digerida con enzimas de restricción de corte frecuente y poco frecuente,
obteniéndose fragmentos de diversos tamaños que fueron posteriormente clonados y
secuenciados. Esta estrategia, nos ha permitido obtener secuencias ubicadas al hacia el
extremo 5′ y 3′ del fragmento inicialmente obtenido de 400bp, ubicado en la región que
codifica para el gen Nlb-replicasa viral. De esta forma, esta metodología se constituye
en una herramienta simple y útil para caracterizar secuencias virales en las que sólo se
cuenta con información genómica limitada.
Financiamiento: Programa de Fomento Productivo, Científico y Tecnológico para la Región
de Arica y Parinacota

Incidencia y caracterización de
enfermedades virales que afectan los cultivos de tomate en la región de Arica y
Parinacota, Chile
Incidence and characterization of viral diseases aff ecting tomato crops in
the región of Arica and Parinacota, Chile
Medina, C.1; Sepúlveda, P.1; Muñoz, M. P.1;
Rojas-Bertini, C.2; Mora, R.1; Sepúlveda, G.3; Brown, J.
K.4; Rosales Villavicencio, I.M.1 1 Instituto de
Investigaciones Agropecuarias, INIA La Platina – Santiago, Chile
2 Instituto de Investigaciones Agropecuarias, INIA Ururi – Arica, Chile
3 Facultad de Ciencias Agronómicas, Universidad de Tarapacá, Arica, Chile
3 Department of Plant Science, University of Arizona, Tucson, AZ, U.S.A.
(e-mail: mrosales@inia.cl) (INIA), Arica, Chile
3 Department of Plant Science, University of Arizona, Tucson, AZ, U.S.A.
(e-mail: mrosales@inia.cl)

El tomate es la principal hortaliza cultivada en el valle de Azapa, que
se ve afectada por diversas enfermedades que disminuyen la producción y afectan al
cultivo en diferentes estados de desarrollo. Las enfermedades de origen viral son una de
las amenazas más serias, provocando síntomas como mosaico, hojas enrolladas, frutos
deformados y enanismo de las plantas. En el presente se estudió la incidencia de
enfermedades de origen viral en el cultivo de tomate, otros cultivos hortícolasy malezas
asociadas, así como la caracterización de mosquitas blancas presentes en los valles de
la región. Desde enero de 2009 a julio de 2010 se han colectado 1139 muestras en los
valles de Azapa y Lluta (tomates, pimentón, plantas endémicas y malezas) las cuales han
sido analizadas por ELISA y PCR para la detección universal de Potyvirus, Virus del
mosaico del pepino (CMV), Virus del mosaico de la alfalfa (AMV), Virus del mosaico del
pepino dulce (PepMV), Virus del mosaico peruano del tomate (PToMV), Virus del bronceado
del tomate (TSWV), Virus del grabado o jaspeado del tabaco (TEV), Virus Y de la papa (PVY)
y begomovirus. También, se han colectado moscas blancas para caracterizar el biotipo de
B.tabaci presente en la región mediante marcadores SSR, además de amplificación y
secuenciación del gen mitocondrial de la citocromo oxidasa I. Los resultados indican una
mayor prevalencia de tres agentes virales en las muestras analizadas, los que se presentan
en infecciones simples y mixtas. Virus pertenecientes al género de Begomovirusse
presentaron en un 51,6% de las muestras, seguido por PepMV (27,1%) y PToMV (15,3%).
Análisis de las secuencias virales revelaron únicamente la existencia de un virus
bipartita que comparte un 94% de identidad con eíVirus del estriado amarillo de la vena
del tomate (ToYVSV), cuyo vector principal es la mosca blanca B. tabaci, detectándose
únicamente el biotipo B en la región.

Análisis de presencia viral en diferentes
órganos de propagación vegetativa de la alcachofa
Analysis of the virus presence in different vegetative propagation organs
of the artichoke
Rosales, Inés Marlene1; Jana A., Constanza2; Mora R., Roxana1
1 Instituto de Investigaciones Agropecuarias INIA La Platina, Santiago, Chile.
2 Instituto de Investigaciones Agropecuarias INIA Intihuasi, la Serena, Chile.
e-mail: mrosales@inia.cl

La alcachofa (Cynara cardunculus L. var. scolymus (L.) Hayek) tipo
Argentina es la variedad cultivada en Chile para la agroindustria. Este cultivo presenta
una problemática viral compleja, que está íntimamente relacionada con su forma de
multiplicación vegetativa. Antecedentes recogidos en las principales áreas productoras
en Europa (Italia, Francia y España) revelan que la totalidad del material utilizado para
formar las nuevas plantaciones estaría infectado por uno o varios virus. En el presente
trabajo se estudió la presencia de cinco agentes virales (Virus del mosaico de la alfalfa
(AMV), Virus del mosaico del pepino (CMV), Virus del bronceado del tomate (TSWV), Virus
del mosaico amarillo del poroto (BYMV) y el Virus latente de la alcachofa (ArLV)) en hojas
jóvenes originadas a partir de tres tipos de propágulos (rizomas, tallos, hijuelos), en
materiales pertenecientes al programa de mejoramiento de alcachofa de INIA-Intihuasi. Para
cada material de propagación estudiado se analizaron 30 muestras independientes. La
detección viral se realizó por RT-PCR utilizando oligonucleótidos específicos para
cada virus incluido en este estudio. Se analizaron las diferencias entre grupos aplicando
la prueba no paramétrica de Kruskal Wallis y luego test post-hoc de Dunn, utilizando el
sofware Infostat, versión 2008. Los resultados indicaron ausencia de los virus CMV, BYMV
y TSWV en todas las muestras y tejidos analizados. En el caso del virus AMV, éste sólo
fue detectado en dos muestras de rizomas. El virus más abundante en el material de
propagación fue ArLV, presente en 97% de las muestras de rizomas y 10% de los hijuelos
analizados. El análisis estadístico reveló diferencias significativas para la presencia
de ArLV en rizomas versus tallos e hijuelos (p>0.001). Dado el carácter latente y
sintomatología prácticamente indefinida para ArLV, se deben considerar posibles efectos
en reducción del vigor o baja en el rendimiento que pueda estar ocasionando en este
cultivo, junto a una adecuada selección del tipo de material que se utilice para la
multiplicación de alcachofas.
Investigación financiada por proyecto Innova-Chile: Aumento del potencial productivo y
comercial de la agroindustria de alcachofa mediante mejoramiento genético y optimización
de factores claves en la cadena de producción.

Dinámicas poblacionales entre Fusaríum
Pseudograminearum y Bipolarís Sorokiniana en tallos de trigo usando QPCR
Population dynamics between Fusaríum pseudogmminearum and Bipolarís
sorokiniana in wheat stems by using real-time qPCR
Moya Elizondo, Ernesto A.1; Dyer, Alan T.2; Hogg, Andy C.2;
Jacobsen, Barry J.2
1 Instituto de Producción y Sanidad Vegetal, Facultad de Ciencias Agrarias
Universidad Austral de Chile, Casilla 567, Valdivia, Chile
2Montana State University, Department of Plant Sciences & Plant Pathology,
Bozeman MT, 59717-3150. e-mail: ernestomoya@uach.cl

Fusaríum pseudogramineamm y Bipolarís sorokiniana son los agentes
causales de la fusariosis de la corona y la pudrición común de la raíz de trigo,
respectivamente, y causan significativas pérdidas en todo el mundo. Las dinámicas entre
poblaciones de estos dos patógenos en estados posteriores a la espigadura del trigo y su
efecto sobre el rendimiento son desconocidos y podría ser críticos para identificar
diferencias en la sobrevivencia de estos patógenos y su potencial de inoculo. El efecto
de inoculaciones con Fusaríum y Bipolarís aplicado por separado o en mezclas en la
siembra del trigo primaveral cv. Hank fue evaluado midiendo número de plántulas
emergidas, rendimiento de grano, y las poblaciones de patógenos presentes en el primer
entrenudo de tallos de trigo en los estados de espigadura, grano lechoso y cosecha
determinadas mediante PCR (Reacción en Cadena de la Polimerasa) cuantitativo en tiempo
real (qPCR). Tres experimentos en dos locaciones con 9 tratamientos y 6 repeticiones
fueron establecidos durante dos años de experimentación. Tasas altas y bajas de inoculo
de Fusaríum redujeron las poblaciones Bipolarís en los ensayos de campo (P <0.05),
pero inoculaciones con Bipolarís no tuvieron efecto sobre poblaciones de Fusaríum. Las
poblaciones de ambos patógenos aumentaron desde espigadura hasta la cosecha con Fusaríum
colonizando los entrenudos básales de los tallos antes que Bipolarís. Ningún patógeno
afecto la capacidad de infección causada por el otro en el primer entrenudo de los tallos
del trigo. La inoculación aumentó la incidencia de la infección y de co­infección de
ambos patógenos en entrenudos individuales con respecto a tallos infectados naturalmente
(P <0,05). En el estado de plántula, ambos hongos, solos o combinados, redujeron el
número de plántulas emergidas en comparación con un control no inoculado durante los
dos años de estudio (P <0,05). El rendimiento de grano y las poblaciones de Fusaríum
estuvieron inversamente correlacionadas (P <0,05), mientras que las poblaciones de
Bipolaris no estuvieron correlacionadas con el rendimiento.

Expresión de genes involucrados en
defensa en Fragaria chiloensis en respuesta al hongo fitopatógeno Botrytis cinerea
Expression of defense-related genes in Fragaria chiloensis in response to
fungal phytopathogen Botrytis cinerea
González, G.1,2; Caroca, R.1; Herrera, R.1; Moya, M.1;
Valdes, J.1; Sandoval, C.1.1
1 Universidad de Talca, Instituto de Biología Vegetal y Biotecnología
1.1 Universidad de Talca, Facultad de Agronomía
2 Universidad Católica del Maule, Fac. Agronomía y Forestal, proyecto FIC.

Uno de los problemas más importantes de la post-cosecha en frutilla
comercialmente cultivada, lo constituye la enfermedad pudrición gris, causada por el
hongo Botrytis cinerea Pers. A través de ensayos de infección en hojas y frutos se
confirmó que Fragaria chiloensis accesión de Contulmo, posee la capacidad de tolerar a
la infección producida por este patógeno. A partir de estos resultados se estudió los
genes involucrados en la respuesta patogénica y que son expresados en F. chiloensis. La
técnica HSS (hibridación substractiva por supresión) permitió identificar dos genes
relacionados a patogénesis de los grupos 5 y 10, denominados FcPR5 y FcPRIO. Se estudió
la cinética del nivel de transcritos con la técnica de la PCR en tiempo real, tanto en
hojas como en frutos de Fragaria chiloensis comparando su expresión con Fragaria x
ananassa, una especie susceptible a este patógeno. FcPRIO se expresó tanto en hojas como
en frutos de Fragaria chiloensis, pero el más alto número de transcritos, se presentó
en los últimos. Por otra parte, FcPR5 se expresó en frutos y hojas de Fragaria
chiloensis, encontrándose mayor inducción en el número de transcritos en las hojas.

Identificación del Virus del cascabeleo
del tabaco (Tobacco rattle virus) afectando peonías en Chile
Identification of Tabacco Rattle Virus affecting peonies en Chile
Sepúlveda, Paulina1; Rosales, Marlene1, Fiore, Nicola2;
Chahin, Gabriela3, Gilcrist, Lucy3; Zamorano, Alan2;
Rivera, Lucia2
1 Instituto de Investigaciones Agropecuarias, INIA La Platina, Santa Rosa
11.610 Santiago, Chile, e-mail: psepulve@inia.cl
2 Universidad de Chile, Facultad de Ciencias Agronómicas Departamento de
Sanidad Vegetal, Av. Santa Rosa 11.315, Santiago, Chile. e-mail: nfiore@uchile.cl
3 Instituto de Investigaciones Agropecuarias, INIA Carillanca, Km 10 Camino
Cajón, Vilcún, Chile, e-mail: gchahin@inia.cl.

La floricultura nacional ha ido incrementando su oferta exportable y
demostrado calidad y competitividad en los mercados internacionales. La diversificación
de especies exportables ha sido una constante especialmente en las regiones del sur del
país, donde se perfila como una oportunidad cierta. El cultivo de peonias (Paeonia
laciiflora Pall.) representa actualmente una interesante alternativa de producción
destinada principalmente al mercado internacional. Sin embargo, diversos problemas
patológicos pueden afectar a esta especie durante su desarrollo y esto es motivo de
estudio gracias a un Programa FIA que INIA Carillanca está ejecutando. Es por tanto, que
el presente trabajo tuvo como objetivo principal determinar los virus presentes en este
cultivo. El estudio se realizó en diversas localidades en la Región de La Araucanía,
Los Ríos y del Libertador Bernardo O’Higgins, colectando muestras en distintos cultivares
de esta flor. Las muestras obtenidas con síntomas de mosaico, anillos cloróticos y
deformaciones de hojas de ambas regiones se analizaron por la prueba de ELISA para la
determinación de virus. Paralelamente una parte de las muestras fueron analizadas
mediante la prueba de PCR, utilizando primero TRV-RNA1-F/ TRV-RNA1-R, descritos por
Robinson D.J. (1992), que amplifican un segmento de 463 bp del gen que codifica para la
proteína viral de 16kDa, ubicada en el RNA-1 del genoma del Virus del cascabeleo del
tabaco (Tobacco rattle virus, TRV). Los resultados indicaron la presencia de un nuevo
virus en esta especie identificado como TRV, el que es transmitido por nemátodos, sin
embargo no fue posible determinar la presencia de estos vectores en el campo, por lo cual
se asume que la principal forma de diseminación es debido a material de propagación, los
rizomas.
Financiamiento gracias a la ejecución del Programa FIA PIT- 2007-0247: Encadenamiento
productivo y de gestión asociativa para la internacionalización del cultivo de peonías
de la Región de La Araucania, cofinanciando por INIA Carillanca y Vital Berry Marketing.

Identificación y caracterización de Agrobacterium
vitis
en material de propagación de vides
Identification and characterization oí Agrobacterium vitis in grape
propagation materials
Mora, Roxana1; Rojas, Adriana1; Burr, Thomas J.2;
Sepúlveda, Paulina1; Marlene Rosales, Inés1
1 Instituto de Investigaciones Agropecuarias (INIA), Centro Regional La
Platina, Santa Rosa 11610, Casilla 439-3, Santiago
2Department of Plant Pathology, NYSAES, Cornell University. e-mail: mrosales@inia.cl

La enfermedad de las agallas del cuello o corona es causada por
bacterias del género Agrobacterium en materiales de propagación de especies frutales y
ornamentales y forestales. En vides, la enfermedad se caracteriza por la aparición de
tumores o agallas que pueden presentarse en el cuello, raíz, tallo y sarmientos. Las
plantas afectadas presentan un menor desarrollo, una mayor susceptibilidad a otros
patógenos y a condiciones ambientales adversas, especialmente a las bajas temperaturas en
invierno. En el presente estudio se utilizaron plantas de vid provenientes de viveros de
la zona central que presentaron alta incidencia de agallas, con el objetivo de determinar
el agente causal responsable de esta sintomatología. Para ello muestras con y sin
sintomatología típica de esta enfermedad fueron analizadas para la presencia de
bacterias del género Agrobacterium utilizando una metodología que combinó: 1)
extracción de ADN directo desde agallas o sarmientos, o alternativamente, luego de
incubar estos tejidos en un medio líquido (extracto de levadura-manitol) con el objetivo
de lograr un enriquecimiento bacteriano, 2) PCR con partidores que amplifican un segmento
de 224 bp del gen VirD2 en cepas patogénicas de Agrobacterium y 3) secuenciación directa
de este fragmento y posterior análisis de secuencias con la interfase BLAST. Utilizando
este procedimiento se obtuvo el amplicón esperado en muestras con y sin agallas, bajo los
dos esquemas de aislamiento de ADN. El análisis de la secuencia nucleotídica de este
fragmento reveló la presencia de A. vitis en todas las muestras secuenciadas,
observándose niveles de identidad del 99% entre el fragmento amplificado y las secuencias
presentes en GenBank para esta especie bacteriana. Actualmente nos encontramos estudiando
la diversidad genética de las cepas a través del análisis de restricción de la región
interespaciadora ubicada entre los genes ribosomales 16S y 23S.

Diagnostico de aislados de Botrytis
cinerea resistente a iprodione mediante PCR en tiempo real
Diagnosis of B. cinerea iprodione resistant isolates by Real Time PCR
Esterio, M.1; Ramos, C.1; Araneda, M. J.1; Michailides,
T.2; Auger, J.1
1 Depto. de Sanidad Vegetal, Fac. de Cs. Agronómicas, Universidad de Chile.
Casilla 2 La Granja, Santiago – Chile; e-mail: mesterio@uchile.cl
2 Dept. of Plant Pathology, University of California, Davis, Kearney
Agricultural Center, USA. (9240 S. Riverbend Ave. Parlier, CA 93648, USA)

El gen Bosl de Botrytis cinerea (Be.), que codifica para una proteína
histidina-kinasa de dos componentes, posee mutaciones relacionadas con altos niveles de
resistencia a dicarboximidas, al menos 5 por sustitución I365S, I365N, I365R, V368F,
Q369P, Q369H, N373S, T447S, además de una mutación nula en la posición S1040STOP Las
mutaciones más frecuentes corresponden a: I365S, I365N y Q369P, Q369H, sugiriendo que
éstas serían las que confieren resistencia a dicarboximidas. Cuatro aislados chilenos de
Be., sensibles a iprodione y 9 resistentes, fueron secuenciados para el gen Bosl,
detectándose una mutación en la posición T1259A en todos los aislados resistentes y las
mutaciones I365N y R311Q en la mayoría de ellos. Además, se detectó una mutación en la
posición I365S y una sustitución en la posición L849V, ambas presentes en sólo un
aislado resistente. A partir de éstos resultados se diseñaron 3 Sondas LNA para la
detección de mutaciones presentes en el gen Bosl: 1) LNA-HEX, cambio de isoleucina por
asparragina, 2) LNA-CY5, cambio de isoleucina por serina y 3) LNA-FAM, detección de
isoleucina (aislados sensibles). Las sondas fueron sintetizadas por Eurogentec. Como
controles positivos se utilizaron aislados Be. iprodione resistentes y sensibles
previamente secuenciados. Se analizaron 690 aislados provenientes de vides Thompson
Seedless, colectados desde esclerocios, floración, envero, precosecha y poscosecha de
tres predios (San Felipe, Alhué y Rancagua), determinándose mediante crecimiento
miceliar los valores EC50, los resultados fueron comparados con los obtenidos por
amplificación de las Sondas LNA (PCR-Tiempo Real). Se detectó un 62,1% de correlación
entre ambas técnicas. Aislados que presentaron resultados no coincidentes fueron
secuenciados, corroborándose en todos éstos la presencia o ausencia de mutaciones
detectadas por PCR-Tiempo Real. Estos resultados señalan que aislados de Be. resistentes
a iprodione, son confiablemente detectados mediante Sondas LNA, indicando que esta
técnica es más sensible, específica y rápida que los métodos tradicionales. Además,
esta técnica permitió ajustar el punto de corte entre aislados de Be. sensibles y
resistentes a iprodione, desde 1 ng-mL”1 a un valor EC50 cercano a 2 ug-mL-1.
Proyecto U. de Chile InnovaChile de CORFO: 07CN13IBM-14

Aislados chilenos de Botrytis cinerea
resistente aiprodione: niveles de virulencia y caracterización del gen Bos1
Chilean B. cinerea iprodione resistant isolates: Virulence levéis and
Gene Bos1 characterization
Araneda, M. J.; Auger,
J.; Ramos, C.; Esterio, M.
Departamento de Sanidad vegetal, facultad de Ciencias Agronómicas, Universidad de Chile,
Casilla 20 La Granja, Santiago-Chile. e-mail: mesterio@uchile.cl

El presente estudio se realizó con el propósito de caracterizar las
diferencias genéticas vinculadas a la resistencia a iprodione asociadas al gen Bosl en
aislados chilenos de B. cinerea de distinto nivel de sensibilidad al fungicida,
considerándose para ello, evaluaciones del nivel de agresividad y secuenciación del gen
Bosl en los aislados analizados. El nivel de agresividad (virulencia) se determinó en 9
aislados altamente resistentes y 4 sensibles (EC50: 1,35-2,47 ^g-mL’1 y 0,26-0,31 ^g-mL’1,
respectivamente), mediante la inoculación de discos de agar con micelio del hongo de 3
días de edad y de una suspensión conidial (2-105 conidias-mL”1) en plántulas de
pepino y en bayas de vid Thompson Seedless con distinto grado de madurez (7°, 14° y 17°
Brix), respectivamente mantenidas en incubación bajo condiciones controladas. Las
evaluaciones se efectuaron mediante mediciones del diámetro de la lesión en las hojas a
las 96 horas post-inoculación y luego de 72 horas en las bayas. Los resultados obtenidos
fueron sometidos a un ANDEVA. La caracterización genética de los aislados se realizó
amplificando completamente el gen Bosl asociado a resistencia a dicarboximidas, mediante 5
reacciones de PCR y el uso de 5 pares de partidores específicos (BF1-BR1, BF2-BR2,
BF3-BR3, BF4-BR4, BF5-BR5) descritos previamente (Ma y Michailides, 2007). Posteriormente
los productos de PCR purificados fueron secuenciados por Macrogen Corp USA. Los resultados
obtenidos en las dos pruebas de virulencia realizadas señalan que los aislados de B.
cinerea resistentes y sensibles presentan niveles de agresividad similares (p<0,05). El
análisis de las secuencias del gen Bosl identificó un cambio aminoacídico en la
posición T1259A en los 9 aislados resistentes y en 8 de éstos las mutaciones I365N y
R311Q, y en el aislado restante un cambio en la posición I365S y una sustitución en la
posición L849V. La mutación en la posición L849V no ha sido descrita anteriormente,
desconociéndose su implicancia en el nivel de resistencia a las dicarboximidas.
Proyecto U. de Chile InnovaChile de CORFO: 07CN13IBM-14.

Caracterización genotipica de las
poblaciones de Botrytis cinerea en cuatro cultivares de uva de mesa en la región del
Libertador Bernardo O’Higgins – Chile
Genotipic characterization of Botrytis cinerea populations in four
table grape cultivars in the Libertador Bernardo O”Higgins Región of Chile
Auger, Jaime; Rodríguez, Claudio; Ramos, Cecilia; Esterio, Marcela
Departamento de Sanidad Vegetal, Facultad de Ciencias Agronómicas, Universidad de Chile.
Casilla 20 La Granja, Santiago – Chile. e-mail: mesterio@uchile.cl

Con el objeto de conocer la composición de la población de Botrytis
cinerea en Thompson Seedless (TS), Crimson Seedless (CS), Sugraone (Sg) y Red Globe (RG) y
su relación con el nivel de infección en floración (F) y Precosecha (PC), en un parral
de la Región del Libertador Bernardo O’Higgins, se colectaron flores o bayas según
periodo desde los distintos cultivares, de parcelas tratadas y no tratadas con fungicidas.
Los parámetros evaluados fueron: a) Nivel de infección (300 muestras por estadio
fenológico y por cultivar); b) Caracterización genotípica mediante PCR-duplex y uso de
partidores específicos (detección de transposones Boty y Flipper), de un número
representativo de aislados, seleccionados al azar del total de aislados recuperados por
estadio fenológico (floración (flores y restos florales), envero, precosecna, cosecha
(bayas) y desde esclerocios (peciolos y sarmientos)). Del total de aislados de B. cinerea
seleccionados por cultivar y estadio (n=20), 10 correspondieron a plantas tratadas y los
10 restantes a plantas no tratadas. Los niveles de infección fueron mayores en las
plantas sin tratamiento fungicida, detectándose diferencias estadísticas entre
cultivares en algunos estadios (p<0,05). En PC, los niveles de infección fueron
significativamente diferentes entre cultivares, siendo mayores en TS y CS no así en Sg y
RG. Del total de aislados genéticamente caracterizados (n=400,100 por cultivar), 83,3%
correspondieron al genotipo transposa, 10% aflipper, 4,2% a vacuma y 2,5% a boty. Los
cultivares con la mayor proporción de aislados del genotipo transposa fueron Sg y RG (92%
y 87%, respectivamente) y deflipper en TS y CS (23% y 9%, respectivamente), detectándose
en éstos cultivares la mayor correlación entre los niveles de infección de F y PC.
Además, en TS los aislados flipper fueron estadísticamente más virulentos que los
transposa (p<0,05), y presentaron una mayor proporción de aislados resistentes a
dicarboximidas e hydroxyanilidas. Aunque los aislados flipper no son predominantes en
Chile, la asociación detectada en los cultivares TS y CS sugiere que su presencia juega
un rol relevante en el proceso de infección de estos dos cultivares, siendo éste uno de
los aspectos actualmente en estudio.

Diagnostico de Botrytis cinerea altamente
resistente a fenhexamid mediante PCR en tiempo real
Diagnosis to B. cinerea f enhexamid high resistant by Real Time PCR
Esterio, M.; Ramos, C.; Araneda, M. J.; Auger, J.
Depto. de Sanidad Vegetal, Fac. de Cs. Agronómicas, Universidad de Chile. Casilla 20 La
Granja Santiago – Chile; e-mail: mesterio@uchile.cl.

Fenhexamid actúa inhibiendo a la 3-ketoreductasa, componente del
complejo enzimático implicado en la demetilación de C-4, durante la biosíntesis del
ergosterol, principal esterol presente en Botrytis cinerea (Be.). El gen erg27 codificante
para la enzima 3-ketoreductasa, posee varias mutaciones relacionadas con distintos niveles
de resistencia a fenhexamid. Los aislados fenotipo HydR3+ presentan alta resistencia a la
molécula (ECg^jj.g-mL”1 y >5(j.g-mL4, crecimiento miceliar y germinación
conidial, respectivamente), y tienen una mutación localizada en la posición F412 de la
proteína, que es la responsable de la alta resistencia a fenhexamid. A partir de aislados
chilenos de B. cinerea previamente secuenciados para el gen erg27 se diseñaron 4 sondas
LNA para la detección de las mutaciones en la posición F412: 1)LNA-HEX, cambio de
fenilalanina por serina, 2)LNA-CY5, cambio de fenilalanina por valina, 3)LNA-ROX, cambio
de fenilalanina por isoleucina (mutación no detectada en aislados de Be. chilenos) y
4)LNA-FAM, detección de fenilalanina (aislados sin mutación sensibles a fenhexamid). Con
las sondas diseñadas se implemento el diagnóstico de HydR3+ mediante PCR-Tiempo Real.
Como controles positivos se consideraron a aislados Be. fenotipo HydR3+ y aislados
sensibles previamente secuenciados. Posteriormente, se determinó el nivel de sensibilidad
a fenhexamid mediante crecimiento miceliar (EC50) a 690 aislados de Be. provenientes de
vides Thompson Seedless (flores o bayas y desde esclerocios (pecíolos)), de tres
localidades (San Felipe, Alhué y Rancagua), y sus resultados fueron comparados con los
obtenidos por amplificación de las sondas LNA mediante PCR-Tiempo Real. Los resultados
indican que ambas técnicas se correlacionan en un 84%. Los aislados que presentaron
resultados no coincidentes entre ambas técnicas fueron secuenciados, corroborándose en
la totalidad de éstos la presencia o ausencia de las mutaciones en los que a través de
PCR-Tiempo Real resultaron ser resistentes o sensibles, respectivamente. Estos resultados
señalan que el diagnóstico de aislados altamente resistentes a fenhexamid mediante
PCR-Tiempo Real con las sondas LNA diseñadas por U. de Chile InnovaChile de CORFO,
además de ser más rápido, es más sensible, específico y por ello más confiable que
las técnicas tradicionales.
Proyecto U. de Chile InnovaChile de CORFO: 07CN13IBM-14

Detección de orobanche (O. minar y O.
ramosa
) contaminando semillas de cultivos mediante PCR en tiempo real
Detection of Orobanche (O. minor and O. ramosa) contaminating seed crops
by using real-time PCR
Galo Ames G., Rafael; Díaz S., Jorge; Gajardo B., Humberto
Centro Regional INIA-Carillanca, Camino Cajón-Vilcún Km 10, Temuco. e-mail: rgaldame@inia.cl

Las plantas del género Orobanche afectan a numerosos cultivos a nivel
mundial, causando significativas pérdidas en los cultivos que parasitan. En Chile, las
especies O. ramosa y O.minor se encuentran afectando, entre otros, a cultivos industriales
(tomate y tabaco) y cultivos forrajeros (trébol rosado), respectivamente. A la fecha, no
existe un método de diagnóstico establecido para detectar contaminación por semillas de
Orobanche en lotes de semillas de cultivos hospederos, por lo que su determinación se
realiza ocasionalmente mediante observación bajo lupa estereoscópica haciéndolo lento e
inespecífico. La región ITS del rDNA de una colección amplia de accesiones de O. minor
y O. ramosa fue secuenciada y empleada para diseñar diferentes partidores, los que fueron
evaluados bajo una plataforma PCR en tiempo real usando SYBR Green y sondas tipo Taqman.
Los ensayos PCR fueron evaluados inoculando 1,3,10 y 100 semillas de O. ramosa en 15 g de
tomate y 30 g de semilla de lechuga; y para O. minor el mismo número de semillas fue
mezclada con 50 g de semillas de trébol. Para cada nivel de inoculación, 5 repeticiones
fueron evaluadas a partir de extracciones independientes. Las muestras de semillas fueron
tamizadas (0.5 mm x 5 min) y el ADN fue extraído a partir de lo recuperado en el tamizado
usando un Kit comercial (Power Plant purification Kit, MOBIO). En cada reacción PCR, ADN
de O. minor, O ramosa y de los cultivos (tomate, lechuga y trébol) fueron incluidos como
controles. Los resultados generados empleando SYBR Green y sonda TaqMan muestran ser
específicos y altamente sensibles, permitiendo detectar 1 semilla de O. ramosa en 15 y 30
g de semilla de tomate y lechuga, respectivamente, y 1 semilla de O. minor en 50 g de
semillas trébol. Sin embargo, los resultados obtenidos con SYBR Green fueron más
robustos, dado que dan señal positiva y más temprana en todas las repeticiones y niveles
inoculados. Los resultados indican que esta tecnología representa una opción confiable y
segura para diagnosticar la contaminación de Orobanche en semillas de cultivos.
Financiamiento: Proyecto FONDEF D05I10027

Los desafíos locales que nos imponen las
enfermedades emergentes y re-emergentes en plantas
Local challenges imposed by the emergent and re-emergent plant diseases
Rosales V., Inés Marlene1; Sepúlveda R., Paulina1; Mora R., Roxana1;
Peña R., Elizabeth1; Medina, Claudia1; Muñoz, Marcela1;
Araya M, Carolina1; Mendoza, Pablo1; Pallas, Vicente2
1 Instituto de Investigaciones Agropecuarias (INIA), Centro Regional La
Platina, Santa Rosa 11610, Casilla 439-3, Santiago
2 Instituto de Biología Molecular y Celular de Plantas (IBMCP) Consejo
Superior de Investigaciones Científicas (CSIC), Valencia, España. e-mail: mrosales@inia.cl

Se denominan enfermedades emergentes aquellas que, en los últimos
años han experimentado un aumento considerable en su incidencia y por ello representan
una amenaza a la agricultura. Las causas tras esta variación pueden deberse a que los
patógenos: i) han modificado su distribución geográfica o su rango de hospederos; ii)
han cambiado sus mecanismos de patogénesis; iii) son de reciente evolución o
recombinación ó, iv) han sido recientemente descritas. Chile no está ajeno a esta
situación, y en nuestra unidad nos hemos involucrado en la identificación, descripción
y caracterización de patógenos emergentes, re-emergentes o recientemente identificados
en el país. Para cumplir con este objetivo, hemos utilizado procedimientos biológicos
(inoculaciones, pruebas de patogenicidad) y técnicas moleculares entre ellas RT-PCR,
secuenciación, análisis de restricción enzimática, la amplificación isotérmica de
ADN y el análisis bioinformático, las que en su conjunto nos han permitido realizar una
rápida identificación y diseño de sistemas de diagnóstico. Se mostrarán resultados y
procedimientos que en el último año permitieron realizar la caracterización parcial de
genomas del Virus plum pox (PPV) y del Virus del estriado amarillo de la vena del tomate
(ToYVSV); identificación de nuevos agentes virales asociados a plantas ornamentales ,
como es el caso del Virus del cascabeleo del tabaco (Tobacco rattle virus, TRV) en
peonía; la identificación de un potyvirus, el Virus latente de la alcachofa (ArLV),
ampliamente distribuido en materiales de propagación de alcachofas y la confirmación de
la especie Agrobacterium vitis asociado a la enfermedad de las agallas del cuello en
material de propagación de vides. En todos estos casos, se sospechó a priori de la
presencia de estos agentes basados en los síntomas evidentes que fueron observados en el
material vegetal, sin embargo nos queda abierto el desafío de realizar la identificación
de virus u otros agentes fitopatógenos cuando éstos no hayan sido caracterizados
previamente o existan en concentraciones extremadamente bajas en el hospedero o incluso,
presenten infecciones asintomáticas.
Financiamiento: Convenio de cooperación del CSIC España – INIA Chile; Programa de
Fomento Productivo, Científico y Tecnológico para la Región de Arica y Parinacota

Análisis de secuencias de las regiones
genomicas 5′-UTR, Pl, CI, 6K2 y Nía de dos aislados chilenos de plum pox virus
Sequence analysis of the 5′-UTR, Pl, CI, 6K2 and Nía genomic regions of
two Chilean Plum pox virus isolates
Peña R., Elizabeth1; Fiore, Nicola2; Mora, Roxana2;
González, Flor2; Zamorano, Alan2; Pallas, Vicente3;
Rosales V., Inés Marlene1
1 Unidad de Mejoramiento Genético y Biotecnología, Instituto de
Investigaciones Agropecuarias, Centro Regional La Platina, Casilla 439-3, Santiago, Chile
2 Facultad de Agronomía, Universidad de Chile, Santiago
2 Instituto de Biología Molecular y Celular de Plantas (IBMCP)
3 Consejo Superior de Investigaciones Científicas (CSIC), Valencia, España,
e-mail: mrosales@inia.cl

La enfermedad de Sharka, causada por el Virus plum pox, es considerada
una de las más devastadoras que afectan a frutales de carozo a nivel mundial. En Chile
sólo se ha identificado la raza tipo D (PPV-D), realizándose su detección en base a
pruebas serológicas y moleculares. Las últimas se han basado en la caracterización de
la secuencia nucleotídica y aminoacídica de la región Nlb-CP o 3′-UTR. Sin embargo, se
ha demostrado que las nuevas razas quiméricas de PPV se han originado a partir de
recombinaciones ubicadas en la región central del genoma viral. Por ello, nuestro
objetivo fue la obtención de la secuencia genómica de las regiones 5′ UTR, Pl, CI, 6K2 y
Nía, en dos aislados chilenos provenientes de damasco y duraznero. Las secuencias se
obtuvieron a partir de siete amplicones que sobrelaparon el genoma viral, similar a la
estrategia usada por Glasa y cois. (2004). Alineamientos múltiples y comparaciones entre
secuencias nucleotídicas y aminoacídicas fueron realizados para determinar el porcentaje
de identidad entre los aislados chilenos (773 y CH112) y las accesiones depositadas en
GenBank para este virus. El porcentaje de identidad nucleotídica fue similar para cada
aislado local, variando entre un 97-99% en todas las regiones analizadas con respecto a
las accesiones PPV-D. Al compararlas con otras razas, este porcentaje varió entre un
39-95% en la región 5′ UTR y entre un 74-97% para otras regiones. Al analizar las
secuencias aminoacídicas (software Geneious), el porcentaje de similitud varió
dependiendo de la región o aislado analizado. Así, para ambos aislados en las regiones
Pl y CI el promedio fue de 98% respecto a las accesiones PPV-D, en cambio en la región
6K2 fue de 90-92% para el aislado 773 y de 92-94% para el aislado CH112 respecto de otros
PPV-D. En función del porcentaje de identidad nucleotídica y de la similitud
aminoacídica, junto a los análisis filogenético de cada una de las regiones analizadas
nos confirman la identidad de estos aislados chilenos como PPV-D.
Financiamiento: Prospección, diseminación espacial y caracterización molecular de Plum
pox virus (PPV) en frutales de carozo (C4-89-14-15, FONDOSAG); Convenio de cooperación
del CSIC España – INIA Chile.

Caracterización molecular de nuevos
fitoplasmas de la vid en Chile
Molecular characterization of new phytoplasmas of grapevine in Chile
Flor González, Alan Zamorano, Ana María Pino, Nicola Fiore
Universidad de Chile, Facultad de Ciencias Agronómicas, Departamento de Sanidad Vegetal,
Av. Santa Rosa 11315, La Pintana, Santiago, Chile. Teléfono: 9785726, Fax: 9785961.
e-mail: nfiore@uchile.cl

Una prospección realizada entre los años 2002 y 2006 ha permitido
detectar e identificar cuatro fitoplasmas que afectan a la vid en Chile: 16SrI-B, 16SrI-C
(ambos pertenecientes a la especie «Candidatus Phytoplasma asteris), 16SrVII-A
(Candidatus Phytoplasma fraxini) y 16SrXII-A (perteneciente al grupo stolbur). Durante el
año 2010 se han encontrado plantas de las variedades Merlot y Syrah, en las regiones de
Valparaíso y Metropolitana respectivamente, que presentaban los típicos síntomas
causados por fitoplasmas tales como hojas encarrujadas y con enrojecimiento que involucra
también a las nervaduras, disminución de producción y, sólo en el caso del Merlot,
bayas deshidratadas. Para la detección con PCR se utilizaron los partidores universales
P1A/P7A y posteriormente un PCR anidado con el par universal R16F2n/R2. Posteriormente,
los distintos aislados fueron caracterizados según sus perfiles de restricción
enzimática mediante RFLP in silico. La caracterización molecular se ha completado
clonando y secuenciando el producto de amplificación de R16F2n/R2. Estos análisis
permitieron la identificación del subgrupo ribosomal 16SrV-A perteneciente al «elm
yellows group (Candidatus Phytoplasma ulmi) en la variedad Syrah y del subgrupo ribosomal
16SrIII-J perteneciente al x-disease group en la variedad Merlot. Los resultados obtenidos
constituyen la primera identificación de los fitoplasmas 16SrIII-J y 16SrV-A en la vid en
Chile.
Trabajo financiado por el Proyecto FONDECYT INICIACIÓN N° 11090180.